庄捷胶体金免疫层析技术就是以胶体金为显色媒介,利用免疫学中抗原抗体能够特异性结合原理,在层析过程中完成这一反应,从而达到检测的目的。+胶体金技术:为诊断提供肉眼可见的显色媒介+膜技术原料的固化载体,层析的动力来源+免疫学技术特异性的检测样本中需要检测物质什么叫胶体金:胶体金是一群以胶体状态,粒径在微米级以下的悬浮于水溶液中的金的颗粒。古代:用于提炼长生不老药物;玻璃染色。近现代:19世纪50年代由MichaelFaraday第一次人工合成纯胶体金1971年胶体金被第一次用于电镜免疫胶体金染色法(IGS)观察沙门氏菌1974年Romano将胶体金标记在第二抗体(马抗人IgG)上,建立了间接免疫胶体金染色法1978年geoghega发现了胶体金标记物在光镜水平的应用+胶体金结构:胶体金颗粒由一个基础金核(原子金Au)及包围在外的双离子层构成,紧连在金核表面的是内层负离子(AuC12-),外层离子层H+则分散在胶体间溶液中,以维持胶体金游离于溶胶间的悬液状态。∆染色—不同粒径,不同颜色∆胶体的特性—充分的溶解性,良好的流动性∆吸附能力—在不改变蛋白性质的情况下,稳定迅速的吸附蛋白粒径颜色2~5nm橙色的10~20nm酒红色30~80nm紫红色+胶体金在电镜水平的应用+胶体金在光镜水平的应用+胶体金在流式细胞仪中的应用+免疫印迹技术什么叫硝酸纤维素膜?以硝酸纤维素为基质,经过匀浆,滚筒铺膜,烘制成型从而制的一定孔径的硝酸纤维素膜。匀浆配方决定硝酸纤维素膜的性质。烘制速度决定硝酸纤维素膜的孔径。硝酸纤维素膜的性质:◊微孔性:层析动力的来源◊多孔性:样本流动性◊蛋白吸附能力:◊样本过滤:孔径(μM)流速(S/4cm)0.21800.451350.875◊滤膜◊分子杂交◊核酸、蛋白转印◊免疫层析是机体识别“自身”与“非己”抗原,对自身抗原形成天然免疫耐受,对“非己”抗原产生排斥作用的一种生理功能。正常情况下,这种生理功能对机体有益,可产生抗感染、抗肿瘤等维持机体生理平衡和稳定的免疫保护作用◊经验免疫学时期在实践中创造性地发明了人痘苗◊经典免疫学时期由人体现象的观察进入了科学实验时期◊近代免疫学时期出现了全新的免疫学理论◊现代免疫学时期从分子水平对免疫系统进行研究抗原抗体——钥匙和锁的关系抗体能够特异性的结合抗原的活性位点。基因工程指按人们意愿设计,通过改造基因或基因组而改变生物的遗传特性,从而获得新的品种货或产品。意义:可以稳定的获得人类所要的蛋白。◊20世纪90年代初,第一个免疫层析产品诞生——用于人绒毛膜促性腺激素(HCG)的测定。◊在其后的20年中,免疫层析产品得到了快速的发展:项目所占百分比早孕检测90%以上毒品检测80-90%疾病检测30-40%◊快速,定性10分钟以内就可得到检测结果。◊无需设备一根检测条就能完成检测◊准确、灵敏灵敏度可以达到10-9数量级◊应用范围不断扩大疾病诊断,食品安全,药物检测,DNA检测◊特异性,灵敏度不断提高◊半定量,定量检测:银染色胶体金免疫层析技术;免疫荧光技术;时间分辨荧光技术HCG检测灵敏度特异性样本早期HCG检测条2000mIU与LH等交叉尿液现在HCG检测条20mIU特异性检测HCG尿液,血清,全血谢谢