hpv+TCT培训

子宫颈疾病一、慢性子宫颈炎子宫颈糜烂子宫颈腺体囊肿子宫颈息肉二、子宫颈上皮非典型增生和原位癌CIN：Ⅰ级（轻度非典型增生）Ⅱ级(中度非典型增生）Ⅲ级（重度非典型增生、原位癌）醋酸涂抹CIN病变区呈白色斑片状碘液试验病变区不着色子宫颈疾病三、子宫颈癌宫颈癌的防治是保障妇女健康和生命的重大课题。是妇产科医生的重要责任。子宫颈疾病发病率高死亡率高发病趋向年轻化子宫颈癌在中国子宫颈癌可预防可治愈正常细胞轻度病变重度病变原位癌浸润癌死亡可预防可治愈癌前病变任何有三年以上性生活或25岁以上有性生活的妇女高危人群:慢性宫颈疾病患者性生活不良者卫生条件差者性保健知识缺乏者筛查对象TCTHPV脱落宫颈细胞早期宫颈癌筛查筛查方法TCT：超薄液基细胞学涂片HPV：HPV病毒杂交捕获法(HC2)分子杂交+化学发光信号放大TCT使TCT专门的宫颈刷深入宫颈内口，外缘抵住宫颈口，顺时针或逆时针旋转3-5周，采集宫颈移行带的脱落细胞。保存液瓶身上标明患者姓名及送检医院TCT样本采集方法及要求诊断分级(TBS)不典型鳞状细胞癌（ASC）意义不明的不典型鳞状细胞（ASC-US）不排除上皮内高度瘤变的不典型细胞（ASC-H）非典型腺细胞（AGC）鳞状上皮内病变(SIL)低度鳞状上皮内病变（LSIL）CIN1高度鳞状上皮内病变（HSIL）CIN2、CIN3鳞状细胞癌（SCC）TCT报告单检测前应停止性行为、停止外用药1-2天取样时禁止用碘酒或者醋酸擦拭宫颈怀孕女性不推荐TCTTCT注意事项HPV根据其致病性分为低危型和高危型两种。2008年诺贝尔生理学/医学奖的获奖研究成果表明HPV病毒是宫颈癌发病的必要条件。子宫颈癌与HPV的关系CIN原位癌免疫因素高危HPV持续感染HPV感染浸润癌细胞分化失调≥30岁9至25年“治病”即“治毒”子宫颈癌与HPV的关系HPV检测的种类HPV8种高危混合型检测HPV19种分型检测HPV-HC2检测备注：①HPV的持续慢性感染被认为是宫颈癌的致病源头因素。因此HPV在临床上已成为一种宫颈癌的筛查手段。从HPV感染到发展成宫颈癌，需要9-25年时间，早期发现HPV感染可以帮助预防宫颈癌。②HPV病毒无特效药物治疗，大部分感染人群可通过免疫力在1年左右自动清除。③上述三种HPV检测均为HPVDNA检测。各类别的特点项目方法学特点HPV8种高危混合型PCR（聚合酶链反应）检测常见的8种高危型别，阳性代表感染了8种种的某一种，不具体分出型别HPV19种分型检测PCR（聚合酶链反应）检测19种HPV亚型，包括15种高危和4种低危HPV-HC2检测HC2（第二代分子杂交技术）具有SFDA、CE和FDA三大机构认证，是目前HPVDNA检测领域的金标准，检测13种HPV混合型感染，阳性代表感染了13种中的某一种，不具体分出型别综合分析：宫颈病变与HPV的病毒载量呈正相关。病毒载量高到一定程度才会引起病变。①PCR方法在拷贝数很低的情况下即显示阳性，而实际上并不会导致宫颈病变，敏感性过高，达不到宫颈癌的筛查目的，易造成患者不必要的恐慌，但价格较HC2便宜。②HC2方法是当拷贝数高于5000拷贝才判定阳性，与宫颈病变相关性更高，目前指南中均为HC2检测。报告模版报告模版报告模版报告模版各类别的推广路径从学术角度应常规推广HPVHC2检测介绍产品的方法学优势：①假阳性率低②三大权威机构认证介绍产品的临床符合度：①其cutoff值更合理，结果判定与临床相关性更高②避免过高假阳性给患者带来的恐慌因当地客户消费水平限制，可推广HPV8种或19种检测各类别的推广路径消费水平很低的客户HPV8种高危混合型检测阴性常规定期筛查复查HPV19种分型检测，明确具体阳性型别，半年后再次复查有无持续感染阳性消费水平较低的客户HPV19种分型检测阴性常规定期筛查阳性复查HC2检测，如为阴性，今后进行常规筛查；如为阳性，可活检或半年后复查19种分型检测中国癌症基金会推荐随访次/3-5年TCT+HC2随访次/1年HC2(－)相应治疗TCT≤ASCUSTCT≥ASCHHC2(+)HC2(－)HC2(+)阴道镜、病理（+）筛查方案推荐TCT1、每年一次2、30岁以后，连续3次正常者，每2－3年一次HPV检测每年与细胞学同时检测，最久不超过每3年一次筛查时间妇科宫颈取材在不同部位分别取材分别装入不同容器容器上除注明患者基本信息外,必须注明钟点位宫颈癌相关检测E6E7mRNA0102030405060708090100QiagenHologicRocheGen-ProbeSensitivitySpecificityPPVSensitivity,Specificity,andPPVagainstCIN2+Biopsy…notPap1HPV-DNA现状1.Szarewski,etal,ComparisonofPredictorsforHigh-GradeCervicalIntraepithelialNeoplasiainWomenwithAbnormalSmears–CancerEpidemiologicalBiomarkers,November2008特异性不高对于宫颈癌的敏感性也不足DatacompilationofthreepublishedKaiserstudies(ObGyn2010;116:76–84,JLGTD2010;14:287A,GynOnc2011;121:309-313)byDr.MarshallAustinMDPhD,ProfessorofPathologyandDirectorofCytopathologyMagee-WomensHospitalofUniversityofPittsburghMedicalCenter.HC2FALSENEGATIVESINCANCER-KAISERSTUDIES2003-2009PAPResultCxCaHC2+HC2-Carcinoma4n/a4HSIL79781ASC-H29254AGC30273AIS2n/a2LSIL826ASCUS26215Endometrial1n/a1NegativePap53449TOTAL23219735超过7年的追踪中，15％的癌症被HC2漏掉。30HPV-DNA现状宫颈癌筛查新方案---E6E7mRNA宫颈癌的发病机理：•高危HPV持续的慢性感染•病毒基因整合•肿瘤抑癌基因的失活、端粒酶活性高表达•免疫监视的逃逸无论感染哪一种高危型别的HPV，E6/E7mRNA在宫颈癌中均普遍表达。E6E7mRNATransientInfection(80%)UpregulationofE6andE7mRNAexpressionCervicalCancer(3-5%)HPVInfectionHPVDNAPersistentInfection(20%)HPV特异性频谱1.Szarewski,etal,ComparisonofPredictorsforHigh-GradeCervicalIntraepithelialNeoplasiainWomenwithAbnormalSmears–CancerEpidemiologicalBiomarkers,November20083.Voss,etal,AssessmentofFluorescenceinSituHybridizationandHybridizationandHybridCapture2AnalysesofCervicalCytologySpecimensDiagnosedasLowGradeSquamousIntraepithelialLesionfortheDetectionofHighGradeCervicalIntraepithelialNeoplasia–AQCH,June20104.Weiss,etal,IntracellularHPVE6,E7mRNAQuantification(HPVOncoTect)PredictsCIN2+inCervicalBiopsiesBetterthanPAPScreeningforWomenRegardlessofAge-AcceptedArchivesofPathologyandLaboratoryMedicine2011.各种HPV检测导致CIN2+（基于组织活检结果）的特异性的临床研究:0%28%92%33%Qiagen1Roche1p161HPVONCOTECT43q26348%69%Gen-Probe144%Hologic2100%42%2.Einstein,etal,ClinicalvalidationoftheCervistaHPVHRand16/18genotypingtestsforuseinwomenwithASC-UScytology.GyneOnc2010Aug1;118(2):116-22.33E6E7mRNA检测实验方法：流式荧光原位杂交(SimultaneousUltrasensitiveSignal-amplifiedHybridizationInSitu--SUSHI)检测目标：E6andE7mRNA在以下两个阶段中的量化…每个细胞中的mRNA过度表达过度表达细胞所占的比例E6E7mRNA临床适应症临床适应症：①用于宫颈癌筛查②辅助细胞学-/HPVDNA+的分流，确定其致癌性③辅助ASCUS分流④辅助LSIL分流标本要求标本取材：拭去多余的分泌物，宫颈刷抵住宫颈口，同一方向转动5-7圈，刷取足量宫颈脱落细胞，放于宫颈细胞液中保存。标本保存：冷藏（2-8℃）,送至北京实验室报告模版处理方案LSILHPVE.Tect+HPVE.Tect-阴道镜6-12个月复查细胞学ASCUSHPVE.Tect+HPVE.Tect-阴道镜6-12个月复查细胞学细胞学-/HPV高危混合型PCR+HPV16/18+HPV16/18-阴道镜HPVE.Tect-阴道镜12个月复查细胞学和HPVHR细胞学-/HPVHR+HPVE.Tect+HPVE.Tect-阴道镜12个月复查细胞学和HPVHRHPVE.Tect+处理方案谢谢!