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基因时代（）为生命科学提供源动力！PCR室作业指导书文件编号：ABCD-3-PR-01~31第A版编制：审核：批准：生效日期：2006年8月8日ABCD人民医院检验科ABCD人民医院检验科PCR室作业指导书文件编号：版本/修订号：A/0主题内容编制说明生效日期：20060808第2页共65页编制说明本分册文件可以作为单独申请卫生部PCR实验室认可的全套作业文件，因此作为ISO15189质量管理体系的PCR室作业文件，要对其重复部分进行删减，各检验科根据各自用途要求与特点进行选用，特此说明。2006年8月8日ABCD人民医院检验科PCR室作业指导书文件编号：版本/修订号：A/0主题内容目录生效日期：20060808第3页共65页目录序号主题内容代号页号1PCR实验室的设置及管理ABCD-3-PR-0172PCR实验室工作制度ABCD-3-PR-0283PCR实验室内务管理制度ABCD-3-PR-0394PCR实验室人员的配置及管理ABCD-3-PR-04105PCR实验室清洁程序ABCD-3-PR-05126PCR标本唯一标识编号规则ABCD-3-PR-06137PCR基因扩增实验室的要求ABCD-3-PR-07148PCR废弃物的处理程序ABCD-3-PR-08179基因扩增检测及结果分析ABCD-3-PR-091810临床标本的保存操作程序ABCD-3-PR-102111标本的采集运送接收程序ABCD-3-PR-112212PCR生物防护措施ABCD-3-PR-122413PCR实验室化学试剂配ABCD-3-PR-132514PCR实验室记录管理制度ABCD-3-PR-142615PCR应急处理程序ABCD-3-PR-152816PCR试剂的质检标准操作程序ABCD-3-PR-163017PCR消耗品进购质检贮存程序ABCD-3-PR-173118PCR室内质量控制操作程序ABCD-3-PR-183319PCR室间质量控制操作程序ABCD-3-PR-193520PCR温度校准标准操作程序ABCD-3-PR-203621核酸扩增荧光仪操作维护规程ABCD-3-PR-213722干式恒温器操作维护规程ABCD-3-PR-224323离心机操作维护规程ABCD-3-PR-2345ABCD人民医院检验科PCR室作业指导书文件编号：版本/修订号：A/0主题内容目录生效日期：20060808第4页共65页24冰箱操作维护规程ABCD-3-PR-244725生物安全柜操作维护规程ABCD-3-PR-254926移液器操作维护规程ABCD-3-PR-265127沙眼衣原体核酸扩增荧光检测ABCD-3-PR-275428乙肝病毒核酸扩增荧光检测ABCD-3-PR-285629丙肝病毒核酸扩增荧光检测ABCD-3-PR-295830结核杆菌核酸扩增荧光检测ABCD-3-PR-306031高速冷冻离心机操作维护规程ABCD-3-PR-3162附录表格检验科基因检测实验室平面图ABCD/001实验室主要负责人简历表ABCD/002PCR实验室工作人员一览表ABCD/003PCR扩增接收标本记录表ABCD/004拒收标本记录本ABCD/005标本超低温保存记录表ABCD/006PCR试剂购买记录表ABCD/007试剂验收记录表ABCD/008PCR室特殊耗材验收记录表ABCD/009普通耗材验收记录表ABCD/010室间质评记录表ABCD/011PCR室内质控记录表ABCD/012室内质控图ABCD/013PCR实验室环境温湿度记录表ABCD/014冰箱温度质控图ABCD/015仪器使用记录表ABCD/016ABCD人民医院检验科PCR室作业指导书文件编号：版本/修订号：A/0主题内容目录生效日期：20060808第5页共65页仪器设备维护和校准记录表ABCD/017紫外消毒车消毒记录表ABCD/018应急处理登记表ABCD/019PCR废血标本处理交接表ABCD/020垃圾处理记录表ABCD/021实验室清洁消毒记录表ABCD/022PCR检验报告单ABCD/023耗材进购记录表ABCD/024试剂耗材供应商一览表ABCD/025ABCD人民医院检验科PCR室作业指导书文件编号：版本/修订号：A/0主题内容修订页生效日期：20060808第6页共65页修订页序号文件编号页码需更改的内容更改内容批准人批准日期1234567891011121314151617181920ABCD人民医院检验科PCR室作业指导书文件编号：ABCD-3-PR-01版本/修订号：A/0主题内容PCR实验室的设置及管理生效日期：20060808第7页共65页PCR实验室的设置及管理1．目的：建立实验室的合理设置和科学管理，防止实验污染，保证检测结果的可靠性。2．适用范围：本程序适用于分子诊断室的设置、工作流程和日常管理等。3．负责人：4．细则：4．1分子诊断室为检验科下设的专业实验室，从事临床标本的基因扩增检测及相关科研工作。4．2本实验室采用实时荧光定量PCR技术作为临床基因诊断的主要手段，实验室分为三个区：试剂准备区（第一区）、标本处理区（第二区）、扩增分析区（第三区）。每一工作区配备专用的设备、仪器、辅助设施、耗材、清洁用品、办公用品、专用工作服，并有明显的区分标识。各区标签颜色：红色（第一区）、白色或绿色（第二区）、蓝色（第三区）；专用工作服：粉红色（第一区）、白色（第二区）、蓝色（第三区）。标本的接收则在检验科标本接收处进行。4．3各工作区专用的仪器设备、办公用品、工作服、实验耗材和清洁用具等，不可混用。4．4各工作区配置、功能和内务管理见各相关SOP文件。4．5严格遵守从“试剂准备区→标本处理区→扩增分析区”的单一流向制度，不得逆向进入前一工作区。4．6非本实验室工作人员，未经许可不得入内；进修、实习或其他科室人员因科研活动需要，进入实验区域（试剂准备区、标本处理区、扩增分析区）需首先熟悉本程序的各项规定并严格遵守执行，在本实验室人员监督指导下进行。4．7实验完毕后做好清洁消毒工作。5.本文涉及以下图表：1.实验室设计平面图ABCD人民医院检验科PCR室作业指导书文件编号：ABCD-3-PR-02版本/修订号：A/0主题内容PCR实验室工作制度生效日期：20060808第8页共65页PCR实验室工作制度1．目的：保持良好的工作环境，以确保检测结果的可靠性，防止交叉污染，防止差错、事故及纠纷的发生。2．适用范围：所有本实验室人员。3．负责人：4．细则：4．1本实验室进行临床基因扩增检测及相关实验工作，不得进行其它实验操作。4．2各区的用品不得混用。4．3在各区的实验操作过程中，操作者必须戴手套和帽子，严格按照操作规程。4．4试剂准备区只能进行试剂的贮存及配制等相关操作（见相关SOP文件）。4．5标本处理区只能进行临床标本的保存，核酸提取、保存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成（见相关SOP文件）。4．6扩增分析区只能进行DNA或cDNA的扩增、实时荧光PCR扩增产物的分析（见相关SOP文件）。4．7进行实验时严格执行本实验室的各项操作规程，及时做好各种操作记录，力求准确、可靠。实验完毕，做好清洁、整理及分析统计等工作。4．8室内仪器由专人负责，未经许可，不得随意使用或挪用；爱护使用仪器，定期进行保养与维修。4．9爱护医院财产，注意安全；离开实验室前应关好门窗，检查水、电等。ABCD人民医院检验科PCR室作业指导书文件编号：ABCD-3-PR-03版本/修订号：A/0主题内容PCR实验室内务管理制度生效日期：20060808第9页共65页PCR实验室内务管理制度1．目的：保证实验室日常内务管理及清洁工作顺利进行。2．适用范围：实验室相关人员及医院相关清洁工人。3．负责人：4．细则：4．1非本室工作人员未经允许不得进入实验室。4．2各区的用品不得混用。4．3实验人员要有强烈的时间观念，按时上下班，不迟到、早退。4．4进入实验室的工作人员必须遵守实验室的单一流向的规定，禁止逆向走动。4．5所有仪器（如PCR扩增仪）须有专人负责，并有使用维护记录；实验人员必须熟悉仪器性能后方允许操作，并严格遵守操作规程。4．6所有试剂进购、配制、质检、使用均要有记录，未经允许不得随意带出本实验室。4．7每天了解仪器运转情况及试剂使用情况，确保仪器整洁安全，试剂合格使用。4．8各区的各种清洁消毒均应有记录，工作衣消毒时注意各区应分开进行处理。4．9注意保持实验室卫生整洁，严禁在室内抽烟、吃零食，非实验操作人员应尽量少入。4.10下班前检查门、窗、水、电，节假日应指定人员负责检查实验室的仪器、设备。ABCD人民医院检验科PCR室作业指导书文件编号：ABCD-3-PR-04版本/修订号：A/0主题内容PCR实验室人员的配置及管理生效日期：20060808第10页共65页PCR实验室人员的配置及管理1．目的：保证实验室有足够数量的合格的具备开展该类实验能力的实验人员。2．适用范围：适用于实验室人员配置、管理、培训及考核。3．负责人：4．细则：4．1人员要求4．1．1本实验室工作人员应为医学检验专业或相关专业毕业，具有中级以上技术职称或专科以上学历。4．1．2实验室工作人员应参加卫生部或省临检中心举办的PCR技术培训，并取得合格证。4．1．3对于新进入本室的人员，如尚未取得PCR技术培训合格证，应在实验室有培训合格证的上级技术人员的指导下进行实验工作，实验报告由有资格人员出具，并应在最短的时间内取得上岗培训合格证。4．2人员配置4．2．1实验室应根据工作需要配备足够的工作人员，目前实验室有主管技师2人、技师1人，3人都已获得培训合格证，视工作量的增加和业务发展需要，会适当增加工作人员。4．2．2各级技术人员履行相应的工作职责。4．3人员培训及考核4．3．1实验室负责人或负责人指定人员参加每年卫生部PCR室间质评总结会。4．3．2实验室工作人员每1～2年至少参加1次PCR技术的省级或国家级继续教育项目，参加相关学术交流会议。4．3．3安排未取得上岗培训合格证的工作人员在合适的时间内参加技术培训。4．3．4科室不定期组织实验室内部实验人员学习、更新核酸扩增方面的相关知识，提升自身的理论学习水平。特别是在标本接收区采血、接收标本的人员，需定期对其进行有关核酸扩增技术，标本采集、保存、运输等知识的培训。一些科室的送检标本由该科室的人员送到标本接收区，对这些临床医护人员也要定期进行有关核酸扩增技术，标本采集、保存、运输等知识的培训。4．3．5本实验室工作人员每年进行考核一次,考核内容:a)日常工作质量b)室内质控测评c)室间质控测评ABCD人民医院检验科PCR室作业指导书文件编号：ABCD-3-PR-04版本/修订号：A/0主题内容PCR实验室人员的配置及管理生效日期：20060808第11页共65页d)在抱怨处理中的表现4．3．6本实验室工作人员实行严格奖惩制度,有下列表现者可受奖:a)工作质量高,质控测评成绩优秀者b)有科研能力,并有一定数量和质量的论文发表c)有独创性工作成果,经鉴定认可者d)受到有关部门或群众嘉奖者有下列情况者将受到惩处:a)工作质量问题较多，质控测评成绩不合格；b)不遵守规章制度并造成一定影响；c)不求上进。4．3．7本实验室工作人员奖惩方法分精神及物质两类,经实验室上报医院及有关部门批准后执行。4．3．8本实验室工作人员均建立业绩档案,实行能进能出制度,不断吸收高质量人员,加强培训和提高,对于不适合本室工作的人员要及时调离。4．4人员管理4．4．1实验室建立所有工作人员的技术档案，包括：学历、任职资格、发表论文、研究成果、培训等相关材料复印件。4．4．2技术档案分文本档案和电子档案，文本档案每年更新1次，电子档案随时更新。5.本文涉及以下表格实验室主要负责人简历表PCR实验室工作人员一览表培训申请表年度培训计划表培训记录表员工培训履历表人员档案卡ABCD人民医院检验科PCR室作业指导书文件编号：ABCD-3-PR-05版本/修