仪器分析作业题--外标法内标法

一、外标一点法【含量测定】芍药苷照高效液相色谱法（附录ⅥD)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.05mol／L磷酸二氢钾溶液(40：65)为流动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备取经五氧化二磷减压干燥器中干燥36小时的芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品粗粉约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，浸泡4小时，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品含芍药苷(C23H28O11)不得少于1.8％。解：设测得对照品溶液和供试品溶液峰面积为A对=550000A样=7800已知对照品溶液浓度C对=0.5mg/mlml/mg0071.0ml/mg5.05500007800)(）（对对样样CAACmg5.177l101000ml25l10ml/mg0071.0VCm样样样供试品中芍药苷的含量X%=%5.35%1001000g5.0mg5.177药典规定药材含芍药苷(C23H28O11)不得少于1.8％，供试品中芍药苷的含量为35.5%，故供试品药材合格。二、外标两点法【含量测定】黄芪甲苷照高效液相色谱法（附录ⅥD）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(32：68)为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于4000。对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品中粉约4g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内径为1.5cm，柱高为12cm)，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40％乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70％乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液10μl、20μl，供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。本品按干燥品计算，含黄芪甲苷(C41H68O14)不得少于0.040％。解：设测得对照品溶液色谱峰面积分别为A1=259457A2=523039，测得供试品溶液色谱峰面积A3=2983。已知对照品浓度C对=0.5mg/ml，对照品进样量g5mg005.0l10ml/mg5.0m1g10mg01.0l20ml/mg5.0m2根据对照品峰面积和进样量可得如下图所示方程即y=2.6e+5x-4125，得a=2.6e-4125，b=5010000020000030000040000050000060000000.511.522.5y=2.6E+5x-4125.0进样量峰面积进样量峰面积线性(峰面积)供试品溶液峰面积A3=2983.带入方程，得到供试品溶液进样量m3=1420μg=0.00142g供试品中黄芪甲苷含量为%875.8%1004201000500142.0%glmlgX药典中规定药材干燥品种含黄芪甲苷(C41H68O14)不得少于0.040％，供试品中黄芪甲苷含量为8.875%。故供试品药材合格。三、内标法【含量测定】照气相色谱法(附录ⅥE)测定。色谱条件与系统适用性试验聚乙二醇20000(PEG-20M)毛细管柱(柱长为30m，内径为0.53mm，膜厚度为1.0µm)，柱温为160℃。理论板数按樟脑峰计算应不低于20000。校正因子的测定取萘适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含4mg的溶液，作为内标溶液。另取樟脑对照品、薄荷脑对照品、冰片对照品各30mg、10mg、20mg，精密称定，置同一50ml量瓶中，精密加入内标溶液5ml，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取lµl，注入气相色谱仪，计算校正因子。测定法精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，精密加入内标溶液5ml，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取1µl，注入气相色谱仪，测定，冰片以龙脑峰、异龙脑峰面积之和计算，即得。本品每1ml中含樟脑(C10H16O)应为25.5～34.5mg；含薄荷脑(C10H20O)应为8.5～11.5mg，含冰片(C10H18O)应为17.0～23.0mg。解：（1）校正因子的测定设测得萘及樟脑、薄荷脑、冰片对照品溶液的峰面积分别为A萘=180000，A樟脑=450000，A薄荷脑=500000，A冰片=520000。由题已知萘及各对照品溶液浓度分别为C萘=4mg/ml，C樟脑=0.6mg/ml,C薄荷脑=0.2mg/mlC冰片=0.4mg/ml。据公式对对内内CAfAC可得17.0ml/mg6.0450000ml/mg4180000樟脑樟脑萘萘樟脑CACAf（2）含量测定已知C萘=4mg/µl，f樟脑=0.17，f薄荷脑=0.45，f冰片=0.22。设测得各物质的峰面积及萘的峰面积分别为A萘=180000，A樟脑=135980，A薄荷脑=20780，A冰片=99870据公式内内样样CAAfC可得ml/mg69.2550ml/mg418000013598017.0萘萘樟脑樟脑樟脑CAAfC故每毫升供试品中含有樟脑25.69mg，薄荷脑10.33mg，冰片18.86mg。药典规定药品每1ml中含樟脑(C10H16O)应为25.5～34.5mg；含薄荷脑(C10H20O)应为8.5～11.5mg，含冰片(C10H18O)应为17.0～23.0mg。故供试品合格