ACL系列血凝仪检测原理介绍及血栓止血临床基础

ACL全自动凝血/纤溶分析仪生产商：IL公司简介始建于1959年处于全球实验室诊断领域的领先地位推出第一台血气分析仪最先推出火焰光度计获得离心式分析技术的专利MilanoOfficeIL:InstrumentationLaboratory销售网络:欧洲、中东、拉丁美洲、太平洋地区总部在Milano（意大利）美国和加拿大总部在Lexington（美国）从1992年开始，BC与IL结成战略联盟，从产品和市场双方面合作，共同领导全球血液和流式细胞自动分析的发展。生产商：IL公司简介ACL系列发展的轨迹1985年ACL8101988年ACL100/200/300/300R1991年ACL1000/2000/3000/3000Plus1995年ACLFutura1996年ACL60001997年ACL70002000年ACLAdvance2001年ACL90002002年ACL80002005年ACLTOP目前在市场上推出的ACL型号ACL100ACL200ACL7000ACL9000ACLAdvanceACLTOPACL各型号的共同特点光学凝固法:常规检测：PT/FIB,APTT,TT特殊检测：因子，FIB-Clauss，PC，PS，LAC，APC-R，口服抗凝药试验提供凝固反应曲线FIB:两种检测方法PT衍生FIB法和FIB-Clauss法标准RS-232接口，方便联网条形码扫描器，方便样品信息输入和实验室管理完美的仪器和仪器原厂试剂组合提供精确的结果完备的测试试剂、质控品、校正品组合先进的基因重组试剂、合成试剂：PT（基因重组、WHO标准）、APTT（合成）检测动物标本结果可靠（ACL7000以上）各检测方法的检测项目凝固法PT,APTT,TT,FIB(PT-Based&FIB-Clauss),FactorsII,V,VII,X,VIII,IX,XI,XII,ProteinC,ProteinS,APC-R,LAC,PCX,HPX发色底物法Anti-thrombin,Heparin(普通&低分子),PLG,PlasminInhibitor,ProteinC免疫比浊法D-Dimer,vWFAg,vWFAct,ProteinS,HS-CRPACL各型号的共同特点不同型号血凝仪检测原理介绍ACL00/7000ACL8/9/10000ACLFUTURA/ADVANCEACLTOPACL00/10000检测原理凝固法（散射比浊）凝固法：检测根据Fib的凝固形成颗粒，检测900光散射值的增加值。信号经过软件设计的一系列数学运算法则连续监测凝固过程曲线，获得结果。发色底物法通过物质的反应显色，检测吸光度变化值。免疫比浊法（透射比浊）借助抗原抗体反应系统，检测反应终点吸光度变化值；只表示含量，不反映所检物活性。ACL00/10000检测原理凝固法（光散比浊检测）波长：660nm(ACL00/10000)发色底物法（透射光比色检测）波长：405nm(ACL200以上仪器)免疫比浊法：（透射光比浊检测）波长：405nm(ACL200以上仪器)凝固法发色底物和免疫比浊法ACL00/10000检测原理离心式液体分配系统：加入样品和试剂后，反应盘1200rpm旋转，使其在瞬间充分混匀，结果准确、精密度高；ACL00/10000检测原理清洗缓冲液WashREmulsion的作用：清洗样本和试剂针内外表面；作为光学凝固（散射比浊法）中的检测参比100％不能用其它自配的清洗液替代反应盘Rotor：20个独立反应杯；每杯各有两个隔开的腔；内圈装样本或第二试剂；外圈只装试剂；旋转过程，试剂和样本瞬间混匀；ACLADVANCE检测原理凝固法（透射比浊，880nm,180度角检测）ACLADVANCE检测原理发色底物法：405nmACLADVANCE检测原理免疫比浊法：405nmACLTOP检测原理凝固法（透射比浊，671nm,180度角检测）ACLTOP检测原理发色底物法：405nmACLTOP检测原理免疫比浊法：671nm或405nm光学凝固法检测优点直接测定，结果可靠数据连续监测、本底扫描提供凝固反应曲线，为实验室及临床提供更多信息去处黄疸血、高脂血本底，消除干扰准确测定低纤维蛋白原样品结果可靠光散检测原理每次测试收集1100个数据点，连续平均数据处理方式，利用先进的第一微分和第二微分法则测定结果，稳定可靠，精密度高，重复性好光学法提供凝固曲线TimeLS本底扫描，消除黄疸、高血脂干扰数据连续监测凝固点确定：最大反应速度，与光散绝对值无关干扰因素游离血红蛋白〈1g/L,溶血到一定程度,本身会激活凝血因子甘油三酯〈7.7mmol/L胆红素〈256.5umol/L血栓止血临床基础血小板激活一次血栓形成血管収縮凝固因子激活二次血栓形成線溶系统激活血栓溶解止凝血过程内因系外因系纤维蛋白凝固系活性化XII因子組織因子内皮細胞血管収縮血管収縮血管損傷(出血)血小板①血小板粘着放出凝集一次血栓②③内因系外因系纤维蛋白原線溶系活性化④XII因子ｔ－PA血液中包含的凝血因子血凝瀑布学说外源性凝血途径与PTPT是反映外源性凝血途径中II、V、VII、X因子水平的实验，PT只反映凝血因子水平，并不反映凝血因子是否活化。PT的检测原理inBloodinPlasmaPT试剂FibrinIIIExtrinsicSystem测量凝血时间without组织因子Calcium(Ca2+)without正常范围10-14secIX37癈Ca2+,PLCa2+,PLXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIIVIXXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIVIIIIIXVIIIBloodSamplingTrisodiumCitratePTINR为了解决这一问题，目前国际上采用给予PT试剂标定国际敏感度指数(internationalsensitivityindex,ISI）的方法,并进以通过相关公式计算出:“国际标准化比值”InternationalNormalizedRatio,INR。PT-INR口服抗凝药监测的重要指标据了解PT存在的主要问题在于INR!由于：所以INR不好可能原因有：病人PT或PT质控时间不对（可以通过以上几点检查）正常人PT时间（MNPT）不对试剂对应仪器的ISI值不对INR=PTSampleTimeMNPTISI不适用INR的三种情况包括INR不适用于测定口服抗凝药初期的病人血浆，凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ的水平和活性在血浆中半寿期不同，所以在口服抗凝药初期这些因子的作用与口服抗凝药稳定后PT延长中起的作用是不同的INR不适用于肝病凝血因子缺陷病人的血浆INR不适用于非抗凝治疗而PT延长的病人血浆。PSATIII维生素K依赖凝血因子XIIXICa++IIaFibrinogenFibrinTFCa++PLPLPLPLCa++VIIa维生素K依赖凝血因子PCATIIIIXIIXVIIIntrinsicpathwayExtrinsicpathwayCommonpathway口服华法令治疗机理和过程华法令通过拮抗维生素K的作用从而减少和阻止维生素K依赖的凝血因子II、VII、IX、X的合成，从而影响内源性凝血途径。PTINR与华法林抗栓机制：华法林减少凝血酶原（II）和FX的作用更重要，减少FVII和FIX相对较弱。华法林抗栓作用起效需要6d，主要减少凝血酶原的生成（凝血酶原有较长的半寿期）。华法林抗凝作用起效需要2d。PTINR与华法林华法林抗栓效应的另一个提示血栓病人口服抗凝药治疗过渡中，肝素与华法林重叠直至PTINR延长至有效治疗范围，因为凝血酶原半寿期为60~72h，故重叠4d是必要的。PTINR与华法林WHO的建议术前预防深静脉血栓2.0~2.5髋关节和股骨骨折术前预防2.0~3.0深静脉血栓或肺梗死治疗2.0~3.0短暂发作的局部缺血2.0~3.0心肌梗死3.0~4.5动脉血栓3.0~4.5心瓣膜置换或修复3.0~4.5PTINR与华法林国内资料术前预防深静脉血栓1.5~2.5髋关节和股骨骨折术前预防2.0~2.5深静脉血栓或肺梗死治疗2.0~2.8短暂发作的局部缺血2.0~2.8心肌梗死2.5~3.0动脉血栓2.5~3.0心瓣膜置换或修复2.5~3.0活化部份凝血活酶时间APTT内源性凝血途径与APTT是反映内源性凝血途径中VIII、IX、XI、XII因子水平的实验，APTT只反映因子水平，并不反映凝血因子是否活化。APTT的检测原理inBloodinPlasmawithoutwithoutwithoutIXXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIIXXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIAPTTReagentActivatorPLIntrinsicSystemMeasureClottingTimeEllagicacid,silicaetc.Calcium(Ca2+)NormalRange20-40secCaCl2IVPhospholipidFibrin37癈XIIIXXIVIIIXVIIICa2+,PLCa2+,PLBloodSamplingTrisodiumCitrate肝素与APTT普通肝素通常采用APTT监测，以判断疗效，该值一般应维持于正常值的1.5~2.5倍。不同设备与试剂APTT参考值略有不同。即使APTT在治疗范围内，也可出现严重的出血并发症。最初24~48小时内的APTT亚治疗量范围。凝血因子VII缺陷症（遗传性、获得性）外源途径缺陷APTT(N)PT(A)APTT(N)PT(N)APTT(A)PT(N)APTT(A)PT(A)共同途径缺陷凝血因子I、II、V、X缺陷症（遗传性、获得性）因子XIII定性实验阳性内源途径缺陷有出血症状无出血症状凝血因子VIII、IX、XI缺陷症（遗传性、获得性）凝血因子XII、PK、HMWK缺陷症（遗传性、获得性）凝血因子XIIII缺陷症（遗传性、获得性）出血性疾病的诊断FIB的检测原理(Clauss方法)inBloodinPlasmawithoutwithoutwithoutIXXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIIXXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIThrombinReagentFibrinMeasureClottingTimeThrombinNormalRange180-360mg/dLCalculatedforFibrinogenconcentration37癈IIIBloodSamplingTrisodiumCitrate凝血酶时间TT检测原理试剂成分：浓缩牛凝血酶浓缩缓冲液：含0.5mol/L氯化钙试剂配制：用NCCLSII型或相同质量的去离子水按1:5(1+4)倍数按需稀释浓缩缓冲液，用来溶解凝血酶，用前混匀反应原理：在过量的纯化的牛凝血酶的存在下，样本中的纤维蛋白原被转化为纤维蛋白，仪器检测凝固形成所需要的时间类似于Fib-C检测。凝血酶的含量低于Fib-C检测（TT-5：3.0UNIH/mL;Fib-C:17.5UNIH/mL）反应时间取决于共同途径的因子水平丁香园论坛资料：=131&id=8057748&sty=1&tpg=1&age=0TT检测的临床意义弥散性血管内凝血（DIC）的评估肝素抗凝治疗和溶栓治疗的监测纤维蛋白或者纤维蛋白原降解产物（FDP）异常监测遗传性、获得性纤维蛋白原的数量或者质量异常监测纤溶亢进监测谢谢