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第1章生物安全和医院感染实验室生物安全•实验室生物安全水平•生物安全保障与生物恐怖•生物安全技术•暴露的处理•感染性废弃物的处理•感染性物质的运输实验室生物安全水平•实验室生物安全（laboratorybiosafety）:描述防止实验室发生病原体或毒素意外暴露及释放的防护原则、技术以及实践。•危险度评估•生物安全基本设备•实验室生物安全水平危险度等级危险度1级：无或极低危险，对人或动物常不致病。危险度2级：个体危险中等，群体危险低。对人或动物致病，传播有限，预防和治疗措施有效。危险度3级：个体危险高，群体危险低。常致人或动物严重疾病，不传播，预防和治疗措施有效危险度4级：个体和群体危险均高。常致人或动物严重疾病，易传播，缺乏有效防治措施。微生物的危险度评估内容•危险度等级•微生物的稳定性、致病性和感染数量•暴露的潜在后果•自然感染途径•实验室感染途径、所操作微生物的浓度和标本量、拟进行的实验室操作、基因技术•适宜宿主•动物研究和实验室或临床报告信息•当地具备的有效的预防或治疗措施生物安全基本设备•生物安全柜•个人防护设备：防护服、面部防护、手套、鞋、呼吸道防护。注意：离开实验区域时应脱卸个人防护装备并洗手；脱手套、结束生物安全柜工作后，或离开实验室之前均应洗手。生物安全柜Biologicalsafetycabinets，BSCs生物安全柜分三级•Ⅰ级：设计简单，目前仍广泛使用保护操作者和环境，不保护操作对象•Ⅱ级：保护操作者和操作对象操作危险度2级和3级微生物穿正压防护服可处理危险度4级微生物•Ⅲ级：对操作者防护最好操作危险度4级微生物适用于三级和四级生物安全水平实验室生物安全柜使用•处理感染性物质•处理潜在空气传播的物质•密封离心杯的装样、取样•可能产生气溶胶的操作微生物实验室生物安全水平及防护BSL：生物安全水平BSC:生物安全柜GMT:微生物学操作技术规范生物安全水平实验室类型危险度等级实验室操作安全设施Ⅰ基础教学、研究1级GMT不需要Ⅱ诊断、研究实验室2级GMT、生物危害标志BSC个人防护装备Ⅲ特殊的诊断、研究3级BSL2增加特殊防护服、进入制度、定向气流BSC和／或所有实验室工作需要的基本设备Ⅳ危险病原体研究4级BSL3增加气锁入口、出口淋浴、污染物品的特殊处理BSCⅢ级或Ⅱ级，穿正压服、双开门高压灭菌器、经过滤的空气生物安全保障与生物恐怖•实验室生物安全保障（laboratorybiosecurity）是指单位和个人为防止病原体或毒素丢失、被窃、滥用、转移或有意释放而采取的安全措施。•生物恐怖（bioterrism）是使用致病性微生物或毒素等作为袭击手段,通过一定的途径散布危险因子,造成疾病的暴发、流行,导致人群失能和死亡。生物安全技术•感染性或潜在感染性物质的操作：标本运送、感染性或潜在感染性物质操作、感染性物质冻干管、血清分离、朊蛋白。•常用设备的使用：接种环、移液管、离心机、生物安全柜等。•血液和其他体液的标准预防措施。血液和其他体液标准预防措施•标本置密闭、防穿刺、防渗漏容器。•戴手套、面罩和眼罩处理标本。操作完成脱手套并洗手。•在BSL内处理已知或未知感染性标本或微生物。•禁止用嘴吸取移液。•使用针头和注射器时遵循标准预防指南。•工作结束后被污染的工作台用合适的消毒剂消毒。•污染的、重复使用的物品先消毒，再清洗。•被污染的设备在维修、送往厂家或报废之前消毒。•离开实验室前脱防护服、洗手。暴露的处理•锐器伤及其他损伤•潜在感染性物质的食入•潜在危害性气溶胶释放•潜在感染性物质溢出•离心管破裂感染性废弃物的处理•感染性废弃物：指丢弃的感染性或潜在感染性物品。•处理原则：在实验室内清除污染后丢弃；或经适当包裹运送到其他地方处理。应对参与丢弃者不造成潜在危害。•清除污染的方法：高压蒸汽灭菌器（首选）、焚烧等。感染性物质的运输遵循国内外相关规定。通常为三层包装•内层容器：装载标本。应密闭，防水、防渗漏，贴指示内容物的标签•第二层包装：吸水性材料，当内层容器泄漏时，吸收溢出的液体•第三层包装：保护第二层包装免受物理性损坏高度危险性物质的运输要求严格，需查阅相关规定消毒灭菌•概念•消毒灭菌技术•消毒灭菌效果评估消毒与灭菌•消毒（disinfection）：去除或杀灭大多数微生物的过程。•灭菌（sterilization）：通过物理或化学方法杀灭或去除所有微生物的过程。医疗器械分类根据传播病原体、发生感染的危险性，分三类•高度危险类：进入正常无菌部位的物品必需灭菌•中度危险类：接触黏膜、不完整皮肤的物品高水平消毒•低度危险类：接触完整皮肤的物品低效消毒剂消毒消毒与灭菌技术及效果评估消毒灭菌技术•热力灭菌包括湿热灭菌、干热灭菌优点：方便、经济、有效，效果监测标准化•化学（液体或气体）用于处理热敏感物品化学灭菌：过氧乙酸、环氧乙烷、福尔马林化学消毒剂：分为高效、中效、低效•辐射：γ辐射、紫外线•过滤技术效果评估：监测消毒灭菌过程优于自消毒灭菌物品分离微生物化学消毒剂种类根据消毒效果分为高效、中效、低效三类•高效：杀灭芽胞、分枝杆菌、病毒、真菌、细菌常见-过氧乙酸、次氯酸钠、戊二醛等•中效：杀灭分枝杆菌、病毒、真菌、细菌常见-酚类衍生物、乙醇和异丙醇•低效：杀灭细菌常见-季铵类化学消毒剂消毒效果影响因素•消毒剂的成分•浓度•接触时间•温度•PH值•有机物含量•钙或镁含量医院感染•医院感染病原体•常见的医院感染•医院感染流行病学•医院感染调查概念•医院感染（NosocomialInfection,NI）又称医疗机构相关感染（healthcare-associatedinfection,HAI），指在医院中获得的感染。包括外源性和内源性感染。•外源性感染：来自另一感染者或环境内源性感染：来自患者自身。正常菌群迁徙至机体其他部位，或受损组织、抗菌药物不合理使用导致病原体过度生长•入院时处于潜伏期的感染，不属于医院感染。社区获得性感染可能经患者带入医院，感染患者及医务人员，导致医院感染。医院感染病原体几乎所有病原体都可以导致医院感染•细菌：多重耐药细菌分离率升高•病毒：病毒感染季节，儿科及老年病区易，发生相应病毒的医院传播。•真菌：免疫功能低下患者，或因侵入性操作感染。常见白假丝酵母菌、曲霉菌属、新型隐球菌、隐孢子虫属、放线菌、球孢子组织胞浆菌•其他：支原体、寄生虫等。常见医院感染•泌尿道感染•呼吸道感染•外科伤口感染•血流感染•其他：烧伤、皮肤和软组织感染，眼和结膜感染、子宫内膜炎、产后生殖道感染，胃肠炎、肝炎等。医院感染流行病学•来源：人类、环境•传播途径：以空气、接触及媒介传播更重要•易感人群–年龄–免疫状况–基础疾病–其他感染–特殊药物–创伤•医院感染的预防–去除传染源–切断传播途径–增强宿主抗感染能力医院感染调查临床微生物实验室在医院感染控制中的职责•制定标本采集、运送、处理规范。•遵循标准化操作程序处理标本，预防实验室感染。•监测消毒、灭菌效果，必要时进行环境监测。•及时将具有流行病学意义的结果通知相关人员。•必要时进行医院感染病原体的流行病学分型。•定期报告感染病原菌在不同解剖部位、病房的发生率及耐药谱。有效的感染控制依赖实验室准确检测病原菌的能力暴发调查的实验室诊断•分离病原体并证实暴发涉及的所有患者感染相同菌株，为调查传染源提供线索。•分离菌尽可能鉴定到种，不常见或难鉴定的菌株应送有能力的实验室。•病原体分型病原体分型技术•特点：分辨率高重复性好分型能力强•类型：表型分型生物分型特异性分型