陕西森弗生物技术有限公司Agilent1100高效液相色谱仪操作目的:规范Agilent1100高效液相色谱仪操作程序范围:适用于实验中心Agilent1100高效液相色谱仪的使用责任:实验中心相关人员对此程序负责内容:1.仪器组成及开机1.1仪器组成:Agilent1100高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。1.2开机:1.2.1接通电源,打开计算机及工作站其它各部件开关,约30秒钟后,各部件进入待机状态,指示灯为黄色或无色。1.2.2打开HPChemStations,进入Instrument1online状态,约30秒钟后,计算机进入工作站的操作页面。该页面主要由以下几部分组成:最上方为命令栏,依次为File,RunControl,Instrument等;命令栏下方为快捷操作图标,由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等;左边为样品信息栏;中部为工作站各部件的工作流程示意图,依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告;中下部为动态监测信号;右下部为色谱工作参数:进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。2.色谱条件的设定(色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现)2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。将鼠标陕西森弗生物技术有限公司移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等,单击一下,即可显示该参数的设置页面,键入设定值后,单击“OK”,即完成。2.2调用已设置好的文件在命令栏“Method”下,选择“LoadMethod”,或直接单击快捷键操作的“LoadMethod”图标,选定文件名,单击“OK”,此时,工作站即调用所选用文件中设定的参数。如欲进行修改,则可同2.1项下,在色谱工作参数中作修改;亦可在命令栏“Method”下,选择“EditEntireMethod”,在每个页面中键入设定值,单击“OK”。即完成。2.3编辑新文件先在命令栏“Method”下,选择“NewMethod”,之后再在命令栏“Method”下,选择“EditEntireMethod”,在每个页面中键入设定值,完成后,SaveMethod”,先在命令栏“Method”下选择“SaveMethod”,给新文件命名,单击“OK”。即完成。3.仪器的运行当色谱参数设置完成后,单击工作站流程图右下角的“on”仪器开始运行。此时,画面颜色由灰色变成黄色或绿色,当各部件达到所设定的参数时,画面均变为绿色,左上角红色的“notready”变为绿色的“ready”,表明可以进行分析。4.进样分析(有单个样品分析和多个样品连续分析两种)4.1单个样品分析如无自动进样器,在命令栏“RunControl”下,选择“SampleInfo……”可输入操作者(OperatorName)、数据存贮通道(Subdirectory)、样品名(SampleName)等信息,单击“OK”,然后陕西森弗生物技术有限公司即可用手动进样器进样。如有自动进样器,在命令栏“RunControl”下,选择“SampleInfo……”或点击快捷操作的“一个小瓶”图标,之后单击样品信息栏内的小瓶,选择“SampleInfo……”即打开了样品信息页面,可输入操作者(OperatorName)、数据存贮通道(Subdirectory)、进样瓶号(Vial)、样品名(SampleName)等信息,单击“OK”。即完成。4.2多个样品连续样品分析单击快捷操作的“三个小瓶”图标,之后单击样品信息栏内的样品盘,选择“SequenceTable”,即进入连续样品序列表的编辑,可输入进样瓶号、样品名进样次数、进样体积等信息,单击“OK”。即完成。否则仪器将运行至色谱参数设置中所设定的分析停止时间方结束分析。4.3单击信息栏上方绿色的“Start”,自动进样器即按“4.1”或“4.2”设置的程序进行分析,如欲终止分析,可单击信息栏上方绿色的“Stop”,否则仪器将运行至色谱参数设置中所设定的分析停止时间方结束分析。5.数据分析在命令栏“View”下选择“DataAnalysis”,则进入数据处理页面。该页面最上方为命令栏,依次为File,Graphics,Integration……等,命令栏下方为快捷操作图标,如积分、校正、色谱图、单一色谱图调用、多色谱图调用、调用方法、保存方法等.5.1调用色谱图在命令栏“File”下,选择“LoadSignal”或单击快捷操作的“单一色谱图调用”图标选择色谱图文件名,单击“OK”,画面陕西森弗生物技术有限公司中即可出现所调用的色谱图。5.2积分先调用所要分析的图谱,在命令栏“Integration”下选择“Integration”或单击快捷键操作的“积分”图标,此时仪器按内置的积分参数给出积分结果。如欲对其中参数进行修改,可在命令栏“Integration”下选择“IntegrationEvents”或单击快捷键操作的“编辑/设定积分表”图标,此时,在屏幕下方左侧出现积分参数表,右侧为积分结果,在积分参数表中按实际的要求输入修改的参数,如斜率、峰宽、最小峰面积、最低峰高等。在命令栏“Integration”下选择“Integration”或单击快捷键操作的“对现有色谱图积分”图标,仪器即按照新设定的积分参数重新积分,完成后,单击积分参数表中“取消积分参数”的快捷图标,保存所作的参数修改,单击“OK”,即可退出。6.分析报告的打印在命令栏“Report”下,选择“SpecifyReport”或单击最右侧快捷键操作的“定义报告及打印格”(右下角带叉的报告画面)图标,根据实际要求选择报告的格式和输出形式等,单击“OK”。即完成。例如,可在“Destination”项下选择“Screen”;在“QuantitativeResult”项下,对“Calculate”选“Percent”、对“BasedOn”选“Area”、对“SortedBy”选“Signal”;在“Style”项下,对“ReportStyle”选“Short”,再依次选择“Sampleintooneachpage”、“Addchromatogramoutput”之后选择快捷键操作的“报告预览”图标,可预览报告的全貌,单击“Print”,即可进行报告的打印。最后,单击“close”退出此操作页面。陕西森弗生物技术有限公司7.关机7.1在命令栏“View”下,选择“MethodandRunControl”,回到主控制页面,在命令栏“File”下,选择“Exit”,单击“Yes”,关闭“Instrument1online”,再单击“Yes”,关闭输液泵、柱温箱及检测器氘灯。7.2在化学工作站页面上,在“File”下选“Close”,退出“HPChemStation”。7.3关闭计算机及所有工作站所有各部件电源开关。8.仪器使用从开机开始应填写《科仪器使用记录》,结束使用后应把《仪器使用记录》填写完整。