天然药化答辩

海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究海洋微藻的活性筛选及藏药植物活性成分的研究海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究前言第一章海洋微藻抗肿瘤活性筛选第二章藏药肉果草活性成分研究结语汇报内容海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究前言癌症全球发病及死亡人数发病1010万人死亡620万人2000年发病1200万人死亡760万人2007年我国发病及死亡人数213239130140839920002005总人数男性女性癌症发病人数1171441767599111425565199020002005总人数男性女性癌症死亡人数海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究癌症治疗方法化疗手术放射天然产物合成化学组合化学天然产物天然产物衍生物基于天然产物的合成物植物微生物动物J.Nat.Prod.,2007,70:461-77海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究寻找天然抗肿瘤活性物质论文研究思路藏药肉果草海洋微藻次级代谢产物抗肿瘤活性筛选单体化合物抗肿瘤活性研究海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究第一章海洋微藻抗肿瘤活性筛选海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究海洋微藻微藻超过4万种（约1万种，占海洋生物物种40.86％）抗肿瘤抗菌抗病毒抗炎毒素作用分布海洋湖沼河流温泉大气冰川分类硅藻金藻蓝藻甲藻裸藻隐藻海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究浸膏藻体微藻培养活性测试离心分离藻体藻液甲醇提取配制甲醇溶液活性筛选技术路线海虾生物致死法细胞测试法海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究90株海洋微藻中，活性藻株共10株，其中硅藻4株，金藻5株，绿藻1株。（样品终浓度为100μg/mL）藻株（编号）硅藻金藻绿藻B117B173B190B200H52H16H17H18H42C11致死率%65.945.532.756.450.040.056.130.756.430.3海虾生物致死法测试结果海洋微藻抗肿瘤活性筛选结果海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究90株海洋微藻中，活性藻株5株，其藻体提取物对小鼠白血病P388细胞具有不同程度的细胞增殖抑制活性。抑制率%微藻藻体提取物浓度（g/L）0.250.512.5510CylindrothecaspB16237.2745.1547.8252.3059.5074.58PrymnesiumpatelliferaH40－25.5331.4540.6644.7554.45NannochlorisoculataC1429.7932.2737.7839.2841.3744.46PavlovagyransH42－22.0430.7833.4238.6838.84CoccolithuspelagicusH2－－20.4830.7534.4335.75小鼠白血病P388细胞SRB法测试结果海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究ControlCylindrothecaspPrymnesiumpatelliferaNannochlorisoculataPavlovagyransCoccolithuspelagicus活性藻株P388细胞镜检结果20h时样品对细胞的作用海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究小结10株微藻具有海虾生物致死活性。本章通过海虾生物致死法和细胞测试法从90株海洋微藻中筛选得到：5株微藻具有细胞增殖抑制活性，其中4株显示细胞调亡活性，1株显示细胞坏死活性。海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究第二章藏药肉果草活性成分研究海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究中药资源中药材民间药民族药藏药蒙药维药傣药壮药植物生长特点抗寒、抗旱性强光合作用强有效积累高植株矮小并呈垫状或莲座状植株根系发达且与地面呈水平状展开西藏自然环境气温低、降水少、空气稀薄、日照充足藏北高原年均气温0℃以下降水量200毫米以下藏南谷地年均气温10℃左右降水量从西往东南为200-2000毫米独特的药效藏药海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究肉果草（LanceatibeticaHook.f.etThoms）为透骨草科（Phrymaceae）植物，藏名巴丫巴。产于西藏、青海、四川、甘肃、云南，生于海拔1700－4500米的山坡草地、疏林中或河滩及沟谷旁。肉果草微甘、苦、寒；全草有养肺排脓、清热止咳作用；治肺炎、肺脓肿、哮喘、咯血、咳嗽失音。花、果能治心脏病、血性肿瘤（血癌）、肠绞痛、肠粘连。海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究二十五味肺病丸含有肉果草成分的上市药回生甘露丸海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究Extraction&Isolation肉果草干草95%乙醇提取粗提物大孔树脂蒸馏水、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇、90%乙醇30%组份50%组份70%组份90%组份海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究Extraction&Isolation海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究CompoundsfromLanceatibeticaHook.f.etThomsNewNewNewNew海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究白色无定形粉末[α]–5.15°(c0.13,MeOH)。UV(MeOH)λmax(logε)204(4.483),231(3.815),282(3.565)nm新化合物结构研究Compound1(LantibesideB)海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究HRESI-MSofcompound1651.2311[M+H]+C31H38O15海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究IRSpectrumofCompound1-OH海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究1HNMRofcompound1inDMSO-d6d,J=8.2Hzbrsd,J=1.8Hzbrd,J=7.2Hzd,J=7.2Hzdd,J=8.2,1.8Hz1H2H3HΦH×6糖OH×6糖-H1糖-H12H2H2H2H-OCH3糖H×11海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究13CNMR(DEPT)ofcompound1inDMSO-d6C×6CH×19CH2×5CH3×1糖C1100.2ppm糖C1103.7ppm芳香季碳×6芳香sp2C×6O-CH×9O-CH2×4-OCH355.7ppm100.9ppm海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究HMQCofcompound1inDMSO-d6H-AC-4,8C-AH-4e,8eH-2,6H-G1H-4a,8aH-X1ΦH×6C-1,5C-2,6H-1,5C-BABC海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究H-6”H-5”H-2”H-5’H-2’H-6’ABA和B片断1H-1HCOSYofcompound1inDMSO-d6苷元海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究HMBCofcompound1inDMSO-d6H-2”H-2’C-6”C-6’H-5”C-1”C-1’H-5’C-3”C-3’ABA和B片断苷元海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究C-3’C-4’H-AC-3”-OCH3HMBCofcompound1inDMSO-d6ABA和B片断苷元海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究1H-1HCOSYofcompound1inDMSO-d6C片断H-1,5H-4e,8eH-4a,8aH-2,6C苷元海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究HMBCofcompound1inDMSO-d6H-2,6C-1,5C-4,8H-4e,8eH-4a,8aC-2,6CC片断苷元海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究HMBCofcompound1inDMSO-d6H-2”H-2’C-2,6苷元连接海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究H1”’H2”’H-3”’H-4”’H-5”’H-2””H-1””H-3””H-4””H-5””1H-1HCOSYofcompound1inDMSO-d6糖基海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究C-4”H-1”’HMBCofcompound1inDMSO-d6糖基的连接位置海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究HMBCofcompound1inDMSO-d6H-6”’C-1””GluH-1”’XylH-1”’’J=7.32HzJ=6.72HzD-木糖1β6-D-葡萄糖糖基海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究H+水解D-葡萄糖L-葡萄糖D-木糖L-木糖GC-MS比较化合物标准品HDMS-TMS糖基D或L构型确定海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究Compound1Compound2Compound3Compound4海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究H-2=H-6:4.86-4.9ppmH-2=H-6:4.67-4.75ppmH-6:4.36-4.45ppmH-2:4.76-4.85ppm相对构型NMR特征化合物编号24.6464.6524.7864.3524.7864.3624.7564.301234H-NMR11,2-反-5,6-反-1,5-顺1,2-顺-5,6-反-1,5-顺相对构型确定海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究化合物1的NOE差谱H-6H-2H-4aH-8aΦH1,2-反-5,6-反-1,5-顺海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究化合物2的NOE差谱H-4eH-5H-2H-2’H-6’H-6H-8aH-2’’H-6’’1,2-顺-5,6-反-1,5-顺海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究新化合物1新化合物2[α]+13.1°[α]–10.7°[α]–5.15°[α]+9.5°1R,2S,5R,6S1R,2R,5R,6S绝对构型确定海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究单体化合物抗肿瘤活性初步研究•丽丝胺罗丹明B（SRB）法•四氮唑盐（MTT）法细胞增殖抑制活性测试方法细胞增殖抑制活性应用细胞系•MOLT-4（人白血病）•A549（人肺腺癌）•HL60（人白血病细胞）•BEL-7402（人肝癌细胞）•P388（小鼠白血病）海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究细胞增殖抑制活性测试结果结果表明：新化合物1-3对人白血病细胞HL-60表现微弱的抗肿瘤活性。对人白血病MOLT-4，人肺腺癌A-549，人肝癌细胞BEL-7402以及小鼠白血病P388细胞均不表现抗肿瘤活性(IC50＞100μM)。Inhibitoryeffectofcompound1-3ontheproliferationofHL-60cellscompoundsInhibitionRate(%)IC50(μM)1x10-4M1x10-5M1x10-6M1x10-7M1x10-8M158.212.04.70088.2267.812.19.98.2056.8358.213.410.611.52.099.0海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究肉果草中分离并解析13个单体化合物。木脂素类化合物11个，其中4个（1-4）为新化合物。黄酮类化合物2个。评价了11个化合物的抗肿瘤活性。小结海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究结语海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究获得具有活性的海洋微藻10株海洋微藻具有海虾生物致死活性。5株海洋微藻具有细胞增殖抑制活性。以上海洋微藻的抗肿瘤活性均是首次报道，为后期深入进行活性成分研究奠定了基础。结语与创新点获得新的木脂素类化合物化合物1-4个新的木脂素类化合物，并从肉果草中首次分离得到化合物6，7，12，13海洋微藻的活性筛选及两种植物活性成分的研究