奶牛传染病

奶牛传染病的诊断与防治——卫岗乳业（2012.5.7）中国农业大学动物医学院曹杰主要关注点防疫检疫（口蹄疫、结核、布病）流产相关（IBR、BVD、布病、新孢子虫、李氏杆菌等）腹泻（副结核）口蹄疫背景•口蹄疫病毒引起、偶蹄兽发病•牛指示器，猪放大器，羊贮存器•传染性极强：一头病牛的排毒量可感染100万头牛，1克病猪蹄部水疱皮可使10万头猪感染发病•潜伏期2~4天，最长达1周，发病率高，死亡率不高口蹄疫•7个血清型:O型，A型，C型，亚洲1型，南非1，2，3型•我国流行的型与亚型：–O，A和亚洲型–O型的主要亚型：泛亚系，耿马毒，猪毒谱系–各型间疫苗无交叉保护率–O型各亚型间交叉保护率低–我国O型口蹄疫疫苗主要是泛亚系口蹄疫面临问题•周边国家疫情不断（牛、羊、猪）•国内血清型不断增加，亚型变异•每年三个血清型疫苗免疫（两苗六次）月月检免、天天抽奶口蹄疫存在认识误区•3~5年大流行一次（每年都有发生）•免疫频率问题（科学制定免疫程序）•免疫牛群问题（覆盖所有应免疫牛）口蹄疫我们可以做什么•防疫！！（疫苗质量、初免牛、过敏牛）•抗体监测（采样全面覆盖）液相阻断ELISA法：牛O型、亚洲I型、A型血清抗体效价与保护力的关系：抗体效价以≥1：128的滴度为标准效价≥1：128，99%以上保护…（合格率！！）•病愈动物带毒（牛24~27个月、猪2~3个月、羊7个月）口蹄疫现有情况下免疫程序•三月龄以上犊牛全部进行免疫；•三月龄首次免疫犊牛，28天后加强免疫一次；•免疫过的犊牛进入育成牛阶段，应加强免疫一次；•国外引进育成牛、青年牛，由于属于初次免疫，应进行首免和28天后的加强免疫；•免疫过的奶牛每4个月加强免疫一次；•考虑到现有O-亚I连苗和A型苗的质量问题，两种疫苗应间隔15天进行免疫，以降低免疫不良反应的发生；待疫苗质量提高后再修订免疫程序。口蹄疫不良反应•不良反应表现•不良反应的避免（间隔免疫——15天）•不良反应的应对（过敏、补免）口蹄疫突发性问题应对•非结构蛋白•病毒分型检测结核•主要是由牛分枝杆菌引起的、人兽共患的慢性消耗性传染病•病原：结核分枝杆菌，牛分枝杆菌，卡介苗（BCG），非洲分枝杆菌，田鼠分枝杆菌，对人与动物致病的主要是前两种•非结核分枝杆菌：鸟分枝杆菌，副结核分枝杆菌，影响牛结核检疫结核•人结核疫情感染率：30-40%；新发病例:800-900万人(1/4秒)死亡病例:200万人(1/17秒)80%的结核病人在发展中国家•10%的人结核是由牛结核引起；一部分牛结核由人结核引起•丹麦、比利时、挪威、德国、荷兰、瑞典、芬兰、卢森堡、澳大利亚已清除牛结核病结核•牛结核疫情近几年死灰复燃（人结核：中国第二，印度第一，年发病人数130万、年死亡病人15万；牛结核：最高场内阳性率达到60.3%）•检疫：PPD皮内注射（2000单位/0.1ml）判定方法——4mm；2~4mm；2mm以下复检：1个月后•提高检疫准确率的方法规范操作（注射准确、电子数显游标卡尺）减少干扰（牛结核菌素与禽结核菌素平行检测、副结核）ELISA（γ-干扰素）确认结核皮厚与注射深度控制•针头长约6.5mm，针尖开口长约2mm针头全部进入皮肤时，针尖在皮内4.596mm处，针尖开口的上端约在皮内3.182mm处（45°进针）小犊牛皮肤100%薄于3.2mm;青老年牛皮肤薄于3.2mm的占40.8％;青老年牛皮肤厚在3.2-4.6mm的为56.6%;•只有很少的牛可准确注射于皮内。结核•尾根的问题•后备牛“结核结节样肺炎”问题真菌霉菌性肺炎；葡萄球菌、链球菌肺炎。流产•奶牛流产是指奶牛妊娠第42～260d之间发生胎儿丢失的现象；也有将妊娠第42～210d之间的定义为流产，而第210～260d称为早产。引起奶牛流产的部分传染性因素病毒细菌霉菌原虫牛病毒性腹泻病毒牛疱疹病毒Ⅰ型蓝舌病病毒牛流行性流产病毒赤羽病病毒卡希谷病毒口蹄疫病毒布鲁氏杆菌钩端螺旋体李氏杆菌胎儿弯曲杆菌尿支原体昏睡嗜血杆菌支原体衣原体沙门氏菌贝氏立克次体(Q热)化脓隐秘杆菌炭疽杆菌结核杆菌放线杆菌大肠杆菌多杀性巴氏杆菌链球菌烟曲霉毛霉属沃尔夫被孢霉黄曲霉犬新孢子虫胎儿三毛滴虫弓形虫边虫肉孢子虫布氏杆菌病•布氏杆菌病是由布氏杆菌引起的人畜共患传染病，特征是侵害生殖系统，母畜发生流产和不孕，公畜可引起睾丸炎。•在动物中以牛、猪、山羊、绵羊和犬最为易感，野牛、麋鹿、马也可感染。•引起奶牛流产的通常为牛种布氏杆菌（流产布氏杆菌），少数由羊种布氏杆菌（马耳他布氏杆菌）引起，偶尔由猪种布氏杆菌引起。布氏杆菌病几点问题•后备牛感染少•头胎牛流产多•检疫方法比较•不同疫苗评价传染性鼻气管炎•牛1型疱疹病毒（Bovineherpesvirus–1,BHV-1）引起•以鼻气管炎、眼结膜炎、流产、传染性脓疱性外阴阴道炎（IPV）为主要特征•死亡率较低，合并或继发感染•19世纪50年代美国首次报道。几乎世界上所有国家都有血清抗体阳性牛检出。传染性鼻气管炎流行情况•国内流行情况严重（大部分牛场存在问题）•进口牛问题（血清阳性率10%）•终生带毒（神经节）传染性鼻气管炎流行病学特点•三叉神经节、荐神经节潜伏感染•感染牛场一般只出现一个主病型•感染牛，一般呈隐性，不定期排毒，在应激时复发•隐性经过的种公牛可通过精液排毒传染性鼻气管炎•诊断病毒分离鼻腔、眼、生殖道分泌物拭子用于病毒分离；尸检时，需收集呼吸道粘膜、部分扁桃体、肺和支气管淋巴结；流产病例，需收集胎儿、肝、肺、脾、肾和胎盘子叶。牛肺或牛肾或MDBK细胞系。BHV-1分离株可用DNA限制性内切酶分析法作进一步亚型鉴定。血清学诊断检测抗体时最常用的方法是病毒中和试验及ELISA，奶中的抗体检测亦可采用ELISA。传染性脓疱性外阴阴道炎流产型•2007年1月IBR：1700头的牛场，成乳牛大约800头。部分澳牛，发病从澳牛开始。06年8月~12月，流产、早产牛152头，头胎牛和经产牛大约各占50%。微量血清中和试验和ELISA试验血清阳性率100%。犊牛肺炎•2007年12月～2008年3月确诊的IBR：山东、河北等地牛场，澳牛为背景。发病从犊牛开始，断奶前后均有高发。发病率40%。主要表现为犊牛肺炎、关节炎。抗生素、免疫增强剂、支持疗法均使用过，约30～50%的发病犊牛停药后即死亡。剖检肺脏大量化脓灶，与胸腔粘连，可分离到巴氏杆菌。耐过牛虚弱，6月龄后逐渐好转。血清阳性率50～80%。确诊为IBR，并继发巴氏杆菌感染。关节炎、肺炎•2009年10月IBR：北京某牛场，10月初新生犊牛（10～20日龄）表现关节肿大，兽医反映剖检牛关节液清凉，基本正常。该场曾发生过犊牛肺炎。共检测血清样本40头，其中IBR抗体阳性牛19头，阳性率47.5%。•确诊为以犊牛关节炎为主要表现的IBR。药物治疗效果不佳，11月1日开始出现犊牛肺炎症状，先后死亡，剖检肺脏与胸腔、膈肌粘连。建议疫苗免疫。传染性鼻气管炎糖蛋白•11种结构糖蛋白•gB、gC、gD、gE四个主要功能糖蛋白•gB对病毒复制是必须的；gE对病毒的感染保护不重要；•普通灭活疫苗VS灭活标记疫苗传染性鼻气管炎诊断及评价方法•ELISA——急性病例及潜伏感染（gB、gE均可）——gE糖蛋白检测试剂盒——混合奶样检测（发病率低的牛场监测）•血清中和试验——急性病例及潜伏感染——免疫效果评价（抗体滴度）•PCR——病毒分型、免疫牛场疫情监测病毒性腹泻流行情况•BVD/MD。腹泻、流产、持续感染•80%以上的腹泻牛血清BVD抗体阳性•国内流行严重•进口牛问题受孕出生器官系统的发育免疫系统的发育早期胚胎损失遗传缺陷犊牛正常或小，弱犊牛-抗体阳性-病毒阴性*-抗体阳性或阴性-病毒阳性或阴性持续感染牛犊牛-抗体阴性-病毒阳性犊牛感染后结果取决于子宫内感染时间的不同•通常免疫力强的牛只亚临床表现•为期2周病毒血症和低水平发散病毒•偶发性的主要呼吸道感染•偶发性的主要消化道感染•发热•繁殖失败•免疫抑制急性感染•通常由于怀孕的母亲在怀孕期间急性感染•不能清除牛病毒性腹泻病毒感染•典型发育不良•容易遭受继发性感染–腹泻，呼吸道病，内寄生感染等等•大多数2年内死亡或被淘汰•持续释放大量病毒持续感染病毒性腹泻检测•抗体检测（抗体，用于牛场风险评估）•抗原检测（病毒，用于BVDV清除计划）新孢子虫病概况•由犬新孢子虫引起的一种原虫病，主要造成孕畜流产、死胎以及新生犊牛的运动神经系统疾病•1984年首次发现，1989年首次报道与奶牛流产有关。现已呈世界性分布，是造成奶牛流产最主要的寄生虫因素之一•奶牛感染率10%～40%，甚至更高新孢子虫病•专性细胞内寄生原虫。终末宿主为犬、土狼等犬科动物，中间宿主范围较广。•感染母牛可以经垂直传播将本病传给各妊娠阶段的胎儿，引起胎儿脑组织和心脏的损伤。流产发生于妊娠3个月之后，多见于5～6月龄。暴发牛群在几周至数月内流产剧增。•表现流产、产弱胎、死胎或产下先天性运动神经系统损伤犊牛。慢性感染母牛可产生免疫，再次感染时流产几率5%。新孢子虫病•犬新孢子虫病引起的犊牛运动神经症状，仅见于四月龄以下犊牛，主要包括：共济失调、膝跳反射减弱；也可能出现凸眼症；前肢或后肢可能弯曲或过度伸展等。•流产胎儿主要病变是各种组织的变性和炎性细胞浸润，以中枢神经系统、心脏和肝脏的病变为主。胎儿易发生自溶和木乃伊化，胎盘子叶出现局灶性病变。病变常因胎儿自溶而被掩盖。新孢子虫病现状•45%的流产牛新孢子虫抗体阳性•目前为数不多的无药可治的寄生虫病•犬为主要传染源•水平传播有争议副结核病原及流行特点•牛副结核病又称Johne氏病，是由副结核分枝杆菌（M.pt）感染反刍兽引起的慢性、衰弱性肠炎（肠壁粘膜、肠系淋巴结及粪便中）•3型菌株：牛型（主要）、羊型、色素型•粪口传播、垂直传播、乳腺排菌•4月龄以下犊牛易感、潜伏期长•2岁以上（成年）牛发病•感染率高（10~50%）发病率低（1~2%）副结核四个感染阶段•无临床症状，粪便培养阴性的感染牛•无临床症状，粪便培养阳性的感染牛•出现腹泻、体重下降等明显临床症状•临床症状加重，出现昏睡、消瘦、及严重的腹泻副结核2007年副结核病分布图副结核2008年副结核病分布图副结核2009年副结核病分布图副结核2010年副结核病分布图副结核临床表现•顽固性腹泻，间歇性或持续性，粪便水样，含气泡和大量粘液•下颌水肿（低蛋白血症）•消瘦（片牛）副结核临床表现副结核临床表现小肠粘膜脑回样水肿副结核诊断•PPD：副结核菌素皮内接种试验•病原学诊断：粪便萋尼氏染色，分离培养，PCR（粪、乳、血）•血清学诊断：ELISA（乳样，血样），补体结合试验副结核控制计划•检测标记（奶样ELISA+PCR）•源头控制（初乳）新奇也有大作用