PCR实验室质量体系文件的编写

PCR实验室质量体系文件的编写湖南省临床检验中心罗识奇一、质量体系文件的含义：质量体系文件是实验室检验工作的依据，是描述实验室质量保障工作的一整套文件，而且它应满足质量体系有效运行的需要。1、质量体系文件具有以下特点：1.1法规性：经批准实施的质量体系文件具有法规性，必须执行；1.2适应性：所有文件规定都以最实际，最有效的要求加以确定，以达到适用的目的；1.3唯一性：一个机构只有唯一的质量体系文件系统，一项质量活动只能规定唯一的程序；1.4见证性：质量体系文件是质量体系运行的见证。2、质量体系文件的编写原则：2.1系统协调原则：文件上下层之间应相互衔接，相互协调，不应互相矛盾，要构成一个有机整体；2.2科学合理原则：文件不是对质量体系的简单描述，而是要依据卫生部关于《临床基因扩增检验实验室管理办法》（以下简称《办法》）及中华人民共和国国家标准《检测和校准实验室能力通用要求》（ISO导则17025－1999）的有关规定，结合本实验室工作特点和管理现状，作到科学、合理、有效指导临床基因扩增检验工作；2.3可操作实施原则：编写质量体系文件的目的在于贯彻实施，指导实验室检验工作，所有编写的质量体系文件始终要考虑到可操作性，便于实施、检查、记录、追溯；2.4文件的装订应是活页的：质量体系是动态的，以便发现问题，便于修改；2.5文件应为实验室人员方便地得到，并有效地使用。3、质量体系文件的内容：3.1质量手册：按评审准则描述的质量体系；3.2程序文件：描述质量体系所涉及到的各个部门的职能活动，管理和各项具体检测程序；3.3质量计划：质量目标、计划修订和完成的规定；3.4质量记录：表格、报告、各类记录。二、基因诊断实验室质量手册书写的基本格式：基因诊断实验室质量体系文件可按基因诊断实验室质量手册形式命名。1、封面：实验室名称和标志，质量手册的标题、编号、发行版次、密级及发放登记号；2、批准页：批准人签名、生效日期、持有人或部门（分受控和不受控两类）。批准页实例质量手册手册版号：A生效日期：××××年××月××日总页数：（包括此页）批准人：×××日期：××××年××月××日副本控制：(不)受控类编号：××持有人：×××3、修订页：修订页用修订表的形式说明质量手册各部分修订状态。修订表基本形式修订表受控质量手册的持有者应负责在收到修订页后立即将旧页次换下。4、手册目录：列出手册文件序号、文件编号、文件标题及页码。5、前言，即实验室简介，需提供实验室名称地址、通讯方式、经历和背景、规模、性质以及对社会的各项承诺，如公正性声明，要体现对卫生部《办法》精神的贯彻落实情况。6、质量方针和目标：陈述质量方针和目标，并说明质量方针和目标如何为实验室全体人员所熟悉理解和执行。例：某医院的质量方针、目标是：准确及时、严谨认真公正求实、持续改进《质量手册》；保证体系为：建立一系列的工作制度和标准操作程序建立室内质控、室间质评的质量保证体系建立质量监督机制不断纠正、完善质量体系7、质量管理机构框图：一般有一定的任职条件，有相应的职责和权力。例图：8、基因诊断实验室工作制度9、基因诊断实验室标准操作程序10、基因诊断实验室记录、报告单及表格三、基因诊断实验室应建制度Pro(Procedure)的编写：1、程序文件的管理和维护制度1.1目的：基因诊断程序文件是指导临床基因扩增检验活动的法规性文件，属内部受控文件，不得擅自修改、涂改，不得遗失、外借翻印。为保持其现行有效和持续适应性，并确立因条件变化进行修改的程序。1.2编写依据：1.2.1ISO/IEC170250－1999《检测和校准实验室能力的通用要求》因卫生部《临床基因扩增检验实验室技术验收表（checklist）》是根据ISO/IEC17025而设计1.2.2卫生部《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》及《临床基因扩增检验实验室工作规范》1.3适应范围：临床检验标本；1.4内容：程序文件应包含下列内容：文件名称、编号、页号、总页数例：页眉页底应有：编写人：××××××审核人：×××批准人：×××生效日期：××××年××月××日及总页码。1.5编制及职责：程序文件由PCR实验室负责人主持编写、修订、审核并保持它的现行有效性。由科主任批准和颁布实施，并负责解释。1.6发放与持有者责任：程序文件由科主任批准发放，发放与回收要登记签字，由PCR实验室负责人保管，并组织全室工作人员认真学习，了解内容，熟悉其中各项规定，程序文件执行情况纳入实验室目标管理，与奖惩挂钩。持有者调任时，要收回该程序文件。1.7修订：科室任何工作人员均可提出对程序文件的修改建议，文件修改须经有关人员讨论，PCR实验室负责人根据条件变化提出是否修改的决定，如作小的修改则可在修改页上进行，修改文件经科主任审核批准后，并填写入程序文件修改页。如果文件须作重大修改，PCR实验室负责人可进行改版。新版程序文件经科主任批准后生效，收回旧版，并予以销毁，登记签字后发出新版，保证工作现场只有唯一的，最新的使用版本。2、基因诊断实验室工作制度Pro：2.1基因诊断实验室分区情况：各区实物用品应有明显标识，严禁混用；2.2实验室工作人员均持证上岗；2.3为有效防止后扩增区产物的污染，实验工作人员应遵循单向走动原则。前PCR区→标本处理区→PCR扩增区→PCR产物分析区，严禁人和物品反向流动，进入每个区前必须更换有该区特殊标识的工作服和拖鞋，工作服及拖鞋均有专门的衣柜存放，每个区均有专用的一次性手套并有固定存放处。2.4实验室工作人员必须严格按照PCR实验室操作程序进行，实验开始前必须先做好室内及工作台的清洁消毒，离心管、吸头等一次性用品均需高压灭菌处理。2.5各实验区之间的试剂及样品传递有条件的应通过传递窗进行。2.6非本室人员未经允许不得进入，工作人员在工作时也不能随意进出，以免造成不应有的污染。2.7实验结束后应用10％次氯酸钠溶液消毒实验台面，并用紫外线照射实验室，试验中使用过的吸头、离心管等应置于10％次氯酸钠溶液中浸泡，消毒后集中焚毁（1）。2.8每天下班前处理好废弃物品，关好水、电、门窗。2.9定期校准和维护好PCR仪、离心机、水浴箱、冰箱等仪器设备。万元以上的仪器设备应做好使用登记工作。2.10引用文件及图表：（1）基因扩增诊断实验室工作制度。Pro:××（××为本制度在质量手册文件中的编号及页码。下同）3、实验室人员配置及培训制度：3.1目的：为保证实验室有足够数量的称职工作人员，特建立本制度。3.2适应范围：基因扩增实验室的人员配置、培训考核及管理等。3.3人员配制情况；3.4人员要求；3.5人员培训计划：有计划及记录表(1)；3.6人员管理：有实验室人员一览表(2)，并建立所有工作人员档案(3)，包括人员学历、任职资格、发表论文、科研成果等相关资料复印件装订成册（活页）。3.7引用文件及图表。（1）人员培训记录表；（2）实验室工作人员一览表；（3）实验室工作人员技术档案。4、实验室内务管理制度：4.1目的：为使实验室内务管理有序、在控而建立本制度。4.2适应范围：本制度适用于基因扩增实验室内务管理。4.3制度细则：根据各自医院及科室相关规定编写5、实验室材料的购买和管理制度5.1目的：为保证PCR检测所使用的试剂及耗材供货渠道和质量的稳定、可靠，而建立本制度。5.2适应范围：适用于PCR实验室所购的试剂盒、实验耗材。5.3试剂和耗材的选购：5.3.1检测试剂应与扩增仪相配套，而且需三证齐全的商品试剂；5.3.2TiP头必须使用有滤芯的PCR专用TiP头；5.3.3其余耗材由医院统一进货、管理等。5.4试剂及耗材的验收：5.4.1内外包装检查按照试剂质检标准操作程序执行(1)；5.4.2上述检查在到货时完成，同时进行记录(2)；5.4.3试剂的性能检查可见试剂质检标准操作程序(1)；5.4.4耗材的实验检测：如：离心管的检测可用加温和高速离心的办法检测其有无爆开或漏液情况。带滤心吸头可用适配加样器配合吸取适量液体看其有无堵孔及漏现象发生，经上述检查，合格即可启用，不合格则退货。5.5试剂及耗材的储存：一般验收后的PCR试剂应存放于－20℃冰箱内，无菌处理前的耗材存放于试剂准备及贮存室，根据日常工作量，定期定量处理后放置于样品制备室和扩增室，实验室负责人应定期检查库存、定期购置试剂，并作好记录(3)。5.6本制度引用的文件及登记本：（1）试剂质检标准操作程序（2）试剂及耗材验收登记本（3）试剂及耗材订购登记本。6、仪器设备的管理制度：6.1目的：为保证PCR实验室仪器设备得到妥善管理，使用的仪器设备保持在良好的工作状态，特建立本制度。6.2适应范围：基因扩增实验室所有的仪器设备。6.3制度细则：6.3.1基因扩增实验室涉及的主要仪器设备：扩增仪、恒温金属浴箱、高速离心机、高速冷冻离心机、可调移液器、混匀器、冰箱、超净工作台、移动式紫外灯等。6.3.2建立设备档案管理制度:仪器设备的一般情况：序号、名称、制造商、接收日期、接收状态、启用日期、目前放置地点、接收人员签字等，应有仪器设备一览表(1)，设备的一般情况及使用人应用卡片形式贴在仪器表面；仪器设备的相关文件应有：仪器设备的说明书、操作手册、保修卡、相关仪器的管理负责人；仪器设备的损坏、故障、修理须在登记本上记录如下内容：日期、设备名称、损坏或故障原因、修理单位、人员及修理结果，记录人员签名(2)。6.3.3仪器应有工作状态标识，正常使用者贴绿色标签，有故障维修暂停使用的贴黄色标签，不能使用者贴红色标签（禁用）。6.3.4仪器需按要求定期作校准或检定，应有校准标识、注明校准检定日期及下次校准或检定日期，并应作记录，具体仪器校准见仪器设备校准SOP。6.3.5基因扩增实验室仪器实行严格分区使用，并用不同颜色标识。6.3.6仪器设备的报废由室负责人提出申请后由院有关人员统一处理。6.3.7为保持仪器设备工作状态的稳定，应对其进行定期的维护和保养，具体见仪器维护保养文件。6.3.8为使扩增仪处于稳定工作状态，在该电脑上不得使用非本室的外来软盘，不能在电脑上加载其它程序和软件，在使用本室软盘进行资料备份时，需预先杀毒方可使用。6.4引用文件及表格：（1）基因扩增诊断实验室仪器设备一览表（2）基因扩增诊断实验室仪器设备维修登记本。7、仪器设备的使用制度7.1目的：为保证仪嚣设备得到正确的操作使用以满足检测质量要求及保证仪器的使用寿命。7.2适用范围：基因扩增诊断实验室所有仪器设备。7.3制度细则：7.3.1仅为本实验室工作人员有权使用实验室的仪器设备7.3.2本室工作人员在使用仪器前必须熟悉仪器的性能和操作程序，必须严格按照仪器标准操作程序SOP（standardoperationprocedure）操作（见各仪器操作SOP）。7.3.3因科研活动的需要，使用本实验室仪器的非本室人员必须首先熟悉本程序的各项规定，并由实验室负责人对其使用仪器考核认可后，方可使用。7.3.4仪器使用严格遵守分区使用的原则，并遵守标准操作程序。7.3.5主要仪器使用后应做好使用记录和日常维护（见仪器设备的管理制度）。8、仪器设备的维护保养制度8.1目的：为保持仪器设备稳定良好的功能状态而建立。8.2适应范围：基因扩增诊断实验室所有设备。8.3制度细则：8.3.1仪器设备的维护保养操作见相关SOP，并做好每天仪器的保养、周保养、月保养。8.3.2建立仪器设备维护保养登记本（见各仪器设备保养登记本），效果及记录由实验室主任负责检查、监督。8.4引用登记本：各仪器设备保养登记本。9、仪器设备的校准制度。9.1目的：为保证检验仪器设备的有效性和准确性而建立。9.2适用范围：本制度适用于满足基因扩增实验室检测需要有可能对检测结果造成误差的仪器设备。主要有：……扩增仪、温度计、恒温水浴箱，可调移液器等。9.3制度细则：9.3.1上述设备在投入使用时要有校准计划，并按照仪器校准程序校准。(1)9.3.2如在检测中发现存在结果有漂移或偏差及其它可疑情况时，通过分析对可疑设备进行校准。9.3.3仪器设备维修后需进行校准，方