猪场清洗与消毒

清洗与消毒C&D提要一、清洗与消毒，两者一样重要，不可偏废。清洗的目的在于清除特定场所中的污物，而消毒则要求尽其可能减少病原微生物的载量。二、消毒并不能绝对地清除某个特定环境中的所有病原。而是尽其可能降低病原载量。一般认为消毒后病原数有4Log或以上的降低，即认为这样的消毒是有效的。三、不同消毒剂有不同的特性。消毒剂选择，要注意其针对性、对人畜与环境的伤害性、操作的方便性与经济性。消毒剂与防腐剂的病原杀灭特性细菌分支杆菌细菌孢子真菌病毒消毒剂防腐剂乙醇过氧化氢甲醛石碳酸氯碘附戊二醛碘附乙醇双氯苯双胍己烷四级铵对氯间二甲苯酚三氯生PRRSPEDVPRRSPEDVPRRSPEDV复合碘溶液1:250-本品计4%6200++++++45++172-++聚维酮碘1:50-碘纯品计0.2%4200++++++85++++2++++百胜1:100-本品计1%4200++++++360++800-++维特利剑1:400-本品计0.25%3000++++++1++++6-++卫可1:200-本品计0.5%6400++++++5++280+++过硫酸氢钾1:200-本品计0.5%3400++++++81-+340+-格利特1:100-戊二醛计0.2%4000++++++3--0--惠盈新威特1:50-戊二醛计0.4%2400++++++200--0--百净消1:150-本品计0.67%1800++++++0++0--信得1:250-本品计0.4%1800++++++2--2--惠洁1:200-本品计0.5%1080++++++152--3--力之天纯季铵盐类1:300-本品计0.33%4200++++++0--1--碘制剂类过氧化物类纯戊二醛类戊二醛与季铵盐类复方稀释剂量市售消毒水消毒效果评估消毒前30分钟60分钟PCRPCRPCR消毒剂名称类型全菌落数全菌落数全菌落数戊二醛与季铵盐类复方消毒剂，为当今西方养殖业空栏消毒、卡车消毒主流消毒剂。本实验也可验证此类消毒剂的良好效果。纯戊二醛类消毒剂，效果也极显著，但价格过高，局限其田间推广。纯季铵盐类消毒剂，效果亦佳。消毒效果差异，与消毒剂类型相关。PRRSVPEDVPRRSVPEDVPRRSVPEDV1250倍稀释127++0++0-+2250倍稀释118++0-+0-+3250倍稀释124++0++0++4250倍稀释130++0++0++1100倍稀释116++0-+0--2100倍稀释134++0-+0-+3100倍稀释128++3++0++市售消毒剂消毒效果评估消毒前30分钟60分钟PCRPCRPCR种类全菌落数全菌落数全菌落数过氧乙酸泡沫洗涤剂序号稀释剂量市售过氧乙酸产品，浓度为16%到23%。依据说明书浓度要求，其消毒效果不佳。市售泡沫洗涤剂，侧重其清洗与去污效果，其消毒效果不佳。有吹嘘所谓消毒效果者，实属无稽。五百倍稀释过氧乙酸，在抑制细菌生长方面是效果不佳的。农场总水源饮用水消毒农场总水源消毒：有效氯5mg/L能在2小时之内，有效杀灭ASFV，即每吨水添加5g有效氯。市售漂白粉（次氯酸钙）有效氯含量为百分之二十八。由于市售漂白粉每个批次有效氯含量会有较大差异性，所以可打出百分之三十的富裕量进行计算。5除以0.28，乘以1.3，即每吨水中添加25g漂白粉。农场总水池，可在半夜进行两个小时的停水消毒作业。次氯酸钙饮用水消毒效果，在冬天与夏天一样有效。（见数据）阴阳CT值阴阳CT值阴阳CT值阴阳CT值阴阳CT值阴阳CT值漂白粉有效氯2000ppm------百净消50X------百净消100X------卫可50X------卫可100X------无------无无+31.69+32.46+31.38+30.83+31.51+31.29氯化钙20％消毒剂消毒剂浓度消毒试验室温-20℃5分钟半小时一小时5分钟半小时一小时抗冻剂氯化钙长期以来作为抗冻剂、除雪剂使用。针对禽流感病毒、非洲猪瘟病毒，具有良好的消毒作用。氯化钙溶解时会释出热量，溶解速度也快，应该能成为华北、东北地区冬天农场消毒的一个有力武器。如，硬化路面除雪消毒、出猪台、消毒池、消毒盆及其他一切会上冻但需要消毒的场合。数据将陆续补齐做细。-20℃条件下，消毒剂与氯化钙或其他抗冻剂合用能提升针对禽流感病毒的灭活效果摘要禽流感多发于冬季，所以在冰冻条件下，养鸡场所的有效消毒就显得十分必要。市售消毒剂卫可与Accel与抗冻剂丙二醇、甲醇与氯化钙连用，用于禽流感病毒的消毒（-20℃与20℃条件下）评估其效果。禽流感病毒液涂布于不锈钢盘、风干、然后喷上消毒剂或抗冻剂，作用5到30分钟。卫可（2％）与Accel（6.25％）分别加入30%丙二醇、20%甲醇或20%氯化钙，能在5分钟内杀灭6log10禽流感病毒（-20℃与20℃条件下）。在这两种温度条件下，单纯丙二醇与甲醇单独使用对于禽流感病毒不具有杀灭作用，但是20%氯化钙在五分钟之内能杀灭5log10的禽流感病毒。本实验结果表明，氯化钙在温暖与寒冷的气候条件下，能够提升禽流感病毒消毒操作的效果。不同消毒剂溶液添加抗冻剂一小时以后的状态（在-20℃温度下）S-固态：L-液态：G：胶状。抗冻剂浓度消毒剂溶液状态丙二醇甲醇氯化钙不同温度与接触时间下，两种消毒剂针对禽流感的消毒效果抗冻剂及浓度丙二醇甲醇氯化钙EID50-50%胚胎感染剂量。NT-没有测试。PBS-磷酸盐缓冲液处理后活病毒量抗冻剂及浓度针对禽流感病毒，不同消毒溶液五分钟内消毒效果丙二醇甲醇氯化钙处理后的活病毒量log10EID50磷酸盐缓冲液三次重复样本的均数，其标准偏差小于等于0.5其差异具有统计学上意义。猪场运输车辆清洗与消毒问题农场车辆清洗与消毒方案：一、清洗：车辆打湿后半小时软化污物，喷上泡沫清洁剂（泡沫百净消，150倍稀释），作用半小时后，清水冲洗。（需确保完全无污物残留于车体上）。二、烘干：60℃，20分钟。（70℃，30分钟更佳）要确保车体完全干燥，才能进入消毒环节。（为确保完全干燥，可延长烘干时间）。三、消毒：百净消100倍稀释，全车无死角喷洒。一、不仅仅考虑到非洲猪瘟的消毒，必须把几种重要猪群传染疾病的消毒问题同时列入考虑，如PEDV、PRRSV、FMDV、HCV等。美国、欧洲对于农场车辆清洗与消毒的实验数据与方案都相当完备，可供我们借鉴。二、由于血清、血液以及粪便等有机物，对于消毒的效果影响很大，所以，必须强调的是清洗与消毒是缺一不可的，没有清洗或清洗不彻底，后续的消毒效果将会大打折扣。三、清洗后的车体烘干彻底与否，与后续消毒效果也是关系重大的。干燥本身对于病毒就具有杀灭作用（参见后面资料）。讨论醛类最为人们所熟知的就是甲醛与戊二醛。甲醛能溶于水，其水溶液称为福尔马林（37％），甲醇作为一种稳定剂添加于福尔马林中。低浓度的甲醛溶液是抑菌的，然而高浓度（20％以上）则可以杀灭所有生物。戊二醛对活组织毒性较低，对皮肤与黏膜依旧具有腐蚀性。戊二醛在碱性环境下，能够有较好的消毒作用，但较不稳定。有机物能够减损戊二醛的消毒性能，所以消毒前，将对象清洗干净是十分重要的。。四级铵类由四个有机基团以共价键与氮原子联接组成四级铵，8-18个碳链的四级铵化合物，具有最好的消毒性能。此类化合物能够造成微生物的细胞膜变性，并释出细胞内容物释出。低浓度时为抑菌作用，高浓度时具有杀菌作用。假单包菌、毛癣菌属（真菌）则对本品具有抗性。实际上，某些单包菌能够在四级铵的溶液中生存。有些病毒与所有的细菌芽孢对本品也具有抗性。阴离子洗涤剂、有机物等能减损坏四级铵类的消毒性能。FromOIE市售几种消毒剂在寒冷天气条件下，针对蓝耳病病毒污染运猪车辆的消毒效果评估本试验目的在于评估寒冷气候条件下（-20℃与4℃），针对蓝耳病病毒污染的运猪车辆，市售七种消毒剂的洗消效果评估。Synergize：戊二醛7%＋四级氨氯26%Aseptol2000：戊二醛12.75%＋四级氨氯9.2%Biophene：苯酚类。Sentramax：22%四级氨氯Virkon:过硫酸氢钾复合盐TekTrol:26%苯酚类DC&R:19.2%丙二醇＋甲醛2.28%＋四级氨氯3.08%Synergize：戊二醛7%＋四级氨氯26%Aseptol2000：戊二醛12.75%＋四级氨氯9.2%Biophene：苯酚类。Sentramax：22%四级氨氯Virkon:过硫酸氢钾复合盐TekTrol:26%苯酚类DC&R:19.2%丙二醇＋甲醛2.28%＋四级氨氯3.08%PCR检出数PCR检出数处理方式：挡风玻璃清洗液（40%甲醇）Syn：SynergizeP：10%丙二醇结冻影响消毒效果，防冻液的添加能确保消毒效果。生产现场对污染了蓝耳病病毒的全尺寸运猪车辆洗消方案评估本试验在于评估污染了蓝耳病病毒的全尺寸运猪车辆，在生产现场条件下，使用冷水洗车（21℃），然后再以低压起泡机喷洒商业消毒剂，全部过程小余两个小时。而后评估其洗消效果（经由PCR检测与生物评估）。十五个采样点（如图所示），人工污染上蓝耳减毒活疫苗（博灵格）。每个采样点，其剂量为5X10^5组织培养感染剂量。一共做十次重复（共一百五十个点）洗消之前与之后（120分钟）棉签采样，做PRRSVPCR检测，检测为阳性的棉签进一步验证其是否为活病毒（生物评估）。结果150个样品中，检出10个PCR阳性，但生物评估皆未能检出活病毒。本试验洗消方式为高压冷水清洗，而后以低压起泡机喷洒1%过硫酸氢钾复合盐，作用两小时，杀灭PRRSV效果最佳。全尺寸双层运猪车蓝耳病病毒检测15个采样点示意图上层下层上猪坡道格栅运猪车辆蓝耳病病毒污染的洗消方案评估本试验目的在于寻求一种针对蓝耳病病毒污染的运猪车辆进行有效的、快速的洗消方案（对其他病原也防控也甚有启发性）。处理组1Trt1:清洗。处理组2Trt2:清洗后再用甲醛薰蒸。处理组3Trt3:清洗后再用戊二醛加四级氨氯薰蒸。处理组4Trt4:清洗后隔夜阴干。处理前，与处理后六十分钟、九十分钟进行PCR检测，同时将哨兵猪关入处理后车厢两小时，了解受感染情况。值的注意的是，处理组3，处理后九十分钟，PCR检测全部为阴性，并且也无法造成哨兵猪感染，其效果与处理组4隔夜阴干一样好。（实验结果给我们个醒，干燥与病原的杀灭效果存在著密切相关性。）处理组1Trt1:清洗。处理组2Trt2:清洗后再用甲醛薰蒸。（26.4ml福马林每立方米，30分钟）处理组3Trt3:清洗后再用戊二醛加四级氨氯薰蒸。（128倍稀释，Synergize，雾化机，30分钟）处理组4Trt4:清洗后隔夜阴干（20°C）。NegCtrl:阴性对照组。NT：没有测试。a:分母为PCR测试数量，分子为检出率。b:分母为放入哨兵猪数量（两小时），分子为造成感染数量。热辅助干燥与消毒系统（TADD）在运猪车辆洗消中，对猪蓝耳病病毒的杀灭效果的评估56℃，持续6到20分钟处理，其感染力将消失。经由一连串协同事件所造成的蓝耳病病毒的机械性传播，在寒冷气候（0℃以下）比温暖气候（10℃到16℃）发生机率要更高。本试验所使用的模拟运猪小车与正规大车比较丙烷加热器处理后采样时间检出数加热空气干燥清洗八小时自然干燥未列入本图CitricacidcandisinfectinFMD,Africanswinefeveroutbreaks柠檬酸能用于口蹄疫与非洲猪瘟爆发期间的消毒美国兽医学会柠檬酸能用于口蹄疫与非洲猪瘟爆发期间的消毒2%的柠檬酸或高浓度次氯酸钠（2000ppm）能够作用于木质表面（孔洞表面），杀灭非洲猪瘟病毒。然而，柠檬酸溶液的效果会更好。桦木载体上，柠檬酸与次氯酸钠对口蹄疫与非洲猪瘟病毒的消毒效果评估。美国农业部外国疫病研究中心2%柠檬酸溶液，能在22℃、三十分钟内，在木质表面上，有效杀灭口蹄疫与非洲猪瘟病毒。而2000ppm次氯酸钠，效果就要差些，不能符合4–Log的消毒阈值要求（针对口蹄疫病毒）。综观所有数据，消毒剂中可添加至少2%的柠檬酸。在孔洞表面上，对口蹄疫与非洲猪瘟