一、人绒毛膜促性腺激素β亚单位测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/01二、黄体生成素测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/02三、卵泡刺激素测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/03四、雌二醇测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/04五、非结合雌三醇测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/05六、催乳素测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/06七、孕酮测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/07八、睾酮测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/08九、前列腺特异性抗原测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/09十、游离前列腺特异性抗原测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/10十一、癌胚抗原测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/11十二、甲胎蛋白测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/12十三、皮质醇测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/13十四、总IgE测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/14十五、胰岛素测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/15十六、总甲状腺素T4测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/16十七、游离甲状腺素测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/17十八、总三碘甲状腺氨酸测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/18十九、游离三碘甲状腺氨酸测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/19二十、促甲状腺素测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/20二十一、甲状腺球蛋白测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/21二十二、铁蛋白测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/22二十三、叶酸测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/23二十四、维生素B12测定标准操作规程SYXRCYYLAB-MYSOP-02/24沭阳县仁慈医院检验科免疫实验室SOP化学发光测定标准操作程序文件编号:SYXRCYYLAB-FGMY版本:A/0页码:5/120生效日期:2012-7-01一、人绒毛膜促性腺激素β亚单位测定标准操作规程第1页共5页1检验申请单独检验项目申请:人绒毛膜促性腺激素β亚单位测定(缩写βhCG);组合项目申请:肿瘤标志物检查组合。临床医生根据需要提出检验申请。2标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml,不抗凝,置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。也可用肝素或EDTA作抗凝剂采集血浆标本。2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足:少于0.3ml的全血标本,或少于0.1ml的血清或血浆。2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2标本保存2.2.1接收标本后在60min内将标本离心分离出血清或血浆,避免溶血。离心必须达到4000rpm×15min,离心后的血清中不能含有颗粒物或微量纤维蛋白。2.2.2标本保存时间:室温(15~25℃)下可稳定8h,普通冰箱中(2~8℃)稳定3d,在-20℃最多可保存4周。避免反复冻融。为避免标本中水分挥发使血清浓缩,对保存时间超过1d的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,置4~8℃冰箱内保存7d。2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动,早上或上午采血。3方法原理双位点免疫酶夹心法。标本中βHCG与试剂中兔抗βhCG-ALP结合物和包被了羊抗鼠IgG-鼠抗βhCG复合物的磁性微粒子共同反应,血清hCG与固相化的抗hCG单克隆沭阳县仁慈医院检验科免疫实验室SOP化学发光测定标准操作程序文件编号:SYXRCYYLAB-FGMY版本:A/0页码:6/120生效日期:2012-7-01一、人绒毛膜促性腺激素β亚单位测定标准操作规程第2页共5页抗体结合,而兔抗βhCG-ALP结合物与血清hCG不同的抗原位点起反应,最后形成微粒子-羊抗鼠IgG-鼠McAb-βhCG-兔抗体-ALP夹心型免疫复合物。经磁性分离,洗涤洗去未结合的物质,加入化学发光底物Lumi-Phos*530,测量反应产生的光,光子的量与标本中hCG的浓度成比例,由多点校准曲线求得标本中hCG的浓度。4试剂及其他用品4.1试剂:Accessβ-hCG测定试剂包,由美国BECKMANCOULTER公司出品,试剂盒产品号33500。未打开的试剂包保存于2~8℃在有效期内稳定,不可冻存。开启的试剂包载入系统中可使用28d。4.2试剂盒组分4.2.1磁性微粒子:包被了羊抗鼠IgG-鼠抗βhCG单克隆抗体复合物。4.2.2液体试剂:碱性磷酸酶标记的兔抗β-HCG抗体。4.2.3试剂包即开即用,无须特殊准备。4.3其他试剂与用品4.3.1化学发光底物:ACCESS的通用发光剂底物液,Cat.No.81906。4.3.2清洗缓冲液、反应杯等。5校准品与校准模式5.1校准品:采用美国BECKMANCOULTER公司Access专用配套hCG校准液,5个浓度。有校准卡片。5.2校准类型和校准点数目:非线性模式,6个校准点。仪器根据校准曲线卡片数据(6参数对数拟合曲线)自动建立校准曲线。5.3校准周期:在同一批号试剂使用期间校准曲线有效,但在间隔28d后需要重新校准。另在:①更换试剂批号或出现质控漂移时;②仪器进行全面保养后;③仪器的重要零件更换后,进行一次校准。5.4校准液重建方法:液态校准液,即可使用。6质控品与室内质控规则6.1质控品采用hCG质控品或采用自备混合血清。6.2质控液重建方法:液态质控液,即开即用,充分颠倒混匀,无需特殊准备。沭阳县仁慈医院检验科免疫实验室SOP化学发光测定标准操作程序文件编号:SYXRCYYLAB-FGMY版本:A/0页码:7/120生效日期:2012-7-01一、人绒毛膜促性腺激素β亚单位测定标准操作规程第3页共5页6.3质控品测定:在每一批标本中测定质控血清一次。鼠IgG-鼠抗βhCG复合物的磁性微粒子共同反应,血清hCG与固相化的抗hCG单克隆鼠IgG-鼠抗βhCG复合物的磁性微粒子共同反应,血清hCG与固相化的抗hCG单克隆6.4质控规则:采用L-J质控图,以±3s为失控限。标准差由本室实验数据得出。6.5如出现失控情况,按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正,并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。7适用仪器美国BECKMANCOULTER公司的DxI800自动发光免疫分析仪。8标本检测步骤装载试剂→进行校准→进行质控→输入工作表→加载样本→测定操作→结果复核→报告。9主要分析参数无须输入操作参数,仪器根据预设的分析项目参数和试剂条码的信息自动进行分析。标本25µl。10结果计算仪器根据校准曲线自动给出每个标本测定结果。测定结果单位以mIU/mL或IU/L表示。11检验结果的报告及范围11.1结果的报告11.1.1结果经审核后,确认准确无误后发出报告。11.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名,并有与申请单相同的医学信息。11.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2报告范围:0.5~200000mIU/mL。超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明,例如:系根据标本重新稀释后重复测定的结果。12操作性能12.1精密度:批内CV3.5%~4.4%;批间CV1.34%~2.15%。12.2分析范围:0.5~200000mIU/mL沭阳县仁慈医院检验科免疫实验室SOP化学发光测定标准操作程序文件编号:SYXRCYYLAB-FGMY版本:A/0页码:8/120生效日期:2012-7-01一、人绒毛膜促性腺激素β亚单位测定标准操作规程第3页共5页12.3分析灵敏度:0.5mIU/mL。12.4方法的有限性及干扰因素:TSH(250µIU/mL)、LH(400mIU/mL),FSH(400mIU/mL)时无交叉反应。甘油三脂(22.6mmol/L)、血红蛋白(10g/L)或胆红素(0.34mmol/L)时在检测允许的精密度范围内对结果没有影响。13参考范围及医学决定水平参考范围:男性和未怀孕女性:10mIu/mL滋养层相关疾病:100000mIu/mL孕期(受孕后)HCG浓度0.2~1week5~50mIu/mL1~2week50~500mIu/mL2~3week100~5000mIu/mL3~4week500~10000mIu/mL4~5week1000~50000mIu/mL5~6week10000~100000mIu/mL6~8week15000~200000mIu/mL2~3months10000~100000mIu/mL14临床意义14.1hCG最初是由滋养层分泌,后来由绒毛和胎盘分泌。在妊娠头三个月,hCG的浓度增加并达到高峰;在妊娠中、后期hCG形成平台。14.2在末次月经后的3到4周内检测尿液或血液中hCG的浓度是确定妊娠最可靠的指标。测定hCG可应用于对异位妊娠、先兆流产、多胎妊娠的诊断。hCG检测浓度低并不能除外妊娠,如果怀疑妊娠,应在48h以后再次采集标本进行检测。14.3hCG浓度升高还可见于滋养层细胞肿瘤和非滋养层细胞肿瘤,如:小肠癌、肺癌、睾丸癌、乳腺癌和前列腺癌、葡萄胎、绒毛膜癌及其脑转移等;测定外周血循环中hCG的浓度对上述患者的疗效监测十分有意义。15结果审核以及分析与相关项目的联系15.1由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2审核者认真审核每一个测定结果,对发出报告结果的可靠性负责,并在报告单的沭阳县仁慈医院检验科免疫实验室SOP化学发光测定标准操作程序文件编号:SYXRCYYLAB-FGMY版本:A/0页码:9/120生效日期:2012-7-01一、人绒毛膜促性腺激素β亚单位测定标准操作规程第5页共5页审核者处签名。15.3相关项目:审核与其他肿瘤标志物等的关系,或参考受检者临床资料,若发现与临床相悖的情况,应分析与查找原因。16有关引用程序与文件16.1DxI800自动发光分析仪仪器标准操作规程。16.2免疫检验室内质控标准操作程序。16.3检验结果审核程序。16.4标本送检和接收程序。17参考文献17.1陆永绥,张伟民主编.临床检验管理与技术规程.杭州:浙江大学出版社,2004.17.2AccesshCG测定试剂说明书。17.3叶应妩,王毓三,申子瑜主编.全国临床检验操作规程(第三版).东南大学出版社,2006.18本SOP变动程序任何一位使用本SOP的工作人员如提出对本SOP改动意见,或本测定项目的方法、试剂有变动的情况,可以对本SOP作出改动,但必须先报经专业主管和科主任批准。19本SOP涉及的记录与表单19.1剂装载记录表19.2质控记录19.3失控及失控处理记录19.4检验结果审校核记录沭阳县仁慈医院检验科免疫实验室SOP化学发光测定标准操作程序文件编号:SYXRCYYLAB-FGMY版本:A/0页码:10/120生效日期:2012-7-01二、黄体生成素测定标准操作规程第1页共5页1检验申请单独检验项目申请:黄体生成素测定(缩写LH);组合项目申请:(女)性激素检查组合。临床医生根据需要提出检验申请。2标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml,不抗凝,置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。也可