搜索
葡萄糖的重金属检查实验简介重金属是指在实验条件下，能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质，如银、铅、汞等。由于在药品的生产过程中遇到铅的机会较多，铅又易积蓄中毒，故检查是以铅为代表。葡萄糖中重金属的检查采用中国药典(2015版)收载的重金属检查第一法。仪器简介：本实验所用到仪器设备与耗材有电子分析天平，药匙，称量纸，纳氏比色管（25ml），吸量管或移液管（2.0ml），洗耳球、量筒（5ml）、洗瓶等。比色管：比色管是化学实验中用于目视比色分析实验的主要仪器，可用于粗略测量溶液浓度。外型与普通试管相似但比试管多一条精确的刻度线并配有橡胶塞或玻璃塞，且管壁比普通试管薄，常见规格有10mL、25mL、50mL三种。比色管示图：纳氏比色管是比色管的一种，又称奈斯勒比色管（Nesslerglasses），是无塞子的比色管，目前广泛用于药物分析操作中。常见的规格有10mL、25mL、50mL等。纳氏比色管及纳氏具塞示图：移液管：移液管是用于准确量取一定体积溶液的量出式玻璃量器。中间膨大部分（球部）标有它的容积和标定时的温度，管颈上部刻有一标线，此标线的位置是由放出纯水的体积所决定的。常见的规格有1、2、5、10、20、25mL等。移液管示图：洗耳球：洗耳球，也称作吸耳球、吹尘球。是一种橡胶为材质的工具仪器。主要用于吸量管定量抽取液体。洗耳球药匙电子分析天平称量纸量筒2.试药和试剂本实验中是涉及试药试剂有葡萄糖（AR），标准铅溶液（新制），pH3.5醋酸盐缓冲液，硫代乙酰胺试液。葡萄糖（AR）标准铅溶液:按照《中国药典》2015版规定配制：称取硝酸铅0.1599g，置1000ml量瓶中，加硝酸5ml与水50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于10μg的Pb)。本溶液仅供当日使用。硫代乙酰胺试液按照《中国药典》2015版规定配制：称取硫代乙酰胺4g，加水使溶解成100ml，置冰箱中保存。临用前取混合液（由1mol/L氢氧化钠溶液15ml，水5.0ml及甘油20ml组成）5.0ml，加上述硫代乙酰胺溶液1.0ml，置水浴上加热20秒钟，冷却，立即使用。pH3.5醋酸盐缓冲液按照《中国药典》2015版规定配制：取醋酸铵25g，加水25ml溶解后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节PH值至3.5（电位滴定法），用水稀释至100ml，即得。实验步骤：实验前准备：硫代乙酰胺（Thioacetamide），简称TAA，化学品，无色或白色结晶。1.硫代乙酰胺作为组试剂的特点：○1可以减少有毒H2S气体逸出，减低实验室中空气的污染程度。○2以均匀沉淀的方式得到较纯净的金属硫化物的沉淀，且共沉淀较少，便于分离。2.用硫代乙酰胺作沉淀剂时，应注意以下几点：○1应预先除去氧化性物质，以免部分硫代乙酰胺被氧化成SO42-，使第四组阳离子在此时沉淀。○2硫代乙酰胺的用量应适当过量，以保证硫代物沉淀完全。○3沉淀作用应在沸水浴中加热进行，并在此温下加热适当长的时间促进硫代乙酰胺的水解，以保证硫化物沉淀完全。○4第三组阳离子沉淀以后，溶液中尚留有相当量的硫代乙酰胺，为了避免被氧化而使第四组阳离子过早沉淀，应立刻进行第四组阳离子分析。原理：硫代乙酰胺在弱酸性条件下(pH3.5醋酸盐缓冲液)水解，产生硫化氢，与微量重金属生成黄色到棕色的硫化物混悬液。在酸性溶液中，硫代乙酰胺水解生成H2S，可代替H2S沉淀第II组阳离子。水解反应如下：CH3CSNH2+H2OCH3CONH2+H2S长时间煮沸，CH3CONH2进一步水解：CH3CONH2+H2O==CH3COONH4硫代乙酰胺的水解速度随温度升高而加快，反应一般在沸水浴中进行。实验过程：1.取25ml纳氏比色管三支，分别为甲管、乙管和丙管。a.取甲管b.取乙管c.取丙管2.对照品溶液的制备（甲管）：精密量取标准铅溶液2.0ml置甲管中，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，加水稀释成25ml。a.移入标准铅溶液至甲管中b.移入醋酸盐缓冲液至甲管中c.朝甲中加水稀释3.供试品溶液的制备（乙管）：称取葡萄糖4.0g(称取范围：3.95-4.05g)置25ml纳氏比色管中，加水适量溶解后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，再加水至25ml。a.移入葡萄糖溶液加水溶解至甲管中b.移入醋酸盐缓溶液加水至甲管中4.监控管溶液的制备（丙管）：称取葡萄糖4.0g(称取范围：3.95-4.05g)置25ml纳氏比色管中，加水适量溶解后，加入标准铅溶液2.0ml和醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，加水稀释成25ml。a.移入葡萄糖溶液加水溶解至丙管中b.加入标准铅溶液至丙管c.移入醋酸盐缓冲液至丙管5.分别在甲、乙、丙三管中各加硫代乙酰胺试液2ml，摇匀，放置2分钟，同置于白色背景上，自上而下透视比较。重金属比色法重金属检查原理：定义-------重金属是指在实验条件下能与S2-作用显色的金属杂质（Ag,Pb,Hg,Cu,Cd,Sn,Bi等），以铅为代表。ChP收载4种方法：第一法直接测定法原理：CH3CSNH2+H2O→CH3CONH2+H2SH2S=2H++S2-Pb2++S2-→PbS↓(黄-黑色）酸度：本反应的pH对显色有很大影响，在pH3-3.5时，PbS↓较完全，酸度增大，呈现变浅，甚至不呈色。因此用强酸处理过的溶液必须先用NH3=H20调pH值至中性。标准液配置与用量：取Pb（No3）2，先配成储备液（为防水解），临用时再稀释成10ugPb/ml。用量以10-20ugPb/27ml为宜（相当于标准Pb溶液1-2ml)。第二法炽灼破坏后测定法应用范围：适合于含芳环或杂环等能与重金属离子形成配位化合物的有机药物。方法：采用三酸处理，然后按第一法测定。1.取炽灼残渣项下遗留的残渣（H2SO4处理）2.残渣+HNO3→加热处理，蒸干→残渣3.残渣+HCL→溶解→加热蒸干（除残留HCL)4.残渣+水→溶解，调pH→转移至比色管中5.按第一法检查注意：标准管同法处理第三法在碱性条件下，以硫化钠为试液，适合于不溶于稀酸而溶于碱的药物。取供试品适量+NaOH+H2O→溶解+Na2S试液，与一定量标准铅液同法处理后的颜色比较。第四法微孔滤膜过滤法适合于重金属含量低的药物（原理与一法同）显色后用50ml注射器转移至滤器中进行压滤，取下滤膜，干燥，比较生成的斑点颜色。供试品溶液有色：在对照管中加少量稀焦糖溶液，（也可加其他无干扰的指示剂等）使两管色调一致。如果外消色法不能消除干扰，可采用内消色法。供试品含有微量Fe3+:会氧化H2S析出S↓,可加VitC0.5-1.0g,使Fe3+→Fe2+,同时在对照管中加等量的VitC，再依法测定。供试品为Fe3+:可利用Fe3+在比重1.103-1.105的HCl(9mlHCl+6ml水）中成为HFeCl62-,用乙醚提取，除去大部分Fe3+,再加KCN,将残留的Fe3+掩蔽起来。药物本身能生成不溶性硫化物时，可加入适当掩蔽剂，如KCN，酒石酸等，使与药物形成稳定的絡合物。注意：1,2,4法与3法所用显色剂和酸度的不同USP法-供试品1-对照品2→同法操作→12≤3-监控管3（1+2）BP法-供试品12ml1-对照品10ml2+2ml1→12＞3-水10ml3+2ml1(空白管用来检查对照管的呈色是否正常）JP法-用硫化钠显色实验仪器使用、维护的注意事项：比色管不是试管，不能加热，且比色管管壁较薄，需要轻拿轻放。同一比色实验中要使用同样规格的比色管。清洗比色管时不能用硬毛刷刷洗，以免磨伤管壁影响透光度。比色时一次只能拿两支比色管进行比较，且背景和光照条件必须相同。