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第三节动物的克隆动物细胞的培养和克隆形成1．动物细胞培养(1)过程组织――→机械消化胰蛋白酶单个细胞的悬浮液――→转入培养液原代培养――→分瓶传代培养(2)原理：细胞增殖。(3)培养条件①无菌、无毒环境②适宜的温度、pH和气体环境③液体培养基，其中含有葡萄糖、氨基酸、生长因子、无机盐、动物血清等。1．动物细胞培养(1)过程组织――→机械消化胰蛋白酶单个细胞的悬浮液――→转入培养液原代培养――→分瓶传代培养(2)原理：细胞增殖。定义、传代原因离体生长、分裂乃至接触抑制广义:动物细胞+组织+器官培养2.细胞系和细胞株种类来源特点细胞系有限细胞系由二倍体细胞传代培养建成有接触抑制；不能连续培养连续细胞系(遗传物质改变)由传代细胞连续培养建成发生了转化，具有异倍体核型有些具有异体致瘤性；有些具有不死性，但不致癌细胞株有限细胞株通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得传代次数有限一般具有恒定的染色体组型、同功酶类型、病毒敏感性和生化特性等连续细胞株可连续多次传代细胞系泛指可传代的细胞细胞株是具有特殊性质的细胞系3.克隆培养法(1)概念：把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术，又称细胞克隆。(2)结果：(3)克隆难易：群体细胞单细胞无限细胞系、转化或肿瘤细胞原代细胞、有限细胞系(4)提高细胞克隆形成率的措施：(5)主要应用：分离缺乏特殊基因的突变细胞系。异质性细胞系→纯系(遗传性状均一)以滋养细胞支持生长、激素（胰岛素等）刺激、添加血清等单克隆抗体制备过程注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选，继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群体外培养注射到小鼠腹腔单克隆抗体促融与筛选方法?动物的克隆繁殖1．原理：动物细胞核的全能性。2．动物克隆过程：3．动物难以克隆的根本原因:各种特化细胞的细胞核中物种的基因组完整，具有全能性，但是基因组中的基因并不同时进行活动，有的基因甚至不表达任何产物。细胞核移植技术分裂3次?植物组织培养和动物细胞培养的比较项目主要原理培养基结果培养目的性质营养物质植物组织培养细胞的全能性固体无机盐、蔗糖、氨基酸、激素等培育成完整植株快速繁殖、获得无病毒植株等动物细胞培养细胞增殖液体无机盐、葡萄糖、氨基酸、激素、维生素、动物血清等培育成细胞系、细胞株获得细胞或细胞产物等动植物克隆的应用(1)遗传疾病的治疗、优良品种的培育(2)物种的优化、濒危物种的保存和对转基因动物的扩群(3)降低畜牧业的成本，缩短育种年限，提高生产效率。(4)应用①生产病毒疫苗、单克隆抗体、干扰素等。②利用动物细胞培养技术中的细胞贴壁生长和接触抑制的特点，可用烧伤病人自己的健康皮肤细胞培养出大量的自身薄层皮肤细胞，以供植皮所需。③培养的动物细胞用于检测有毒物质，判断物质的毒性。性动物细胞培养(细胞克隆)的应用对克隆与组织培养、试管动物(婴儿)区分不清克隆组织培养试管动物(婴儿)生殖方式无性无性有性遗传物质来源2个亲本1个亲本2个亲本性别决定提供核亲本一般没有精子类型用途优良种畜快速繁育，可选择性别快速繁殖无病毒植株解决不孕不育下列有关细胞工程的叙述，错误的是（）A．将两个动物细胞融合产生新细胞，这体现了细胞膜具有一定的流动性B．各种组织干细胞分化形成不同组织细胞是基因选择性表达的结果C．胚胎干细胞有细胞周期，神经干细胞分化形成的神经细胞没有细胞周期D．用胡萝卜韧皮部经组织培养形成的个体，若有变异，其变异类型为基因突变、基因重组和染色体变异DBD下列关于动植物细胞培养的叙述，正确的是(多选)A．培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B．培养液中添加适宜浓度的胰岛素，有利于提高动物克隆的成功率C．克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变D．二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的E．植物愈伤组织通过液体悬浮培养能分散成单细胞，这种单细胞能发育成胚状体BEDD因羊奶的营养价值比牛奶高许多，所以可设想让牛产羊奶，科学家对此做了相关的构想，过程如图所示。请据图完成有关问题。(1)图中涉及的现代生物技术有。(至少写三种)(2)小牛a、小牛b、小牛c的性状表现________(填“相同”或“不同”)，你的理由是；。基因工程、核移植、胚胎移植、胚胎分割、动物细胞培养相同这些个体都是由同一个重组细胞发育形成的(3)有人设想将羊体细胞与牛体细胞进行融合，以获得新物种“羊－牛”，你认为依据目前的生物技术能否实现这一构想？______，你的理由是_____________________。不能因为高度分化的动物体细胞的全能性受到限制，由羊体细胞和牛体细胞融合得到的杂交细胞不能正常发育成完整个体