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点击file→open→任意一张图点击再点击，左右鼠标键可改变图片大小，以便分析，图片大小不影响数据。点击再点倒数第二项，减去背景，保存原设置值。点击再点invert点击再点setmeasurements,勾选如下Ok确定MeanGrayValue:平灰度值IntegratedDensity:总灰度值点击，在区域内可改变大小，最好刚刚圈住每个印记，不改变方框大小，移到旁边黑色区域，计算背景面积点击，measure再把方框移到每个组别，仍点击所有值将会依次出现，如果中间改变方框大小，那么必须再重新将方框移到黑色区域，计算背景面积。所有印记的真实值=系统出现值-同样方框下的背景值