黄酮类化合物提取技术林玲黄酮类成分常用的提取、分离技术醇提取法热水提取法碱溶酸沉法溶剂萃取法pH梯度萃取法柱色谱法黄酮类化合物在花、叶、果等组织中,一般多以苷的形式存在。在木部坚硬组织中,多为游离苷元形式存在。◆黄酮苷类与极性较大的苷元(羟基黄酮,双黄酮,橙酮,查耳酮等):采用丙酮,乙酸乙酯,乙醇,甲醇,甲醇-水(1:1)等提取◆多糖苷类:沸水提取◆花色苷类:0.1%盐酸提取◆黄酮苷元:氯仿,乙醚,乙酸乙酯等提取1.黄酮类化合物的提取【溶剂】90-95%乙醇:提取苷元60-70%乙醇:提取苷类【提取方法】冷浸法、渗漉法和回流法注意:1.含杂质多,可用石油醚去油脂、蜡、叶绿素等脂溶性杂质。2.用炭粉吸附、酚/水洗脱的方法进行苷类成分的精制(1)醇提取法药材乙醇提取药渣乙醇液回收乙醇浸膏回收乙醇流程:70%乙醇于50℃温浸3次药渣提取液减压浓缩,加入等体积水,冷却,滤过沉淀(弃去)滤液上大孔吸附树脂柱(D101),水洗后用70%乙醇洗脱乙醇洗脱液浓缩至干总黄酮(含25%的黄酮苷)银杏叶粗粉银杏叶中总黄酮的提取【用途】用于提取黄酮苷类,如从槐米中提取芸香苷。【优缺点】此法成本低、安全。缺点是水溶性杂质较多,影响精制和分离,纯化处理时可将溶液浓缩后加入多倍量的浓醇将水溶性杂质沉淀去除。(2)热水提取法加HCl调pH1-2,80℃保温30分钟,静置,离心沉淀黄芩粗粉加10倍量沸水,煎煮两次,每次1小时,过滤药渣滤液沉淀上清液(水溶性杂质)加适量水搅匀,加40%NaOH调至中性,再加等量乙醇,过滤滤渣加HCl调pH1-2,充分搅拌加热至80℃保温30分钟,静置过夜,过滤滤液滤液(回收乙醇)沉淀黄芩苷黄芩苷的分离提取【原理】利用黄酮类化合物多数具有酚羟基,显酸性而易溶于碱水,故可用碱水提取;碱水提取液加酸酸化,黄酮类化合物游离即可沉淀析出。【用途】适用于具有酸性而又难溶于冷水的黄酮类化合物,如芸香苷、橙皮苷、黄芩苷的提取。【溶剂】常用碱水:饱和石灰水溶液、5%碳酸钠水溶液、稀氢氧化钠溶液(3)碱溶酸沉法注意:(1)碱水浓度不宜过高否则易破坏母核;(2)酸化时酸性不能太强,否则易生成盐,使得率下降。例如:芦丁的提取槐米石灰乳调pH=8~9药渣滤液HCl酸调pH=3~4沉淀滤液样品OH-提取液(溶解)过滤后+H+沉淀(黄酮类)