γ-谷氨酰基转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮微板法)

北京雷根生物技术有限公司γ-谷氨酰基转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮微板法)简介：L-γ-谷氨酰基转移酶(GGT或γ-GT)是催化γ-谷氨酰基移换反应的酶，γ-谷氨酰基从谷胱甘肽或其他含γ-谷氨酰基物质中转移到另一肽或氨基酸分子上。γ-谷氨酰基转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮比色法)以萘胺盐为底物，在GGT催化下，γ-谷氨酰基转移到甘肽分子上，同时释放出游离的α-萘酚，后者不重氮盐反应，产生红色化合物，其颜色深浅不GGT浓度呈正比，通过酶标仪检测530nm处吸光度，进而计算酶的活性。该试剂盒仅用于科研领域，丌宜用于临床诊断或其他用途。组成：操作步骤(仅供参考)：1、准备样品：①
血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃保存，用于GGT的检测。②
细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃保存，用于GGT的检测。③
(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的GGT含量。2、制作GGT标准曲线：按下表制备标准曲线。3、GGT酶促反应：按照下表设置对照管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进编号名称TE0141100TStorage试剂(A):萘酚标准(1.5mmol/L)1ml4℃避光试剂(B):GGTassaybuffer5mlRT试剂(C):GGT显色剂2支4℃避光试剂(D):显色剂稀释液250mlRT使用说明书1份加入物012345萘酚标准(0.15mmol/L)(ml)00.020.040.060.080.1蒸馏水(ml)0.10.080.060.040.020相当于GGT(U/L)020406080100北京雷根生物技术有限公司行测定。5、GGT检测：混匀，室温放置。分光光度计530nm处检测吸光度，比色杯光径1cm，以对照管调零，读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。以酶活力单位为横坐标，吸光度值为纵坐标绘制标准曲线。计算：以标准管活力单位为横坐标，以吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线，在标准曲线上查出待测样品的GGT酶活力单位。注意事项：1、血清或EDTA抗凝血检测效果较好，肝素钠、柠檬酸、草酸、氟化物等抗凝血会引起浑浊或者抑制酶活性(10-15%)。2、尽量避免使用溶血样本。3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。加入物对照管标准管测定管各浓度的萘酚标准(μl)—5—待测样品(如血清等)(μl)——5GGTassaybuffer(μl)303030混匀，水浴准确孵育。GGT显色工作液(μl)300300300待测样品(如血清等)(μl)5——