亚硝酸钠含量的测定教案(精)

1《食品检验工》教学教案——国家高等职业教育《食品加工技术专业教学资源库》子项目实训项目食品中亚硝酸钠的含量测定课时4主讲教师韩晋辉教学方法讲解、示范实验目的1.掌握盐酸萘乙二胺法的基本原理与操作方法。2.掌握分光光度计的使用。3.掌握亚硝酸钠测定的注意事项。4.掌握标准曲线的绘制方法。教学内容与要求1.掌握亚硝酸钠的测定方法及注意事项。2.学习分光光度计的使用方法。3.掌握标准曲线的绘制方法与数据处理。重点难点1.实验步骤的理解。2.数据处理。3.分光光度计的使用。仪器小型绞肉机、分光光度计、恒温水浴锅、烧杯、容量瓶、量筒、比色管、吸量管、吸耳球、漏斗。试剂饱和硼砂溶液、0.4％对氨基苯磺酸溶液、0.2％盐酸萘乙二胺溶液、亚硝酸钠标准溶液、乙酸锌、亚铁氰化钾。教学亚硝酸盐为白色或微黄色晶体，与食盐相仿，食品工业主要用作发色剂、风味剂及防腐剂等。它除了可以使肉制品美观的红色，还兼有风味剂的用，并且可以抑制脂肪氧化和抑制肉毒芽孢杆菌繁殖。国标中规定午餐肉罐头亚硝酸钠≤50mg/kg21000100001VVmAX过程设计一、实验原理：样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，生成的重氮化合物，再与萘基盐酸二氨乙烯偶联成紫红色的重氮染料，产生的颜色深浅与亚硝酸根含量成正比，可以比色测定。反应式如下：二、实验步骤：1.样品处理：称取2.50克经绞碎混匀的样品，置于100毫升烧杯中，加工6.3毫升饱和硼砂溶液，搅拌均匀，以70℃左右的水约150毫升将样品全部洗入250毫升容量瓶中，置沸水浴中加热15分钟，取出后冷至室温，摇匀，加入1.3毫升硫酸锌溶液以沉淀蛋白质，加水至刻度，混匀，放置10min，除去上层脂肪，清液用滤纸过滤弃去初滤液20毫升，滤液备用。2.测定：吸取20毫升上述滤液于25毫升比色管中，另吸取0.00、0.20、0.40、0.60、0.80毫升亚硝酸钠标准使用液(相当于0、1、2、3、4微克亚硝酸钠)，分别置于25毫升比色管中，于标准与样品管中分别加入1毫升0.4％对氨基苯磺酸溶液，混匀，各加入0.5毫升0.2％盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15分钟，用2厘米比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度。3.绘制标准曲线4.（2）计算：3X：试样中亚硝酸钠的含量，mg／kg；m：试样质量，g；A：测定用样液中亚硝酸盐的质量，ug；V1：测定用样液体积，mL；V0：试样处理液总体积，mL以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。注意事项1.饱和硼砂溶液可以使样品中的亚硝酸钠更好的析出，应充分和样品搅拌均匀；2.亚铁氰化钾和乙酸锌形成的络合物可以沉淀蛋白并不引入新的离子；3.样品处理时蛋白质一定要去除干净，蛋白质在外538nm处也有一定的吸光值，会引起实验误差；4.脂肪在加热时变成液体悬浮于溶液上方，应用吸管去除，以免影响过滤；5.初滤液丢弃，主要用来饱和滤纸；预习思考题1.总结分光光度法测定午餐肉中亚硝酸钠含量的操作关键。69