干化学、尿流式仪及显微镜尿液沉渣检查的关系-ppt课件

向兄弟单位学习干化学、尿流式仪及显微镜尿沉渣检查的关系三零一医院丛玉隆尿液沉查镜检历史Ismail（1000年前），宏观在对尿液进行分析Bright（1827年）首次发现管型Bird（1854年）Purdy（1900年）进一步证明了尿沉渣检查的临床价值Addis（1948年）建立了尿沉渣物定量检查法美国NCCLS（1991年）提出了“尿常规分析”的推荐标准（GP16-P）；经过四年实践以提出了“尿液分析和尿液标本采集、转运和保存”（2019年）的标准文件（GP-16A）日本JCCLS（2019年）制定了“尿沉渣检查标准）中华医学会第一次全国临床检验学术会议（1983年会议）提出了尿常规检查标准化问题中华医学会检验分会临床血液学检验与尿液分析专题研讨会提出了我国尿沉渣的推荐标准（2019年武夷山会议）。尿常规检查的重要意义泌尿系统疾病的诊断和疗效观察其它系统疾病的诊断职业病的辅助诊断安全用药的监护尿液常规检查项目沉渣显微镜检化学成份分析外观检查尿液沉渣显微镜检查尿沉渣显微镜检的重要意义尿沉渣检查标准化标准化尿沉渣检查方法标准化尿沉渣检查方法标准沉渣检查系统自动充液仪检查倒置显微镜检查法Censide检查系统干化学红、白细胞检测与镜检的关系干化学尿红、白细胞检查与镜检关系尿沉渣显微镜检查是诊断泌尿系统疾病的金标准，对诊断、鉴别、予后分析具有重要的意义，迄今为止，尚无一台仪器能完全替代显微镜检查。八一9解放军总医院10解放军总医院干化学尿红、白细胞检查与镜检关系尿沉渣的标准化、规范化操作规程为：尿液10ml，离心5分钟，相对离心力（RCF）为400g，剩余沉淀为0.2ml，混匀后吸沉淀物约20μl，滴入玻片上，用18mm×18mm盖玻片覆盖后镜检。先用低倍镜（10×10）观察全片，高倍镜（10×40）仔细观察，细胞检查10个高倍视野（HP），管型检查20个低倍视野（LP）。报告方式：个细胞/HP，个管型/LP。美国NCCLS文件，推荐使用一次性尿检测板，并用XXul报告，国内专家亦认为应逐步在我国施行个/ul的报告。八一干化学尿红、白细胞检查与镜检关系规范的尿沉渣镜检在常规工作的可行性与筛选规范的尿沉渣镜检是保证尿液分析结果准确的基础，原则上每个尿液标本都采用这种方法检查，但目前化验室人员少，工作量大，每天有几十甚至于几百个标本需要及时报告，要使用规范的镜检及时地发出报告是困难的，最好寻找一个简单、快速的方法进行过筛，即将完全正常的标本筛去后，对异常的标本进行规范性检查。干化学尿液分析仪提供了过筛的手段。八一11解放军总医院干化学尿红、白细胞检查与镜检关系干化学尿红、白细胞筛选的概念与原则所谓过筛就是在仪器、试带符合实验要求，检验人员相对稳定的条件下制定的一个标准，达到此标准可视为尿沉渣成份在正常范围内，可免去进一步显微镜检查。如果一个标本经过干化学、镜检两种方法检查，干化学结果符合过筛标准，镜检结果在正常范围内，说明过筛是正确的。干化学结果不符合过筛标准，镜检结果也异常，也说明过筛标准是正确的。干化学结果异常，镜检结果正常视为假阳性，反之干化学结果正常，镜检结果异常视为假阴性。八一12解放军总医院镜检与试条同时检测尿RBC对比试条镜检00~33~56~1011~2021~40＞40(个/ul)(个/ul)Neg14098110112457742594671198885073163273263351150146681732825917250120336713922325613解放总医院13解放军总医院不同正常筛选标准的RBC测定结果对比分析仪筛选标准镜检异常镜检正常RBC≥3~5/HPRBC≤0~2/HP敏感性(%)特异性(%)假阳性(%)假阴性(%)正常(RBC阴性)0149010035.855.10异常(RBC≥u/l)21832676正常(RBC≤10u/l)4319199.876.630.90.13异常(RBC≥25u/l2179975正常(RBC≤25u/l)294386286.592.713.87.1异常(RBC≥50u/l)188930414解放军总医院镜检与试条同时检测尿WBC对比八一15解放军总医院镜检00-30-53-56-1011-2020Neg26386141125125346107024424913243151005*3230851041294950008*5*7428223423(蛋白阳性)9（RBC阳性）7（Nit阳性）3（单核,淋巴）9(蛋白阳性)3(Nit阳性)5(RBC阳性)2(淋巴)2(蛋白阳性)1(Nit阳性)203(个/ul)(个/ul)试条以试条WBCneg为筛选标准镜检异常(WBC≥5~10/HP)正常(WBC为0~5/HP)试条正常(WBC为阴性)74(10)3364异常(WBC≥25/ul）1171174016解放军总医院以WBC≥25/ul为标准筛选镜下管型WBC阴性WBC＞25/ul0~12~56~10＞100~12~56~10＞10（个/LP）透明管型10840811531558颗粒管型152136141121细胞管型115124腊样管型6117解放军总医院八一以RBC≥25/ul为标准筛选镜下管型RBC≤10/ulRBC0≥25/ul0~12~56~10＞100~12~56~10＞10（个/LP）透明管型83283278271017颗粒管型972202555细胞管型52187腊样管型24118解放军总医院八一以蛋白≥75mg/dl为标准筛选镜下管型蛋白≤25mg/dl蛋白≥75mg/dl0~12~56~10＞100~12~56~10＞10（个/LP）透明管型1061345542919颗粒管型962202637细胞管型75164腊样管型19解放军总医院八一以WBC≥25/ulRBC≥25/ul蛋白≥75mg/dl为标准筛选镜下管型WBC阴性蛋白25≤mg/dl0~12~56~10＞10（个/LP）透明管型29000颗粒管型0000细胞管型0000腊样管型0000RBC≤10/ul20解放军总医院八一干化学法检测白细胞红细胞存在的问题干化学法检查尿内白细胞的原理是基于粒细胞浆内有酯酶可作用于试带中的吲哚酚酯，释放吲哚酚与重氮盐反应形成缩合物，其颜色与细胞的多少成比例。此法只能测定粒细胞，不与淋巴细胞反应。尿液中污染甲醛或高浓度胆红质或使用某些药物（如呋喃咀啶），可产生假阳性；尿蛋白5g/L或尿液中含有大剂量先锋Ⅳ或庆大霉素等药物时，可使结果出现假阴性。引起红细胞试验假阳性：肌红蛋白，易热酶引起红细胞试验假阴性：维生素C八一21解放军总医院干化学尿红、白细胞检查与镜检关系细胞破坏造成的“假阳性”现象：所谓“假阳性”、“假阴性”是以显微镜检查为基础的。由于干化学是检测细胞胞浆内涵物来确定细胞的有无.在实际工作中可能存在下列问题：⑴由于尿液在膀胱贮存时间过长，导致白细胞破坏，酯酶释放到尿液中，造成干化学阳性，镜检阴性的所谓“假阳性”现象。⑵肾病患者，红细胞在肾脏或泌尿道破坏，或尿比重过低、尿PH偏高均易造成经细胞破坏血红蛋白释放尿中，造成所谓红细胞干化学检查的“假阳性”现象。八一22解放军总医院690例标本尿干化学红细胞检查与统检结果分析八一23解放军总医院镜检镜检干化学检查单克隆潜血板阳性105例(细胞破坏引起“假阳性”)加热煮沸后干化学检查全部为阴性(易热酶引起假阳性)690例阳性360例阴性330例阴性330例(符合)阳性0例阳性142例(符合)阴性218例阴性113例干化学过筛应用范围的局限性(1)肾科及泌尿科病人尿液不适合于干化学过筛显微镜检查。即无论干化学结果如何，均应做显微镜检查。镜检结石、结晶、肿瘤细胞作为诊断依据或观察疗效时，不宜用干化学方法过筛。由于干化学分析干扰因素较多，且不可避免的有一定的假阴性率，因此要结合临床表现判断结果，决不可只看干化学分析，忽视镜检。尿液的外观（特别是颜色、浊度）与尿沉渣有一定相关关系，当尿液外观异常时，应注意显微镜检查。八一24解放军总医院干化学过筛应用范围的局限性(2)干化学试带的质量、稳定性及质量控制与过筛的准确性密切相关。仪器及干化学试带一定要符合要求：仪器的正常运转和试带质量合格取得是实验结果的基本保证。笔者制定上述标准使用的是BM公司的Midiitron尿液分析仪及Combur10TestM配套试带.每个实验室使用过筛标准时，首先必须做对照观察（所用干化学试带与显微镜对比），确认仪器试带的敏感性与特异性是否符合过筛标准的要求。八一25解放军总医院尿流式细胞仪与镜检关系流式细胞仪的原理与分类流式细胞仪通用型专用型科研型临床型网织红细胞分析仪血细胞分析仪尿沉渣分析仪导电率尿导电率前向散射光流式细胞测定法荧光电阻抗测定电阻抗信号前向散射光强度荧光脉冲宽度荧光强度前向散射光脉冲宽度细胞体积细胞长度染色部分长度染色强度细胞大小电阻抗红细胞散射图酵母细胞结晶小圆上皮病理管型细菌白细胞上皮细胞管型前向散射光直方图前向散射光直方图红细胞参数白细胞参数氩激光尿样品电极电阻信号放大器稀释导电率感应器荧光信号放大器染色鞘液前向散射光信号放大器流式细胞仪测定原理简图流式细胞仪原理FscFlFlwFscwFlFl2Fscw250ch250chRBCWBCFscFsc尿流式细胞仪与镜检的关系UF可提供客观的形态学指标，尤其对球性血尿和非球性血尿的鉴别UF可直接进行定量检测，简单、快速尿流式细胞仪红、白细胞检查仍是镜检筛选干化学尿与流式“筛选”之比较尿流式较镜检的优势与局限性再见尿沉渣检查的重要意义检查内容：上皮细胞、血细胞、管型及结晶临床意义：上皮细胞扁平上皮大圆上皮尾型上皮小圆上皮血细胞白细胞及脓细胞红细胞尿沉渣检查的重要意义临床意义：管型透明管型细胞管型颗粒管型蜡样管型白细胞管型红细胞管型上皮细胞管型细粒管型粗粒管型脂肪管型肾衰竭管型尿沉渣检查的重要意义临床意义：结晶磺胺结晶碱性结晶酸性结晶亮氨酸及络氨酸结晶三价磷酸盐尿酸铵结晶非晶型磷酸盐尿酸结晶草酸钙结晶非晶型磷酸盐尿沉渣镜检进展1.采用干涉、相差、偏振光、扫描及透射电镜鉴别管型2.有用活体染色及细胞化学染色识别各种管型3.应用单克隆抗体技术识别各种细胞尿沉渣镜检进展尿中红细胞形态尿中白细胞形态尿沉渣镜检进展S染色各种上皮细胞形态尿沉渣镜检进展S染色各种管型形态尿沉渣镜检进展S染色各种管型形态复检条件一REVIEW标记计数错误–总数40,000电导率错误–电导率5ms/cm或38ms/cm界标错误–RBC-Fl-DWSD40ch或–红细胞数2.5/l且其Fsc200ch或–红细胞数15/l时未溶解的RBC%20%二菌尿UF在鉴别血尿来源中的应用301医院用此仪器对随机95例肾小球性和非肾小球性出血病人的尿红细胞形态进行了观察，以临床诊断肾小球病变（肾活检）为标准，以此仪器检测尿非均一性红细胞为肾小球病变诊断依据，结果：敏感性：100％，特异性：78.2％UF在鉴别血尿来源中的应用急性肾小球性肾炎病人尿液测定结果UF在鉴别血尿来源中的应用慢性肾小球性肾炎病人尿液测定结果UF在鉴别血尿来源中的应用前列腺癌病人尿液测定结果UF在鉴别血尿来源中的应用肾结石病人尿液测定结果UF在鉴别血尿来源中的应用慢性膀胱炎病人尿液测定结果尿沉渣成分主要临床意义红细胞月经、过度运动、各种肾，泌尿系统如外伤、肾小管炎症、结石、结核、肿瘤、急性肾小球肾炎白细胞各种肾损害、泌尿道感染、肾盂肾炎上皮细胞肾小管上皮细胞肾实质肾小管受损鳞状上皮细胞正常人或污染管型宽型严重肾疾病肾上皮细胞肾小管退化、变性脂肪肾病综合征颗粒或蜡样肾实质损害透明酸性尿-含高盐，多为病理性细菌泌尿道感染脂肪体(卵圆小体)肾病综合征各种尿沉渣成分主要临床意义尿沉渣染色的临床意义SM染色：管型的鉴别巴氏染色：识别细胞甲苯胺兰：观察管型与核结构过氧化酶：鉴别粒细胞与上皮细胞管型非特异酯酶：识别单核细胞油红O、苏丹Ⅲ：脂