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必修一实验总结第1页共4页一.高倍镜的使用方法1..显微镜的使用高倍镜的使用步骤：①在低倍镜下找到物象，将物象移至视野中央；②转动转换器，换上高倍物镜；③调节反光镜和光圈，使视野亮度适宜；④调节细准焦螺旋，使物象清晰。2．目镜与物镜的结构、长短与放大倍数之间的关系(1)放大倍数与长短的关系①物镜越长，放大倍数越大，距载玻片距离越近，如H1；反之则放大倍数越小，距载玻片距离越远，如H2。②目镜越长，放大倍数越小；反之则放大倍数越大。(2)显微镜放大倍数的含义①显微镜放大倍数是指物像边长的放大倍数。②总的放大倍数是目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。3．高倍镜与低倍镜观察情况比较物像大小看到细胞数目视野亮度物镜与装片的距离视野范围高倍镜大少暗近小低倍镜小多亮远大4、污物位置的快速确认方法移动装片动——在装片上不动——转动目镜动——在目镜上不动——在物镜上不可能在反光镜上5、注意事项显微镜成放大倒立的虚像，例实物为字母“b”，则视野中观察到的为“q”。若物像在偏左上方，则装片应向左上方移动。特别提醒调亮视野的两种方法：调节反光镜、调节光圈。光线强时，用小光圈或平面镜（反光镜）光线弱时，用大光圈或凹面镜（反光镜）观察颜色深的材料，视野应适当调亮，反之则应适当调暗；若视野中出现一半亮一半暗则可能是反光镜的调节角度不对；若观察花生切片标本材料一半清晰一半模糊不清，则可能是花生切片厚薄不均造成的。二.实验技能提升——生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的鉴定被检物质检测试剂颜色反应还原糖斐林试剂砖红色淀粉碘液蓝色脂肪苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液橘黄色或红色蛋白质双缩脲试剂紫色实验注意问题(1)还原糖鉴定实验材料的要求①浅色：不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料，防止颜色的干扰。②还原糖含量高：不能用马铃薯(含淀粉)、甘蔗、甜菜(含蔗糖)。(2)唯一需要加热——还原糖鉴定，且必需水浴加热，不能用酒精灯直接加热。若不加热则无砖红色沉淀出现。(3)非还原糖(如蔗糖)＋斐林试剂――→水浴加热现象不是无色而是浅蓝色[Cu(OH)2的颜色]。(4)唯一需要显微镜——脂肪鉴定，实验中50%酒精的作用——洗掉浮色。(5)记准混合后加入——斐林试剂，且现配现用；分别加入——双缩脲试剂(先加A液，后加B液，且B液不能过量)。两者成分相同，但CuSO4的浓度不同，所以不能混用。(6)若用大豆做材料，必须提前浸泡；若用蛋清作材料，必须稀释，防止其粘在试管壁上不易刷洗；且该实验应预留部分组织样液做对比。(7)易写错别字提示：“斐林试剂”中的“斐”不可错写成“非”；双缩脲试剂中的“脲”不可错写成“尿”。三．核酸在细胞中的分布实验1.实验原理：DNA+甲基绿绿色RNA+吡罗红红色2．实验步骤：3.实验结论：实验中的试剂及其作用试剂作用质量分数为0.9%的NaCl溶液保持口腔上皮细胞正常的形态质量分数为8%的盐酸①改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞②使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合蒸馏水冲洗掉载玻片上的盐酸配制染色剂溶液甲基绿和吡罗红混合染色剂使DNA和RNA着色2、实验操作应注意事项(1)制片①用质量分数为0.9%的NaCl溶液而不是蒸馏水：保持口腔上皮细胞形态，在蒸馏水中细胞会吸水涨破。②取口腔上皮细胞时必须漱口：防止混杂食物碎屑。③载玻片烘干。a．要在酒精灯火焰上来回移动，防止载玻片受热不均匀而破裂。b．烘干至细胞吸附住即可。(2)水解①盐酸的作用：能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。②要注意掌握水温和时间，才能达到水解目的。(3)冲洗①蒸馏水：冲洗载玻片上的盐酸。②缓水流：防止细胞被水流冲走。(4)染色①吡罗红甲基绿染色剂的配制要用蒸馏水。②吡罗红甲基绿染色剂要现用现配。3.DNA和RNA的分布(1)真核细胞的DNA主要分布在细胞核中，线粒体、叶绿体内也有少量分布，RNA主要分布在细胞质中，但在细胞核必修一实验总结第2页共4页中也有少量分布。(2)原核细胞的DNA主要分布在拟核，RNA主要分布在细胞质中；病毒只含有DNA或RNA。四．体验制备细胞膜的方法1．材料：人或哺乳动物的成熟红细胞。2．原因：因为哺乳动物成熟的红细胞中没有__细胞壁、细胞核_和众多的_细胞器__。3．方法：把细胞放入蒸馏水中，细胞由于吸水涨破，细胞内物质流出来就可以得到细胞膜。4．实验程序选材―→制片―→观察―→滴蒸馏水―→观察。五．用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体项目材料选取染色形态观察叶绿体新鲜的藓类的叶(或菠菜叶、黑藻叶等)/无扁平的椭球形或球形线粒体人的口腔上皮细胞健那绿染液短棒状、哑铃形、圆球状、线形等选材：观察线粒体选口腔上皮细胞；观察叶绿体选菠菜叶或黑藻叶（2）染料：健那绿（专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色色）（3）高倍显微镜下可看到叶绿体呈绿色、扁平的椭球形或球形。光学显微镜只能观察线粒体和叶绿体的形态和分布，但不能观察它们的亚显微结构。六：观察植物细胞的质壁分离和复原（P62）七．探究影响酶活性的因素（温度、PH值等）1、对照实验——除一个因素外，其它因素都保持不变的实验。（唯一变量原则）2、自变量——人为改变的变量。因变量——随自变量改变而改变的变量。（变量——实验中可变化的因素。无关变量——除自变量外可能对实验造成影响的可变因素，在实验中无关变量应保持一致且适宜。）3、对照组——在认为处于正常情况下的实验；实验组——经过特别处理的实验八．探究酵母菌细胞呼吸的方式(1)实验材料①酵母菌：a．代谢类型：在有氧和无氧条件下都能生存，是兼性厌氧菌。b．细胞呼吸方式判断：在有氧和无氧条件下细胞呼吸的产物不同，以此来确定酵母菌细胞呼吸的方式。(2)实验装置①有氧条件下装置，如图甲甲②无氧条件下装置，如图乙。乙(3)产物检测①检测CO2的产生试剂名称澄清石灰水溴麝香草酚蓝水溶液现象观察变浑浊由蓝变绿再变黄评价标准石灰水浑浊程度由蓝变绿再变黄的时间长短②检测酒精的产生试剂名称实验条件实验现象重铬酸钾溶液酸性由橙色变成灰绿色(4)结论酵母菌在有氧和无氧条件下都能进行细胞呼吸。在有氧条件下，酵母菌通过细胞呼吸产生大量CO2和水；在无氧条件下，酵母菌通过细胞呼吸产生酒精，还产生少量的CO2。九．实验：绿叶中色素的提取和分离1.色素的提取(1)实验原理：叶绿体中含有叶绿素和类胡萝卜素，这两类色素都溶于有机溶剂无水乙醇等中。(2)实验流程取材：称取5g绿叶，剪碎，放入研钵中。↓研磨：↓过滤：漏斗基部放一块单层尼龙布，将滤液迅速倒入玻璃漏斗中进行过滤↓收集：用小试管收集色素滤液，及时将试管口用棉塞塞严2．色素的分离(1)实验原理：绿叶中色素在层析液中的溶解度不同，它们随层析液在滤纸条上的扩散速度也不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；反之则慢。这样，色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分离开。(2)实验流程步骤名称操作过程制备滤纸条剪滤纸条：将滤纸剪成略小于试管长与直径的滤纸条，并在一端剪去两角↓铅笔画线：在距去角的一端1cm处用铅笔画一条横线画滤液细线用毛细吸管吸取少量滤液↓画线：沿铅笔线均匀地画出一条细线↓待滤液干后，重复画一两次色素的分离将适量层析液倒入试管中，然后插入滤纸条(有滤液细线的一端朝下)，随后用棉塞塞紧试管口注意：不能让滤液细线触及层析液观察与纪录观察试管内滤纸条上出现了几条色素带，以及每条色素带的颜色必修一实验总结第3页共4页1．实验成功的关键(1)色素的提取①选取新鲜叶片：色素含量高。②加入少许SiO2和CaCO3：研磨充分和保护色素。③加入无水乙醇：溶解、提取色素。④收集完滤液后，试管口加棉塞，防止溶剂挥发，并充分溶解色素。(2)色素的分离①滤纸条剪去两角，为的是防止层析液在滤纸条的边缘处扩散过快。②画滤液细线时，画得要细、齐、直，使分离的色素带平整、不重叠；而且要重复一两次，使分离的色素带更清晰。③层析液不能没及滤液细线，防止色素溶于层析液中。2．注意事项(1)裁取定性滤纸时，注意双手尽量不要接触纸面，以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸。(2)根据试管的高度制备滤纸条，让滤纸条长度高出试管1cm，高出的部分做直角弯折。(3)画滤液细线时，用力要均匀，速度要适中。(4)研磨要迅速、充分。①因为无水乙醇容易挥发；②为了使叶绿体完全破裂，从而能提取较多的色素。叶绿素极不稳定，能被活细胞中的叶绿素酶水解而破坏。(5)过滤时，不能用滤纸，要用单层尼龙布(或脱脂棉)，因为滤纸可以吸附色素，降低滤液中色素的含量，使实验效果不明显。3．观察结果及分析注意：丙酮的用途是提取（溶解）叶绿体中的色素，层析液的的用途是分离叶绿体中的色素；石英砂的作用是为了研磨充分，碳酸钙的作用是防止研磨时叶绿体中的色素受到破坏；分离色素时，层析液不能没及滤液细线的原因是滤液细线上的色素会溶解到层析液中；5、色素的位置和功能叶绿体中的色素存在于叶绿体类囊体薄膜上。叶绿素a和叶绿素b主要吸收红光和蓝紫光；胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光及保护叶绿素免受强光伤害的作用。Mg是构成叶绿素分子必需的元素。十．观察根尖分生组织细胞的有丝分裂1.实验材料：洋葱根尖。2．试剂及作用(1)质量分数为15%的HCl＋体积分数为95%的酒精，作用是使细胞分离。(2)0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液，作用是使染色体着色。3．制片步骤：解离→漂洗→染色→制片。4．观察(1)分生区细胞特点：细胞呈正方形，排列紧密。(2)先用低倍镜观察，再用高倍镜观察。二、实验过程分析步骤目的注意事项(1)取材选取分裂旺盛的生物组织切取洋葱根尖透亮部分2～3mm(2)解离杀死并固定细胞并解离细胞壁，便于压片时使细胞分散解离时间为3～5min。时间过短，细胞不易被分散；时间过长，细胞容易被压碎，影响染色。以材料呈白色微透明(云雾状)，用解剖针能轻轻压碎为好(3)漂洗洗去材料中的解离液，防止解离过度；先漂洗后染色，避免酸性的解离液影响碱性染料的染色效果用镊子取出根尖，放入盛有清水的玻璃皿中，漂洗10min(4)染色龙胆紫溶液使染色体或染色质着色染色3～5min(5)制片使细胞分散成单层，便于在显微镜下观察放根尖，滴清水，加盖片，轻加压。注意压片时，不能使盖玻片移动，以免使材料模糊不清，而且要控制好力度，必须一次压片成功，使细胞在盖玻片下分散成云雾状(6)观察装片、并绘图观察并记录实验结果先找到分生区，分生区细胞的特点是细胞呈方形，排列紧密，有的细胞还在分裂必修一实验总结第4页共4页