消化道平滑肌生理特性及药物影响一、实验目的:1、学习哺乳动物离体器官的灌流实验法。2、观察消化道平滑肌自律性运动及药物温度的影响。二、实验对象:三、实验方法:1、实验装置的准备:(1)麦氏浴槽灌流:该浴槽坐浴于盛水的烧杯中,酒精灯加热,温度计测量,控温于37度左右(因水浴升降温速度较慢),故可用此法来维持温度。(2)恒温浴槽的换液方法:其排水管道上夹有弹簧夹,打开用50毫升注射器抽取,可使灌浴槽中的液体流出,主管则可加入新鲜台氏液(3)描记装置:通过张力换能器将信号输入实验系统的通道4,打开计算机,D95主界面生理消化道平滑肌生理特性。2、制备离体小肠标本:用铁棒猛击兔头枕部,使其昏迷,立即剖开腹腔,找出胃幽门与十二指肠交界处,由此取20~30cm长的肠管。先将与该肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去,再将拟取肠管两端分别用线结扎,于结扎两端内侧剪断,取出肠段,置于台氏液中轻轻漂洗,当肠内容物基本洗净之后,将肠管分成6段,每段长2~3cm,两端各系一条线,保存于室温台氏液中。3标本安装:当实验装置准备完毕,将肠段一端牢固地系在通气管钩上,放入准备好的麦氏浴槽中(室温台氏液),另一端系在张力换能器的悬梁臂上,调节氧气袋出气管上的滚轴,控制通气量(使空气气泡从通气管前端呈单个而不是成串逸出,以免振动悬线影响记录),酒精灯开始加热台氏液到37度,实验开始3、观察项目观察离体小肠平滑肌收缩的节律、波形和幅度。(注意:收缩曲线的基线代表小肠平滑肌的紧张性,因此实验过程中不要随意移动该基线。)四、实验结果:实验项目收缩幅度收缩节律室温台氏液→37度1/10万Ach2滴↑↓1/万Adr2滴↑↓1/万Atr2滴↑↓2min后加Ach2滴↑↓换25度台氏液继之→42度42度→五、实验讨论:1、正常曲线:幅度高低取决于钙离子内流量,取决于动作电位,钙离子内流可加强平滑肌收缩,因此,动作电位频率越高,平滑肌收缩强度越大,频率即收缩节律,最终受基本电节律控制。2、加乙酰胆碱,兴奋消化道平滑肌上M受体,平滑肌收缩加强,幅度节律都增加。3、加肾上腺素,兴奋消化道平滑肌上α受体,β受体,引起平滑肌舒张,幅度下降,节律下降。4、加阿托品,抑制消化道平滑肌上M受体,平滑肌收缩受抑制,幅度频率都下降。5、换25度台氏液,低温,平滑肌痉挛性收缩后,稳定于此环境中,与37度相比,幅度节律均下降。6、25度持续加热过程:(1)25度到42度,随着温度升高,组织代谢升高,酶活性增加,消化道平滑肌收缩幅度节律都增加。(2)大于42度,随着温度升高,组织受损,酶活性下降,消化道平滑肌收缩幅度节律都下降。六、实验结论:1、乙酰胆碱使平滑肌收缩加强,幅度节律都增加2、肾上腺素,阿托品低温使平滑肌收缩减弱,幅度节律都下降3、在一定温度范围内,随着温度升高,平滑肌收缩加强,幅度节律都增加【注意事项】1、标本连线必须垂直,并不得与浴槽管壁、通气管和温度计接触,以免磨擦影响记录。2、实验过程中,必须保证标本的供氧及浴槽内台氏液温度恒定(37℃)。3、灌流浴槽内的液面高度应保持相对恒定。4、麦氏浴槽放入标本后,由室温开始加热。5、每次加药前必须先准备好更换用的37~38℃台式液,效应一旦出现,立即换液2~3次,换液应沿内壁流入,避免对肠段的直接冲击,扰记录曲线。待肠段恢复正常活动后再进行下一项步骤。