性能验证

性能验证沈淑怡186014026682•为何要做性能验证•何时做性能验证•性能验证的内容•性能验证的方案主要内容3为何要做性能验证——复现验证性能指标是否符合厂家申明的性能验证性能指标是否适用预期用途，即能否达到质量要求为何要做性能验证——符合、保证4《医学实验室质量和能力认可准则》ISO15189美国临床实验室改进修正法规CLIA’88美国临床和实验室标准化协会CLSI何时要做性能验证5使用新的检测试剂和设备前。设备的重大维修和校准后，比如检测部件。设备搬迁到新的场所后或者长距离移动。试剂配方出现调整后，比如试剂升级换代。性能验证不能只做一次。5.3.1设备6条款号内容5.3.1.2实验室应在设备安装和使用前验证其能够达到必要的性能，并符合相关检验的要求5.3.1.5当发现设备故障时，应停止使用并清晰标识。实验室应确保故障设备已经修复并验证，表明其满足规定的可接受标准后方可使用。实验室应检查设备故障对之前检验的影响，并采取应急措施或纠正措施。当设备脱离实验室的直接控制时，实验室应保证在其返回实验室使用之前验证其性能。设备故障修复后，应首先分析故障原因，如果设备故障影响了分析性能，应通过以下合适的方式进行相关的检测、验证：（a）可校准的项目实施校准验证，必要时，实施校准；（b）质控物检测结果在允许范围内；（c）与其他仪器的检测结果比较；（d）使用留样再测结果进行判断。5.3.1.7应保存影响检验性能的每台设备的记录，包括但不限于以下内容：j)确认设备可持续使用的性能记录；5.3.2试剂和耗材7条款号内容5.3.2.3试剂和耗材-验收试验每当试剂盒的试剂组分或试验过程改变，或使用新批号或新货运号的试剂盒之前，应进行性能验证。影响检验质量的耗材应在使用前进行性能验证。5.3.2.7试剂和耗材-记录应保存影响检验性能的每一试剂和耗材的记录，包括但不限于以下内容：h)证实试剂或耗材持续可使用的性能记录。微生物专业要求：5.3.2.3试剂和耗材验收试验应符合如下要求：（a）新批号及每一货次试剂和耗材使用前，应通过直接分析参考物质、新旧批号平行实验或常规质控等方法进行验证，并记录；（b）新批号及每一货次试剂和耗材，如吲哚试剂，杆菌肽，奥普托辛，X、V、XV因子纸片等应使用阴性和阳性质控物进行验证；（c）新批号及每一货次的药敏试验纸片使用前应以标准菌株进行验证；（d）新批号及每一货次的染色剂（革兰染色、特殊染色和荧光染色）应用已知阳性和阴性（适用时）的质控菌株进行验证；（e）新批号及每一货次直接抗原检测试剂（无论是否含内质控）应用阴性和阳性外质控进行验证；（f）培养基外观良好（平滑、水分适宜、无污染、适当的颜色和厚度，试管培养基湿度适宜），新批号及每一货次的商品或自配培养基应检测相应的性能，包括无菌试验、生长试验或与旧批号平行试验、生长抑制试验（适用时）、生化反应（适用时）等，应以质控菌株进行验证；（g）一次性定量接种环每批次应抽样验证。5.5.1检验程序的选择、验证和确认8条款号内容5.5.1.1总则实验室应选择预期用途经过确认的检验程序，应记录检验过程中从事操作活动的人员身份。每一检验程序的规定要求（性能特征）应与该检验的预期用途相关。5.5.1.2检验程序验证在常规应用前，应由实验室对未加修改而使用的已确认的检验程序进行独立验证。实验室应从制造商或方法开发者获得相关信息，以确定检验程序的性能特征。实验室进行的独立验证，应通过获取客观证据（以性能特征形式）证实检验程序的性能与其声明相符。验证过程证实的检验程序的性能指标，应与检验结果的预期用途相关。实验室应将验证程序文件化，并记录验证结果。验证结果应由适当的授权人员审核并记录审核过程。5.5.1检验程序的选择、验证和确认9条款号内容5.5.1.3检验程序的确认实验室应对以下来源的检验程序进行确认：a)非标准方法；b)实验室设计或制定的方法；c)超出预定范围使用的标准方法；d)修改过的确认方法。方法确认应尽可能全面，并通过客观证据（以性能特征形式）证实满足检验预期用途的特定要求。注：检验程序的性能特征宜包括：测量正确度、测量准确度、测量精密度（含测量重复性和测量中间精密度）、测量不确定度、分析特异性（含干扰物）、分析灵敏度、检出限和定量限、测量区间、诊断特异性和诊断灵敏度。实验室应将确认程序文件化，并记录确认结果。确认结果应由授权人员审核并记录审核过程。当对确认过的检验程序进行变更时，应将改变所引起的影响文件化，适当时，应重新进行确认。应用准则对方法学性能的通用要求(1)检验程序需文件化；实验室负责人或指定的人员应在开始即对程序评审并定期评审。评审通常每年一次。评审应文件化。性能验证：–定量试验：正确度、精密度、可报告范围、（携带污染率）–定性试验：阴性符合率、阳性符合率、重复性、最低检出限等–半定量试验：重复性生物参考区间验证及评审：20份健康人标本，生物参考区间的评审还应该有临床医生的参与。评审内容：生物参考区间的来源、针对的人群、生物参考区间验证结果、与临床诊断的符合性等。生物参考区间建立：120份健康人标本应用准则对方法学性能的通用要求(2)通过与其他实验室（如已获认可的实验室、使用相同检测方法的实验室、使用配套系统的实验室）比对的方式确定检验结果的可接受性时，应满足如下要求：（a）规定比对实验室的选择原则；（b）样品数量：至少5份，包括正常和异常水平；（c）频率：至少每年2次；（d）判定标准：应有≥80%的结果符合要求。实验室内部结果比对应符合如下要求：实验室用两套及以上检测系统检测同一项目时，应有比对数据表明其检测结果的一致性，实验方案可参考WS/T407-2012《医疗机构内定量检验结果的可比性验证指南》，或比对频次每年至少1次，样本数量不少于20，浓度水平应覆盖测量范围。应用准则对方法学性能的专用要求血细胞分析和尿液有形成分分析：建立复检规则，并验证，假阴性≦5%；(5.5.1.3)出凝血检验项目，更换新批号试剂时，如试剂敏感度差异明显，应重新验证生物参考区间；试剂敏感度接近时，可使用5份健康人标本进行结果比对，以确认参考区间的适用性。(5.5.2)免疫定性试验：应按照制造商的说明或定义定期评审临界值或阈值(CUTOFF值)。(5.5.5)如制造商无相关的说明或定义，可以选择以下方法之一验证：阴性来源：选择没有疾病的健康人和非讨论疾病患者的病人的新鲜血清共120份，分3-5批3-5天进行检测，计算X、s，CUTOFF验证值为：X+3s；阳性来源：选择弱阳性（CUTOFF值±20%）新鲜血清或质控血清共120份，分3-5批3-5天进行检测，计算X、s，CUTOFF值验证值为:X-3s。应定期（至少每6个月1次，每次至少5份临床样品）进行形态学检验人员的结果比对、考核并记录；应定期进行仪器法间白细胞分类计数正常标本的结果比对。设备故障后的特别要求设备发生故障后，应首先分析故障原因，如果设备故障可能影响了方法学性能。故障修复后，可通过以下合适的方式进行相关的检测、验证：（a）可校准的项目实施校准验证，必要时，实施校准；（b）质控物检测结果在允许范围内；（c）与其他仪器或方法比对；（d）以前检验过的样品再检验。如果设备故障影响了方法学性能，在设备修复、校准后，实验室可通过检测质控菌株或已知结果的样品的方式进行性能验证。性能验证的基本要求14操作者应熟悉仪器；操作者应熟悉评价方案；在评价实验过程中，设备应经严格校准或检定，所评价方法或检测系统必须有室内质量控制；所使用的标本应与临床标本有相似的基质，最好采用病人新鲜标本，避免基质效应；所使用的标本应尽可能避免干扰物质（溶血、黄疸等）的存在；所选择不同浓度的标本应尽量覆盖厂商声明的线性范围（线性、方法学比对时）并均匀分布；当验证厂商声明的性能时，选择控制物的浓度水平应接近医学决定值及接近于厂商声明试验所具有的浓度。现场评审内容查阅体系文件（程序文件、SOP)：是否有对检验程序文件化；是否有方法学性能验证的实施步骤；有没有复检规则、有没有生物参考区间验证或评审的规定；有没有定期比对相关的规定；文件的描述是否与相关标准或法规相吻合等查阅性能验证报告：是否规范化；是否制定了合适的判断标准等；是否签字保存查血涂片、尿涂片复检情况、是否按照复检规则进行复检现场提问/演示现场试验：留样再测、仪器比对、人员比对、图谱考核等CLSI-EP文件EP5-A2：EvaluationofPrecisionPerformanceofQuantitativeMeasurementMethods;ApprovedGuideline-SecondEdition.EP6-A：Evaluationoflinearityofquantitativeanalyticalmethods:AStatisticalApproach;ApprovedGuideline.EP7-A：InterferenceTestinginClinicalChemistry;ApprovedGuideline.EP9-A2：Methodcomparisonandbiasestimationusingpatientsamples;ApprovedGuideline-SecondEdition.EP10-A:Preliminaryevaluationofquantitativeclinicallaboratorymethods.EP14-A2:Evaluationofmatrixeffects;ApprovedGuideline-SecondEdition.EP15-A:Userdemonstrationofperformanceforprecisionandaccuracy;ApprovedGuideline.EP17-A:ProtocolsfordeterminationofLimitsofDetectionandLimitsofQuantitation;ApprovedGuideline.C28-A2:Howtodefineanddeterminereferenceintervalsintheclinicallaboratory.临床检验行业标准CNAS-CL07：2011《测量不确定度的要求》CNAS-GL03：2006《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》CNAS-GL06：2006《化学分析中不确定度的评估指南》WS/T228-2002《定量临床检验方法的初步评价》WS/T246-2005《白细胞分类计数参考方法》WS/T356-2011《基质效应与互通性评估指南》WS/T402-2012《临床实验室检验项目参考区间的制定》WS/T403-2012《临床生物化学检验常规项目分析质量指标》WS/T407-2012《医疗机构内定量检验结果的可比性验证指南》WS/T408-2012《临床化学设备线性评价指南》WS/T409-2013《临床检验方法总分析误差的确定》WS/T415-2013《无室间质量评价时实验室检测评估方法》WS/T420-2013《临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》WS/T492-2016《临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证》18性能验证的内容定量项目验证内容19•精密度（Precision）验证（包括批内和总精密度）•正确度（Trueness）验证•分析测量范围（AMR）验证•临床可报告范围（CRR）验证•自动稀释（Auto-dilution）验证•参考区间（ReferenceInterval）验证•空白限（LOB）验证•检出限（LOD）验证•定量检测限（LOQ）验证•污染携带（Carryover）验证•方法学比对（MethodComparison）•分析干扰（Interference）性能评价•测量不确定度（MeasurementUncertainty）评定精密度20精密度（precision）的完整词语为测量精密度（preci