肉制品中亚硝酸盐的测定

吉林化工学院食品分析实验报告实验名称肉制品中亚硝酸盐的测定指导教师陈萍班级食品0901学号09340136姓名黄锡红日期2012。10.30肉制品中亚硝酸盐的测定一、目的与要求：1、明确亚硝酸盐的测定与控制成品质量的关系。2、明确与掌握盐酸萘乙二胺法的基本原理与操作方法。二、原理：样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，生成的重氮化合物，再与萘基盐酸二氨乙烯偶联成紫红色的重氮染料，产生的颜色深浅与亚硝酸根含量成正比，可以比色测定。反应式如下：三、试剂与仪器:1、亚铁氰化钾溶液：称取106克亚铁氰化钾[K4Fe9(CN)5.3H2O]，溶于水后，稀释至1000毫升。2、乙酸锌溶液：称取220克乙酸锌[Zn(CH2C00)2·2H20]，加30毫升冰乙酸溶于水，并稀释至1000毫升。3、饱和硼砂溶液：称取5克硼酸钠(Na2B07·10H20)，溶于100毫升热水中，冷却后备用。4、0.4％对氨基苯磺酸溶液：称取0.4克对氨基苯磺酸，溶于100毫升20％的盐酸中，避光保存。5、0.2％盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2克盐酸萘乙二胺，溶于100毫升水中，避光保存。6、亚硝酸钠标准溶液：精密称取0.1000克于硅胶干燥器中干燥24小时的亚硝酸钠，加水溶解移入500毫升容量瓶中，并稀释至刻度。此溶液每毫升相当于200微克亚硝酸钠。7、亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.00毫升，置于200毫升容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5微克亚硝酸钠。8，小型绞肉机。9、分光光度计。四、操作方法：1、样品处理：称取5.0克经绞碎混匀的样品，置于50毫升烧杯中，加工2.5毫升饱和溶液，搅拌均匀，以70℃左右的水约30毫升将样品全部洗入500毫升容量瓶中，置沸水浴中加热15分钟，取出后冷至室温，然后一面转动一面加入5毫升亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5毫升乙酸锌溶液以沉淀蛋白质，加水至刻度，混匀，放置0.5小时，除去上层脂肪，清液用滤纸过滤弃去初滤液30毫升，滤液备用。2、测定吸取40毫升上述滤液于50毫升比色管中，另吸取0.00、0.20、0．40、0．60、0.80、1.00、1.50、2.00、2.50毫升亚硝酸钠标准使用液(相当于0、1、2、3、5、7、10、12.5微克亚硝酸钠)，分别置于50毫升比色管中，于标准与样品管中分别加入2毫升0.4％对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3-5分钟后各加入1毫升0.2％盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15分钟，用2厘米比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。五、数据处理：1、检验待测样品的最大吸光度：最大吸光度区域测试图1-1最大吸光度区域测试图00.050.10.150.20.250.30100200300400500600700波长nm吸光度系列1系列2待测样品最大吸光度测试图1-2最大吸光度测试图00.050.10.150.20.250.3525530535540545550555560波长nm吸光度系列1系列22、标准曲线绘制：样品吸光度数据表1-1标准溶液浓度（ug/ml）0.51.01.52.02.5标准溶液吸光度0.1150.1370.2780.348样品吸光度0.170样品吸光度与亚硝酸盐标准曲线图1-3吸光度与亚硝酸盐标准曲线y=0.0066x+0.017400.050.10.150.20.250.30.350.40102030405060C（ug/ml）A系列1线性(系列1)计算：将样品吸光度带入上图标准曲线公式中得到：0.170=0.0066x+0.0174x=23.12ugx即为测定样液中亚硝酸盐的含量A，将其带入下列公式有：X10001000250401000mAX=10001000250405.2100012.23=0.0578g/kgX：样品中亚硝酸盐的含量，g／kg；m：样品质量，g；A：测定用样液中亚硝酸盐的含量，ug．即样品中亚硝酸盐含量为0.0578g/kg六、实验讨论：1、在样品前处理后，在滤液中的某些成分影响被测组分吸光度时，将构成干扰，影响测量结果的准确性。某些干扰离子与试剂生成有色配合物，使测定结果偏高；某些干扰离子与试剂反应，生成的配合物虽然无色，但消耗大量的显色剂，使被测离子的显色反应不完全，使测定结果偏低；某些干扰离子与被测离子结合成离解度小的另一种化合物，使被测离子与显色剂不反应，使测定结果偏低。2、吸光度测定时，应该先用蒸馏水洗干净比色皿，再用待测样液润洗三次。用滤纸擦干净两侧水滴，注意用手轻轻粘，而不是用力擦。还要注意调准测试仪。反之，会对测试结果造成很大影响。七、思考题1、肉制品中亚硝酸盐的测定，为什么要用试剂空白作参照溶液？为什么用试剂空白调吸光度为零答：空白样，是为了考虑外界因素对实验的影响，而做的对比样。主要是为了消除其它试剂对吸光值的影响。空白样吸光值置零以后，测得亚硝酸盐样品的吸光值才是正确的。八、评语和成绩：成绩：指导教师：