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细菌的分类及鉴定同济医院检验科细菌的生物化学试验原理：由于细菌各自的酶系统不同，新陈代谢的产物也有所不同，而这些产物又各具有不同的生物化学特性。为此，可利用生物化学的方法来鉴别细菌的类别，这种试验称为细菌的生化反应试验常用检查方法•碳水化合物代谢试验•氨基酸和蛋白质代谢试验•碳源利用试验•呼吸酶类试验•抑菌试验碳水化合物代谢试验糖（醇、苷）类发酵试验•原理由于细菌含有发酵不同糖类的酶，故分解糖的能力不同，终末产物亦不一致。•应用鉴定细菌最主要的试验，特别对肠杆菌科细菌的鉴定尤为重要。氧化一发酵试验(O／F试验)•原理氧化型：仅在有氧环境中分解葡萄糖发酵型：在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖产碱型：在有氧或无氧环境中都不能分解葡萄糖结果：两支培养基均无变化为产碱型；两支培养基均产酸为发酵型；若不加石蜡的培养基产酸为氧化型。应用：肠杆菌科细菌（发酵型）非发酵菌（产碱型/氧化型）葡萄球菌（发酵型）微球菌（氧化型）β-半乳糖苷酶试验原理：有的细菌可产生β-半乳糖苷酶，能分解邻-硝基酚β-D-半乳糖苷(ONPG)，而生成黄色的邻-硝基酚，在很低浓度下也可检出。结果：菌悬液呈现黄色为阳性反应，一般在20～30min内显色。应用：迅速及迟缓分解乳糖的细菌ONPG试验为阳性，而不发酵乳糖的细菌为阴性。本试验主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定。七叶苷水解试验原理：七叶苷七叶素黑色化合物培养基：七叶苷培养基、胆汁七叶苷培养基。细菌枸橼酸铁结果：培养基变为黑色为阳性，不变色者为阴性。应用：D群链球菌（+）其它链球菌（-）甲基红试验原理：葡萄糖丙酮酸混合酸（pH)醇酮醛（pH)红色反应（+）橘黄色（-）细菌甲基红试剂培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基。应用：大肠埃希菌（+）产气肠杆菌（-）肠杆菌科中沙门菌属、志贺菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属等为阳性，而肠杆菌属则为阴性。V-P试验原理：葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇二乙酰红色化合物（+）培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基细菌OH-O胍基结果：在数分钟内出现红色为阳性；如无红色出现且于35℃4h后仍如故者即为阴性。应用：常与甲基红试验一起使用，因为前者阳性的细菌，后者通常为阴性。产气肠杆菌（+）大肠埃希菌（-）蛋白质和氨基酸代谢试验吲哚试验•原理色氨酸吲哚玫瑰吲哚（红色）•应用肠道杆菌的鉴定。大肠埃希菌（+）沙门菌属（-）对二甲基氨基苯甲醛硫化氢试验•原理含硫氨基酸硫化氢硫化铅/硫化亚铁（黑色）•应用肠杆菌科菌属间的鉴定。细菌醋酸铅/硫酸亚铁尿素（脲）酶试验原理：无色尿素氨红色应用：肠杆菌科中变形杆菌属的鉴定。细菌苯丙氨酸脱氨酶试验•原理苯丙氨酸苯丙酮酸10%氯化铁绿色化合物•应用：肠杆菌科的鉴定变形杆菌属、摩根菌属、普罗威登斯菌属（+）氨基酸脱羧酶试验原理：氨基酸特异性脱羧酶胺＋CO2指示剂变色应用：肠杆菌科细菌的鉴定。如肺炎克雷伯菌赖氨酸为阳性，鸟氨酸为阴性。明胶液化试验原理：明胶明胶酶氨基酸失去凝固力应用：肠杆菌科细菌的鉴定。如沙雷菌、普通变形杆菌、阴沟肠杆菌等。碳源利用试验枸橼酸盐利用试验•原理枸橼酸盐碳酸盐+氨（pH)溴麝香草酚蓝绿色深蓝色•应用：肠杆菌科细菌的鉴定埃希菌属、志贺菌属、爱德华菌属（-）呼吸酶类试验细胞色素氧化酶试验•原理盐酸二甲基对苯二铵醌类化合物（深紫色）•应用奈瑟菌属、假单胞菌属（+）肠杆菌科（-）细菌Cyt氧化酶过氧化氢酶（触酶）试验•原理某些细菌分泌过氧化氢酶，使过氧化氢生成水和初生态氧，继而形成氧分子出现气泡。•应用金黄色葡萄球菌、奈瑟菌属（+）链球菌属（-）（血浆）凝固酶试验•原理金葡血浆凝固酶•应用：致病性葡萄球菌的鉴定游离结合（凝聚因子）协同因子凝血酶纤原纤维蛋白胆汁溶菌试验•原理胆盐、去氧胆酸钠和牛黄胆酸钠能选择性的溶解肺炎链球菌。•应用肺炎链球菌（+）甲型链球菌（-）CAMP试验B族链球菌