医学微生物学--奈瑟菌属

奈瑟菌属（Neisseria）病原生物学教研室HP奈瑟菌属菌属特点：一群革兰阴性菌，常成双排列，无鞭毛和芽胞，有菌毛和荚膜；专性需氧，均能产生氧化酶和触酶。奈瑟菌属中，脑膜炎奈瑟菌(N.meningitidis)和淋病奈瑟菌(N.gonorrhoeae）对人有致病性，均为典型的细胞内寄生菌。其余的奈瑟菌都是人类呼吸道正常菌群，偶而可引起脑膜炎和心内膜炎等。第一节淋病奈瑟菌（N.gonorrhoeae）俗称淋球菌(gonococcus)，是人类淋病的病原菌，淋病是发病率很高的性传播疾病。生物学性状G—菌，无鞭毛和芽孢，有菌毛。部分菌株还有荚膜。呈肾形或豆形，常成双排列，凹面相对。浓汁标本多见于中性粒细胞胞浆内。形态与染色培养特性专性需氧。初代分离培养营养要求较高，常用巧克力色血平板，供给5%～10%CO2置37℃孵箱中培养。24～48h后形成圆形、湿润、透明或灰白色光滑型菌落。继代培养菌落变大而且粗糙。生物学性状生化反应及抵抗力只分解葡萄糖，产酸不产气，不分解其他糖类。氧化酶试验阳性。淋病奈瑟菌对冷、热、干燥及消毒剂十分敏感。55℃5min或1/4000硝酸银2min即死亡；采集标本注意保温保湿。生物学性状抵抗力抵抗力弱。1%石炭酸1～3min即死亡。本菌能迅速自溶。淋病奈瑟菌对青霉素、头孢胺噻肟钠、环丙沙星、壮观霉素(trobincin)等多种抗生素敏感，但是近年有关耐药菌株的报告增多。生物学性状抗原结构与分类1．菌毛蛋白抗原：黏附2．外膜蛋白抗原：①ProI②ProⅡ③ProⅢ3．脂寡糖抗原(LOS)：类似内毒素生物学性状抗原性转换：淋病奈瑟菌的抗原性易发生变异,即同一种抗原可发生型的转变。抗原变异频率为10-3～10-2，变异速度很快。致病物质菌毛和荚膜：粘附作用，抵抗吞噬外膜蛋白：ProI直接破坏中性粒细胞;ProⅡ参与菌体粘附;ProⅢ阻抑抗菌抗体的活性；脂寡糖：诱发局部炎症，逃避免疫。sIgA酶：能破坏粘膜表面的抗体sIgA致病性与免疫性所致疾病淋病(gonorrhea)：是性传播疾病(sexuallytransmitteddisease,STD)之一。性接触传播为主.淋病性眼结膜炎/新生儿脓漏眼：胎儿经产道分娩时可被感染。淋病奈瑟菌性结膜炎及幼女阴道口阴道炎：通过毛巾、浴池间接感染。致病性与免疫性致病性与免疫性淋病患者男性：尿急尿频、尿道流脓等尿道炎症状。女性：脓性分泌物，感染扩散可以导致不育症。淋病性眼结膜炎/新生儿脓漏眼免疫性由于淋病奈瑟菌抗原结构复杂，菌株间有高度特异性，而且抗原容易发生转换。因此患病后尽管能查出抗体，甚至有sIgA,但是再次感染淋病奈瑟菌的情况仍然极为常见。致病性与免疫性微生物学检查法细菌分离和鉴定标本直接涂片染色镜检分离培养(巧克力血平板)如果在中性粒细胞内发现肾形G—双球菌，对♂有诊断价值；对♀诊断时应慎重。挑选典型的菌落染色镜检生化反应等药敏实验注意事项：用无菌绵拭子蘸取脓性分泌物后，必须保温保湿，立即送检。微生物学检查法快速诊断法1、免疫学方法：SPA协同凝集实验、ELISA法检查菌体抗原2、分子生物学技术：用PCR及核酸杂交技术检测淋病奈瑟菌质粒DNA等防治原则加强预防性病知识教育；禁止卖淫嫖娼；杜绝不正常性行为；用氯链合剂滴眼，预防新生儿脓漏眼。注意公用物品传染(浴巾、毛巾被褥等)防治原则对早期病人用药，彻底治疗。青霉素已不是首选药物，需参考体外药敏试验。疾病预防与控制中心建议：对不伴有并发症的早期淋病应使用头孢曲松、头孢克肟、环丙沙星或氧氟沙星；若合并衣原体感染可联合应用强力霉素。化学用药主要用来预防新生儿脓漏眼，常用1%硝酸银、1%四环素、0.5%红霉素眼膏第二节脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis）俗称脑膜炎球菌(menigococcus)是流行性脑脊髓膜炎(流脑)的病原菌。生物学性状形态与染色无鞭毛和芽孢，有菌毛，G—。新分离菌株有荚膜。呈肾形或豆形，常成双排列，凹面相对。脑脊液标本多见于中性粒细胞胞浆内。人工培养呈卵圆或球形.培养特性及生化反应专性需氧菌。营养要求较高，初代分离培养常用巧克力色血平板，供给5～10%CO2置37℃孵箱中培养。24h形成直径为1～1.5mm的圆形、无色透明、光滑凸起、似露滴状的菌落。该菌能产生自溶酶，若不及时转种，48h后即死亡。血清肉汤培养呈混浊生长。该菌能分解葡萄糖、麦芽糖，产酸不产气，氧化酶试验阳性。生物学性状露水滴样菌落生物学性状抗原结构与分类1．荚膜多糖抗原(群特异性)2．外膜蛋白抗原(型特异性)3．脂寡糖抗原(lipooligosaccharide,LOS)类似内毒素4.核蛋白抗原生物学性状根据荚膜多糖群特异性抗原分成A、B、C、D、X、Y、Z、W135、H、I、K和L等13个血清群。我国95%以上病例由A群菌引起；B群只有散发病例，但病情严重；C群病例极少见。抵抗力对干燥、湿热、寒冷等抵抗力极弱，室温放置3h即死亡。对常用消毒剂也很敏感。例如，1%石炭酸、75%乙醇、0.1%新洁尔灭菌可使细菌迅速死亡。对磺胺、青霉素、链霉素和金霉素均敏感。生物学性状致病物质菌毛：粘附于粘膜上皮细胞，有利于定植荚膜：抵抗吞噬，有利于入侵。sIgA酶：能破坏粘膜表面的抗体sIgA脂寡糖：可引起发热、白细胞增高；作用于微血管循环，引起血栓和出血，皮肤瘀点瘀斑，严重者可致内毒素休克、DIC等。致病性和免疫性所致疾病传染源：病人和带菌者。传播途径：飞沫或接触污染物品经呼吸道传播；致病：流行性脑膜炎（epidemicmeningitidis）疾病的发生发展与机体的抵抗力有密切关系致病性和免疫性免疫性人对脑膜炎奈瑟菌抵抗力较强，以体液免疫为主：①血清中特异抗体能杀死脑膜炎奈瑟菌;②分泌型IgA可阻止该菌对上呼吸道粘膜的粘附;③抗体的调理作用能增强吞噬细胞的功能；母体IgG可经胎盘传给胎儿，故6个月以内的婴儿极少患流行性脑膜炎。儿童因免疫力弱及血脑屏障不成熟，故流脑发病率较高。致病性与免疫性标本直接涂片染色镜检分离培养(巧克力血平板)若在中性粒细胞内外发现典型G—双球菌，则可作出初步判断。挑选典型的菌落涂片染色镜检生化、药敏等血清学实验注意：根据病程发展采集不同部位的标本。采集后必须保温保湿，立即送检。细菌分离和鉴定微生物学检查法快速诊断法可用反向血凝试验、SPA协同凝集试验,对流免疫电泳及ELISA（双抗体夹心法）等方法来检测可溶性抗原，进行快速诊断。微生物学检查法呼吸道传染病，预防要采取综合性措施，包括隔离病人、加强带菌者的检查、管理及预防性投药，保持室内通风良好。近年来，采用纯化A群特异性多糖制备疫苗,接种后免疫效果好，而且机体反应轻微。流脑流行期间，短期使用磺胺药口服或滴鼻，可以预防流脑。患者可用青霉素、氯霉素和红霉素治疗。防治原则预防和治疗复习思考题（1）简述两种奈瑟菌的侵袭部位、途径和疾病特点？（2）对脑膜炎奈瑟菌应如何进行分离培养与鉴定（为何需要床边接种）？