血细胞直方图和散点图的临床意义

血细胞直方图和散点图的临床意义一、什么是直方图？•直方图是通过血细胞计数仪测量而提供的血细胞体积分布图形，这些图形可以表示出细胞群体分布情况。检测区域红细胞红细胞通过小孔库尔特原理Oscilloscope示波镜检测区域白细胞白细胞通过小孔库尔特原理示波镜ABCChannelNo.No.ofCellsAvgVol(fL)TotalVol(fL)1025.50.02126.526.53227.555.04328.585.55429.5118.06530.5152.57631.5189.08532.5162.59433.5134.010234.569.01113535.5Total3351027.5TABLE23242526272829303132333435363738FemtolitersRelativeNumberChannel11Channel1Howwegetfrompulsestohistograms:直方图原理LymphocyteMonocyteGranulocyte淋巴细胞大单个核细胞群粒细胞淋巴嗜碱单核嗜酸中性粒细胞高频度分析-直方图直方图-X轴：体积（fL）-Y轴：相对数量通道划分RBC直方图：36-360fL，256个通道PLT直方图：2-20fL，64个通道….WBC直方图：35-450fL，256个通道二、直方图的临床意义红细胞直方图•在红细胞的7项参数中,RBC、MCV、RDW和HGB是直接测定的,HCT、MCH和MCHC是计算得到的.•MCV：平均红细胞体积•RDW：红细胞分布宽度(其计算为SD/MCV)35360红细胞直方图应用举例(1)-铁粒幼红细胞贫血红细胞直方图应用举例(2)-巨幼红细胞性贫血红细胞直方图应用举例(3)-缺铁性贫血(早期)红细胞直方图应用举例(3)-缺铁性贫血(发展期)红细胞直方图应用举例(3)-缺铁性贫血(恢复期)红细胞直方图应用举例(4)-再障红细胞直方图应用举例(4)-再障(输血后)红细胞直方图应用举例(6)-地中海贫血影响红细胞参数的其他因素(1)-红细胞碎片影响红细胞参数的其他因素(2)-淋巴细胞影响红细胞参数的其他因素(3)-红细胞凝集Beta地中海贫血RBC7.02MCV60.4HGB13.5MCH19.2HCT42.5MCHC31.8RDW15.2缺铁性贫血RBC3.64MCV51.6HGB5.2MCH14.2HCT18.8MCHC27.4RDW22.8缺铁性贫血RBC5.01MCV64.7HGB10.4MCH20.8HCT32.5MCHC32.1RDW36.4R镰刀形细胞性贫血WBC27.6*RMCV91.0RBC2.03MCH31.5HGB6.4MCHC34.6HCT18.5RDW20.5恶性贫血RBC1.80MCV127.9HGB8.0MCH44.4HCT23.0MCHC34.7RDW18.8RBC片段影响RBC4.20HGB11.3HCT33.0MCV76.9MCH26.4MCHC34.3RDW15.8冷凝集RBC1.45MCV147.3HGB11.8MCH81.7HCT21.3MCHC55.4RDW14.7R冷凝集FirstRunAfterWarmingRBC3.734.68HGB15.015.1HCT38.044.4MCV101.894.9MCH40.432.2MCHC39.633.9RDW13.513.8肾衰竭WBC3.9MCV108.7RBC2.90MCH36.9HGB10.7MCHC34.0HCT31.5RDW29.7R高脂血症WBC7.4MCV78.1RBC5.00MCH27.0HGB15.7MCHC34.6HCT45.3RDW13.9慢性肝病WBC13.6MCV83.3RBC3.42MCH28.3HGB9.7MCHC34.0HCT28.5RDW20.7MicrocytosisRBC5.61RMCH16.7RHGB9.3MCHC37.5RHCT24.9RRDW32.9RMCV44.4RPLT80.0R血小板直方图在血小板的直方图上可见两条曲线：一条是2fl-20fl的原始数据曲线;另一条是0fl-70fl的拟合曲线.血小板曲线不拟合的原因•1.血小板计数20×109/L•2.血小板曲线呈现非正态分布正态分布非正态分布血小板曲线不拟合的原因•3.曲线波峰不在3fL-15fL间4.PDW20%巨大血小板WBC13.9FlagsPLT204WBC*RMPV13.1GiantPlatelets小血小板WBC6.7FlagsPLT211PLTRMPV5.9MPVR三、什么是散点图？•散点图是白细胞分类的平面图。中性粒细胞嗜酸性细胞嗜碱性细胞单核细胞淋巴细胞独立定义五个细胞亚群.3DVCSDifferentialMorphometricCellAnalysisLyLyMeanVolLyMeanCondLyMeanScatterStandardDeviation:•LySDVol•LySDCond•LySDScatter0256256256什么是VCS技术？VCS技术是库尔特五分类血球仪对白细胞分类的专利技术，即分类时不需传统的染色方法，仅用三个物理量，VOLUME（体积）、CONDUCTIVITY（传导性）、SCATTER（激光）将五种白细胞分开的技术。VCS检测八千多个白细胞逐个、直接、同时地在流式通道内接受VCS三重检测，得到各自的三维座标值V：检测细胞体积C：检测细胞内部核结构S：检测细胞内部颗粒特征体积检测(V)V是以库尔特原理检测细胞的体积获得的是完全的细胞体积VCS-DC细胞内部结构检测(C)C运用高频探针检测细胞的内部结构获得细胞核复杂程度的信息区分分叶核和非分叶核细胞VCS-RFVCS-LaserS是运用一个宽角度的散射范围（10-70）来测量细胞的颗粒特性更好地根据颗粒特性区分淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸细胞细胞颗粒特性检测(S)VCS技术的强大威力所有检测在相同的试剂环境下进行。美国贝克曼库尔特256X256X256=1677万个数据点日本希森美康256X256=6万个数据点VCS检测八千多个白细胞逐个、直接、同时地接受VCS三重检测，得到各自的三维座标值VCSVCS三维分析技术•将检测过的8,192个细胞分布到一个以V、C、S为三维坐标的空间内，显示出细胞群特征。•高智能的计算机软件分析分析细胞群的位置、相对密度、轮廓、和大小。•三维坐标的数据分析位点多过16×106个。正常白细胞散点图LaserScatterVolumeoutndCc.四、散点图的临床意义正常散点图杆状核细胞（未成熟中性粒细胞），晚幼粒细胞，巨多核粒细胞RegionALaserScatterVolumeoutndCc.A细胞体积增大，有原粒细胞，早幼粒细胞，中幼粒细胞，晚幼粒细胞等。在AML-M3中的早幼粒细胞就在此区域。RegionA2异常现象LaserScatterVolumeoutndCc.A2Inthesefourcases,thefirstisnormal(ontheleft).Progressively(增多的）totheright,casesareshownwithanincreasingnumberofImmNE.从上述四例图中，左侧第一张图为正常，依次显示为未成熟粒细胞的逐渐增多NormalTypicalpositionsofneutrophilPrecursor（原始的）cellsintheScattervsVolumePlot慢性淋巴细胞白血病、病毒感染、慢性淋巴细胞增生性疾病和凋亡的淋巴细胞。RegionC异常现象LaserScatterVolumenucCtod.CWBCResearchPopulationData白细胞群落研究参数Normal正常CLLsamplewithsmallandlargelymphocytes慢淋可有大小不等的淋巴细胞出现B-CLLNormalViralInfection急粒M3，M4，M5的单核细胞核原始粒细胞，疟疾的单核组织细胞等。RegionH异常现象LaserScatterVolumeoutndCc.H未成熟的嗜酸性粒细胞，见于寄生虫感染和过敏性嗜酸性粒细胞增多症。RegionK异常现象LaserScatterVolumeoutndCc.KM1急性粒细胞性白血病WBC74.6Neut%6Myelocyte%1Blast%86PLT105FlagsImmGrans/Bands2BlastsM3急性早幼粒细胞性白血病WBC2.9Neut%10Band%1Promyelocyte%53PLT7FlagsImmGrans/Bands2BlastsM4粒单细胞性白血病WBC67.8Neut%42Mono%34ImmGrans%7Blast%4PLT55FlagsImmGrans/Bands2BlastsM5单核细胞性白血病Mono%47ImmGran%8Blast%34PLT50FlagsBlasts慢性粒细胞性白血病WBC54.6ImmGran%1Blast%75PLT145FlagsImmGrans/Bands2Blasts五、网织红细胞参数的临床意义•网织红细胞计数是用作红细胞产生或红细胞生成的指标，是诊断或监测贫血治疗最常用的临床指标。•网织红细胞计数是反映骨髓红细胞成长活性的简单和重要的指标。•网织红细胞的定义是：无核、具有较高水平核糖体核糖核酸（rRNA)的成熟红细胞。•网织红细胞在骨髓中成熟需要4天，成人在正常情况下，所有红系细胞均以网织红细胞形式从骨髓释放。网织红细胞亚群分辨网织红细胞高成熟度网织红成熟红细胞白细胞非红细胞干扰低成熟度网织红网织红细胞参数•RET%：网织红细胞百分比，来源于(网织红细胞数值÷所有红细胞数值)×100%，正常参考值为0.5%～2.5%•RET#：网织红细胞绝对值，来源于(网织红细胞百分比×红细胞数量)，正常参考值为(0.02～0.1)×1012/L•IRF(MI)：网织红细胞不成熟度，来源于(不成熟的网织红细胞÷所有网织红细胞)，正常参考值为0.2～0.4•MRV：平均网织红细胞体积，来源于所有网织红细胞体积的平均值，正常参考值为100～125fl(比正常红细胞略大)网织红细胞参数•MSCV：平均球形红细胞体积，来源于在网织红细胞计数中所有红细胞体积的平均值，正常参考值为84～104fl•HLR%：高散射性网织红细胞百分比，来源于(高激光散射值网织红细胞÷所有红细胞)×100%，正常参考值为0.07%～0.71%•HLR#：高散射性网织红细胞绝对值，来源于(高散射性网织红细胞百分比×所有红细胞数量)，正常参考值为(0.003～0.05)×1012/L•网织红细胞绝对值计数更能反映骨髓增生，它是网织红细胞百分数与红细胞计数的乘积，参考值为（24～84）×109/L。溶血时，由于大量网织红细胞进入血循环，网织红细胞可增至6%～8%以上，急性溶血时，可高达20%左右，严重者可在50%以上，绝对值常超过100×109/L。•网织红细胞增高，＞5%常为溶血性贫血，＞10%，则溶血性贫血的诊断常可成立。•网织红细胞增多也可见于失血性贫血或巨幼细胞贫血近期治疗后，但失血往往有临床证据，因而可以区别。•IRF的临床意义：未成熟网织红细胞，也称移动或张力细胞，正常情况下不足网织红细胞总数的5%。未成熟网织红细胞在大量的促红细胞生成的刺激下会释放到外周血中，如出血，某些贫血或对刺激骨髓造血治疗的反映。IRF类似于中性粒细胞的核左移，能够提供额外的红细胞信息，这些信息可以缩短疾病从诊断到治疗或单纯的治疗时间。•IRF在其他方面的临床应用包括：•监测骨髓移植后干细胞再生情况•监测强度化疗后骨髓再生情况•监测铁、维生素B12和叶酸治疗•监测毒性药物对骨髓的影响•通过促红细胞生成监测肾脏移植•对贫血进行分类和评价•监测新生儿输血•检测再障危象•1、提高贫血的分类、诊断和治疗•大卫等人的研究表明将IRF与网织红细胞计数结合进行成熟度分析可提高贫血的分类。下表总结了不同临床疾病