靛酚蓝比色法测定土壤氮

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靛酚蓝比色法测定土壤铵态氮提取方法:取新鲜土样10.0g,放入100mL三角瓶中,加入2mol••L-1KCL溶液50.0mL。用橡皮塞塞紧,振荡30min,立即过滤于50mL三角瓶中(若土壤NH4+—N含量低,可将液土比改为2.5:1)A试剂:1)复合液:28gNaOH、5gNa2EDTA·2H2O和50g酒石酸钾钠溶于1L去离子水中,保存于棕色瓶中。2)催化液:150g水杨酸钠和0.3g硝普钠溶于1L去离子水中,保存于棕色瓶中。3)显色液:200gNaOH和250g苯酚定容至1L,保存于棕色瓶中。4)混合液:催化液和显色液1:1混合,用前进行配制。5)次氯酸溶液:60mL5.25%次氯酸钠溶液稀释至1L,保存于棕色瓶中。6)氮标准溶液:a.2.5mgNH4+-N/mL储备液:11.79g(NH4)2SO4定容至1L。b.10μgNH4+-N/mL工作溶液:吸收1mL储备液,稀释至250mL.B步骤1)打开分光光度计,预热30min;2)吸取2mL样品液加入10mL容量瓶或刻度试管中;3)吸取0,0.1,0.2,0.4,0.6和0.7mL工作溶液加入10mL容量瓶中,铵离子的浓度分别为0.0,0.1,0.2,0.4,0.6和0.7μg/mL。若超过0.8μg/mL,则不成线性关系;4)加入5滴0.25%正硝基酚;5)用5NNaOH中和。在碱性条件下,溶液显黄色;6)加入1mL复合液和1mL混合液,摇匀;7)加入1mL次氯酸溶液,摇匀;8)稀释至10mL,室温放置60min后,在626nm处比色;9)绘制工作曲线,并寻找样品氮浓度。C计算:含氮率(mg/kg)=(C×Vs)/WsC:标准曲线上查得的铵浓度(μg/mL)Vs:样本溶液总体积(mL)Ws:样本重量。紫外分光光度法测定硝态氮提取方法:取新鲜土样25g,放入250mL三角瓶中,加入CaSO4•2H2O0.25g和125mL水,盖塞后,用振荡机振荡10min。放置5min后,将悬液的上部清夜用干滤纸过滤,澄清的滤液收集在干燥洁净的三角瓶中。(若滤液因有机质呈现颜色,可加活性炭除之)1.试剂1)氮标准贮存溶液[ρ(N)=100mgL-1],称取0.7218g硝酸钾(KNO3,分析纯),溶于水中,转入1000mL容量瓶中,定容摇匀。2)氮标准溶液[ρ(N)=10mg.L-1]:将氮标准贮存溶液准确稀释10倍。2.操作步骤1)工作曲线吸取氮标准溶液0mL、1mL、2mL、3mL、4mL、5mL、6mL分别于50mL比色管中,用水定容至刻度,得到氮的标准系列溶液0mgL-1、0.2mgL-1、0.4mgL-1、0.6mgL-1、0.8mgL-1、1.0mgL-1、1.2mgL-1,测定A220和A275。以A(A=A220-A275)为纵坐标,氮的浓度为横坐标绘制工作曲线。2)直接吸收样品溶液测定A220和A275,根据样品A值(A=A220-A275)查得测定液的浓度。3.结果计算ρ(N)=ρV/Wρ(N)-样品中总氮含量,mgkg-1;ρ-从工作曲线上查得氮浓度mgL-1;V-提取液体积,mL;W-样品重量,g注意:两测定方法中,标准溶液的配制均应用提取土壤的溶液进行配制。

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