体外诊断试剂干扰因素及其消除方法

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体外诊断试剂干扰因素及其消除方法1、非特异性干扰1)疏水作用原理:反应环境中存在的疏水性的物质,如样本中的脂肪/细菌/细胞碎片……与Ag/Ab或胶乳通过疏水作用结合,产生假阳。处理方式:表面活性剂或亲水聚合物分解。2)补体补体(complement,C)是存在于正常人和动物血清与组织液中的一组活化后具有酶活性的蛋白质。原理:Ab的Fc段与C1q补体结合位点暴露,激活血清中的补体分子与包被或标记Ab结合,产生假阳。处理方式:通过EDTA(络合剂)处理样本。3)类风湿因子类风湿因子(rheumatoidfactor,RF)是针对IgGFc片段上抗原表位的一类自抗体,一般为IgG和IgM。原理:人血清中的类风湿因子(RF)与包被或标记Ab的Fc片段结合产生假阳。处理方式:使用无Fc片段的Fab片段抗体动物IgG中和。2、异噬性抗体异嗜性抗体是指能够结合动物抗体而干扰免疫分析的所有人源抗体。包括:①人抗鼠抗体(HumanAnti-MoreAntibodlesHAMA)②人抗山羊抗体(HAGA)③人抗兔抗体(HARA)异嗜性抗体从何而来?a动物接触(驯兽师、兽医)b动物产品接触(烹饪)c动物辅助治疗(胸腺细胞、羊细胞、胚胎细胞)d食物(奶酪)e注射疫苗f输血g自身免疫性疾病h母婴传递I心脏病变秘方药物异嗜性抗体干扰的原理3、什么是阻断剂阻断剂是一种可结合异嗜性抗体,从而有效防止异嗜性抗体介导的免疫分析干扰的生物制剂。1)阻断剂类型a被动阻断剂:非特异性物质(鼠IgG等),结合异嗜性抗体的亲和力弱。b主动阻断剂:能特异性结合人类异嗜性抗体,结合异嗜性抗体的亲和力强。2)常见的阻断剂厂家阻断剂系列RocheMAK33系列ScantibodiesHBR系列/鼠IgGMilliporeChemiBlock系列BiodesignA66800H菲鹏HIER系列万孚鼠IgG4、怎样确认干扰1)同一样本采用不同检测方法,若结果不一致说明可能存在干扰物。2)将样本倍数稀释后再检测,若检测值呈非线性,说明存在干扰物。3)同一样本添加阻断剂与为添加阻断剂的检测结果不一致,说明存在干扰物。4)同一样本56℃灭活半小时与不灭活检测结果不一致,说明可能存在不补体干扰。

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