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1发酵罐系统操作规程一.准备工作1.检查电源是否正常，空压机、微机系统和循环水系统是否正常工作。2.检查系统上的阀门、接头及紧固螺钉是否拧紧。3.开动空压机，用0.15Mpa压力，检查种子罐、发酵罐、过滤器、管路、阀门等密封性是否良好，有无泄漏。罐体夹套与罐内是否密封（换季时应重点检测），确保所有阀门处于关闭状态（电磁阀前方的阀门除外）。4.检查水（冷却水）压、电压、气（汽）压能否正常供应。进水压维持在0.12Mpa，允许在0.15-0.2Mpa范围变动，不能超过0.3Mpa，温度应低于发酵温度10℃；罐体可靠接地；输入蒸汽压力应维持在0.3Mpa；空压机压力值0.8Mpa，空气进入压力应控制在0.25-0.30MP（空气初级过滤器的压力值）。5温度、溶氧电极、PH电极校正及标定，详见触摸屏PH、DO的标定帮助。6.检查各电机能否正常运转（共4个）。电磁阀能否正常吸合（整套系统共11个电磁阀）。二.灭菌操作1.空气管路的灭菌1.1空气管路上有三级预过滤器、冷干机和除菌过滤器。预过滤器、冷干机不能用蒸汽灭菌，因此，在空气管路通蒸汽前，必须将通向预过滤器的阀门关闭，使用蒸汽通过减压阀、蒸汽过滤器然后进入除菌过滤器。1.2除菌过滤器的滤芯不能承受高温高压，因此，通过蒸汽减压阀调整0.13Mpa，不得超过0.15MPa，严禁用过热蒸汽对除菌过滤器灭菌。1.3空消过程中，除菌过滤器下端的排气阀应微微开启，排除冷凝水。1.4空消时间应持续30分钟左右，当设备初次使用或长期不用后启动时，最好采用间歇空消，即第一次空消后，隔3～5小时再空消一次，以便消除芽孢。1.5经空消后的过滤器，应通气吹干，约20～30分钟，然后将气路阀门关闭。保持空气管道正压。2.种子罐（酸碱罐消泡罐）空消2.1种子罐空消前，应将打开排污阀Q22打开（使夹套内的压力不超压），即将夹套的水放掉。2.2关闭Q14，微开Q15,打开蒸汽阀门Q12，打开Q13向罐内通蒸汽；打开Q18、Q19通过取样口向罐内直接通蒸汽。2.3将罐上的接种口，排气阀Q9及排污（料路）管路上的阀门Q24、Q25微微打开，使蒸汽通过阀门排出，当湿度达到1220C后开始计时，调整阀门Q9、Q13、Q19的开度，保持罐压在0.13～0.15Mpa（温度1220C~1280C），可根据工艺调整空消的温度与压力。2.4当空消30～40min后应关闭Q13、Q15、Q19，然后再关闭Q12、Q18，打开空气管路上的阀门Q14、Q13向罐内通空气冷却，使罐内保持正压0.03MPa-0.05MPa之间，空消时最好将夹套的排水阀打开，以防夹套水排不干净。2.5需要快速冷却时则关闭夹套排污阀门Q22，打开冷却水阀门Q27/DC1向夹套通水冷却，达到常温后关闭冷却水。特殊情况下，可采用间歇空消（隔3～5小时再空消一次，以便消除芽孢）。22.6空消结束后将罐内冷凝水排掉，并将排空阀门打开，防止冷却后罐内形成负压损坏设备。2.7空消时溶氧、PH电极取出，妥善保存，以延长其使用寿命。3.种子罐（酸碱罐消泡罐同种子罐）的实消实消是当罐内加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭菌的过程。3.1空消结束后，关闭进气阀门Q13,打开Q9卸去罐内压力，将校正好的PH、DO电极装好，尽快将配好的培养基从加料口加入罐内，此时夹套内应无冷凝水。3.2培养基在进罐之前，应先糊化，一般培养基的配方量应根据工艺要求确定，发酵液的最终容积为罐体全容积的70％左右(泡沫多的培养基为60-65％左右，泡沫少的培养基可达75～80％)，考虑到冷凝水、接种量及是否流加补料，初定容由生产根据工艺的要求自行决定，要在实践中摸索。3.3先开启机械搅拌装置，低速（50-100r/min）转动，使罐内物料均匀混合。33.4为减少冷凝水，先打开套排污阀Q22、蒸汽阀Q21，对罐内培养基预热（采用夹套通汽预加热）。当罐内温度升到90℃时（具体温度应按蒸汽质量而变动），关闭夹套进汽阀Q21，关闭Q14，全打开进汽阀Q12,打开Q13通入蒸汽，全开Q18，微开Q19通过取样口向罐内通蒸汽，关闭Q25、Q26，全开Q23,微开Q24向罐内直通蒸汽，微开尾气阀门Q9（三路通汽灭菌），关闭电机搅拌，当罐内温度升到105℃时，缓缓打开排气阀将罐顶冷空气排掉，持续5min，关闭排气阀。3.5当温度上升到121—123℃，罐压升至0.12Mpa时（不得超过0.2Mpa），控制蒸汽阀门Q9、Q19、Q13、Q24的开度大小，保持温度与罐压不变，开始计时，微开火焰接种口向外排蒸汽，30分钟后，关紧焰接种口，关闭Q24（关闭前应人为地开大蒸汽量几次，避免培养基残留于阀门处）,关闭Q23，关闭Q19、18，关闭Q13、Q12停止供汽。3.6关闭夹套排污阀门Q22，打开冷却水阀Q27/DC1向夹套通水冷却，打开电机搅拌，当压力降到0.05MPa时微微开启排气阀和空气进气阀门Q14、Q13向罐内通空气搅拌，加快冷却速度，并保持罐压为0.05Mpa，直到罐内培养基温度降至接种温度。当罐内温度降至比发酵工艺所要求的温度高2－3℃时，关闭阀门Q27/DC1停止通冷却水。注：1）在空消实消时一定排尽夹套内的余水，否则会导致罐体压扁，造成设备损坏。2）在空消、实消结束后冷却过程中，严禁种子罐产生负压，以免造成污染。三.种子罐接种（移种）1.接种1.本系统采用火焰封口接种，接种前应事先准备：酒精棉花、钳子、镊子、接种环、石棉网手套、Z字扳手。2.菌种装入三角烧瓶内，接种量根据工艺要求确定。3.将酒精棉花围在接种环周围点燃，将菌种瓶口在火焰上烧一会儿，用Z字扳手拧开接种口，迅速将菌种倒入罐内，此时应向罐内通气，使接种口有空气排出（压力接近与零，但不能为零）。4.将接种口盖在火焰上灭菌后拧紧。接种后，罐压保持在0.03-0.07Mpa（0.05Mpa），调节通风量。42.移种2.1.移种前应先路内的冷凝水随时可以排空。2.2移种时在关闭蒸汽阀后应当立即进行移种，避免造成负压污染。2.3采用压差移种即P小大于P大，移种前对移种管道、阀门蒸汽灭菌20min，P小0.05Mpa，P大0.03Mpa，打开移种管道上的阀门，通过压差作用转罐，移种结束后立即关闭移种阀，然后打开与之联通的蒸汽阀通入蒸汽进行冲刷消毒，并立即清洗种子罐，防止发酵料粘结在管道阀门及罐壁上，消毒后立即关闭蒸汽阀门和排冷凝水的阀门及管帽。四.取样在接种完成后或在发酵中途要取样检查时，可通过取样口取样。取样前，取样管路阀门需用蒸汽灭菌，防止杂菌污染而引起误导，取样结束后同样要用蒸汽冲洗取样管道及阀门。操作方法：全开蒸汽阀门Q18，微开Q20，当时间到15分钟后，将酒精棉花围在取样口周围点燃，关闭Q20，关闭Q18，打开Q19，打开Q20，先将取样管内的液体排光后，将准备好的取样瓶在火焰边打开，快速取样并盖好，关闭Q20，然后打开Q18清洗/灭菌取样口5分钟，关闭Q20、Q18。取样完成后，要用PH仪检测发酵液的PH值，然后校正PH；当系统接种完成，调节好压力与流量后，系统一可以进入发酵模式，进行自动控制（温度、PH、DO），具体的工艺参数由操作工自己设定，系统将按设定好的参数可以进行自动控制或操作工手动控制。四.种子罐培养1.取样完成后，要用PH仪检测发酵液的PH值，然后校正PH；当系统接种完成后，把压力与流量调节好，系统则可以进入发酵模式，进行自动控制（温度、PH、DO），具体的工艺参数根据生产要求自己设定，系统将按设定好的参数可以进行自动控制或操作工手动控制。2.种子移入种子罐后控温培养，罐压一般0.03-0.05Mpa，转速根据工艺要求而定，调节循环水的温度控制发酵温度，当环境温度高于发酵温度时，用冷凝水降温。PH调节由控制系统通过执行机构自动加减实现。泡沫报警由泡沫探头检测泡沫5信号在触摸屏以指示灯形式显示。注：1）灭菌前应对PH电极校正，培养过程中PH的控制使用蠕动泵的加酸加碱来实现的，酸瓶碱瓶先在灭菌器中灭菌。2）溶氧（DO）的测量与控制：溶氧电极的标定：接种前在恒定的发酵温度下，将转速及空气量开到最大值时的溶氧DO值作为100％.培养过程中溶氧测量和控制：DO值的控制采用调节空气流量和调节转速来达到，转速与溶氧的关联的控制。其次必须同时调节进气量（手动）控制。五.取样在接种完成后或在发酵中途要取样检查时，可通过取样口取样。取样前，取样管路阀门需用蒸汽灭菌，防止杂菌污染而引起误导，取样结束后同样要用蒸汽冲洗取样管道及阀门。操作方法：全开蒸汽阀门Q18，微开Q20，当时间到15分钟后，将酒精棉花围在取样口周围点燃，关闭Q20，关闭Q18，打开Q19，打开Q20，先将取样管内的液体排光后，将准备好的取样瓶在火焰边打开，快速取样并盖好，关闭Q20，然后打开Q18清洗/灭菌取样口5分钟，关闭Q20、Q18。取样完成后，要用PH仪检测发酵液的PH值，然后校正PH；当系统接种完成，调节好压力与流量后，系统一可以进入发酵模式，进行自动控制（温度、PH、DO），具体的工艺参数由操作工自己设定，系统将按设定好的参数可以进行自动控制或操作工手动控制。七.出料1.本设备的出料是利用罐压将发酵液从出料管道排出，根据发酵液的浓度，罐压可控制在0.05～0.10Mpa。2.出料后取出溶氧、PH电极清洗保养。PH电极存放在饱和的氯化钾溶液中，溶氧电极放于保护套中。3.出料结束后，应立即放水清洗发酵罐及料路管道阀门，并开动空压机，向发酵罐供气并搅拌，将管路中的发酵液冲洗干净。4.如果发酵罐暂时不用，则对发酵罐进行空消，并排空罐内、夹套及管道内的水。八.维修与保养1.安置设备的环境应整洁、干燥、通风良好，水、汽不得直接泼到电器上。62.设备启用之后，必须及时清洗，防止发酵液干结在发酵罐及管路、阀门内。3.各类仪表，应按规定要求保养存放压力表、安全阀、温度仪每年应校准一次。4.设备停止使用时应清洗、吹干。过滤器的滤芯应取出清洗，凉干，妥善保管，法兰压紧螺母应松开，防止密封圈永久变形。5.空压机周围的环境应保持清洁，空气清新，排水沟为活水，机体表面干净。6.空气储存罐定期打开罐底的排污阀，排掉罐内的冷凝水（大约30天左右处理一次，具体情况应更具当地的空气湿度而定）。7冷干机应定时按下开关键（绿色按钮）排放里面的冷凝水。附：发酵罐系统的维护、清洗和保养为了保证发酵罐正常运行，用户除了必须熟悉设备的工作原理与各部件的结构、性能作用以及管路、阀门的作用外，还应该重视和加强设备的维护与保养，只有做到设备精心维护才能保证设备处于最好状态，延长设备工作年限。发酵罐系统的日常检查维护和定期检查维护发酵罐系统的维护与保养可分为日常和定期两种方式，二者缺一不可。日常检查维护（设备运行中的监控内容应做好相应记录）系统压力、罐内压力是否稳定在规定范围。搅拌系统、控温系统、电磁阀响声是否正常。培养液颜色是否正常。温度、溶氧PH显示参数是否与设定符合。罐内液位是否正常。阀门管接头、各接口是否正常，有无泄漏情况。定期检查维护隔三个月，需对设备进行全面检查修正。断所有电源、水源、气（汽）源。仔细检查系统所有密封圈、密封端的情况是否正常。如有永久变形、老化、划伤、损坏，必须更换。检查除菌过滤器完好情况，有破损、堵塞现象就要更换。电机碳刷磨损情况与整流子、轴承、联接器、搅拌系统情况。检查电器控制器所有开关、按钮、电器、电子元件、固定螺丝、螺帽是否有松动、发热现象。发酵罐罐体的清洗维护和保养清洗发酵罐罐体是直接与物料接触的场所。其表面光洁度的程度以及内部构件的清洁度是直接影响染菌的处于因素。因此，在每次发酵结束后和再次使用前都必须及时清洗罐体及相关设备，清洗时应注意电器元件、电极接口，不能进水，受潮。清洗前应取出PH、DO电极按其要求保养（见电极保养）。清洗罐内可配合进水进气、电机搅拌、加温一起进行，如多次换水还不能清洗洁7净，则要打开顶盖用软毛刷刷洗罐内部件。方法如下：控制开关与电源开关，取下顶盖电极、电机及其连线插头。拔下进气胶管冷凝器快速接头拆下进气过滤器上胶管与接头；把顶盖连同搅拌一起垂直向上拆卸