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1胚胎工程一、体外受精和早期胚胎发育1、哺乳动物精子的发生：（1）时期：初情期——情功能减退（2）场所：睾丸的曲细精管（3）过程：阶段一：初级精母细胞的形成。阶段二：精子细胞的形成。阶段三：精子细胞的变形成熟精子2、卵子的发生：（1）场所：卵巢和输卵管（2）时间：哺乳动物卵泡的形成和在卵巢内的储备，是在出生前（胎儿期）完成的排卵是在哺乳动物进入初情期开始的有丝分裂生长、复制减数第一次分裂（3）过程：卵原细胞多个卵原细胞初级卵母细胞胎儿期排卵前（卵巢）第一极体减数第二次分裂合子次级卵母细胞受精过程中（输卵管）第二极体（精子和卵子发生上的区别和联系：（1）卵泡的形成和储备在出生前完成。（2）精子减数分裂两次是连续的，场所惟一（曲细精管）。卵子减数分裂两次是不连续的，第一次在卵巢，第二次在输卵管，场所不惟一）3、受精：（1）准备阶段精子获能卵子发育到减数第二次分裂中期（2）场所：输卵管（3）过程：①顶体反应（精子穿入放射冠）②透明带反应（精子穿越透明带）阻止多精子入卵的两屏障③卵黄膜封闭作用（精子进入卵黄膜）④雌雄原核形成，配子结合成合子。（受精的标志：卵黄膜和透明带之间出现两个极体；受精完成的标志：雌雄原核融合）滋养层细胞孵化滋养层细胞4、胚胎发育：受精卵卵裂期桑椹胚囊胚原肠胚外胚层：表内细胞团内细胞团内胚层：下注：①细胞分裂是有丝分裂，早期细胞数量不断增加，但胚胎总体积并不增加，或略有缩小；②桑椹胚每个细胞都有发育成完整胚胎的潜能；③囊胚的内细胞团发育成胎儿的所有组织和器官，滋养层细胞胎盘胎膜。二、体外受精和早期胚胎发育1、体外受精（1）卵母细胞的采集①超数排卵处理法：注射促性腺激素②从活体动物采集①手握法：体型较小，易于控制的家畜（2）精子的采集②假阴道法：大型家畜③电刺激：野生、经济动物2（3）准备精子的获能①培养法②化学诱导法：肝素、钙离子载体A23187卵发育成熟：减二中（4）受精：获能的精子和培养成熟的卵子，在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。2、早期胚胎培养两“盐”（1）培养液成分两“素”+动物血清两“酸”（2）培养程度：一般不得超过囊胚期（注：不同动物的胚胎移植时间相同吗？）三、胚胎移植（时间：桑椹胚或囊胚）实质：早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移1、供体：遗传性能和生产性能优良受体：健康的体质和正常的繁殖能力2、生理学基础：（1）哺乳动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。（2）早期胚胎处于游离状态。（3）受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应。（4）供体胚胎的遗传特性在孕育的过程中，不受任何影响。3、基本程序：①同期发情处理。②配种或人工受精。③对胚胎的收集——冲卵（桑椹胚或囊胚）④对胚胎进行质量检查，合格后向受体移植或放入-196℃的液氮中保存。⑤胚胎移植（手术法和非手术法）。⑥对受体进行妊娠检查。4、意义：提高优良种畜的繁殖力四、胚胎分割1、仪器：实体显微镜和显微操作仪。2、定位：动物无性生殖或克隆的方法之一。3、材料：发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚。（常见二分割，分割时内细胞团要均等分开，以免影响胚胎的恢复和进一步发育）五、胚胎干细胞（简称为ES或EK细胞）1、来源：早期胚胎或原始性腺。2、特点：形态上：体积小、细胞核大、核仁明显。功能上：具有发育的全能性。体外培养：可以增殖而不发生分化：在饲养层细胞上或加抑制因子向不同组织细胞分化：加分化诱导因子3、应用治疗人类的某些顽症；揭示细胞分化和细胞凋亡的机理。选择供体母牛受体母牛……同期发情处理……超数排卵供体公牛配种取出早期胚胎质量检查、培养胚胎移植妊娠检查分娩（胚胎移植的犊牛）胚胎移植的过程：未配种