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骨髓检查BoneMarrowExaminationWhere?血常规检查：RBC1.8×1012/L；WBC2.1×109/L；PLT45×109/LHow?Why?骨髓检查将带给你答案！！骨髓检查细胞形态学检查造血干细胞培养骨髓细胞学检查细胞抗原检查遗传学分析等骨髓检查骨髓活检形态学检查细胞化学染色概述（Introduction）骨髓:人体的造血组织，位于身体的许多骨骼内,是红细胞，粒细胞和血小板生成的唯一场所，同时也产生淋巴细胞和单核细胞。血细胞生成与发育T淋巴系祖细胞B淋巴系祖细胞淋巴系干细胞红系祖细胞粒－单系祖细胞嗜酸粒祖细胞嗜碱粒祖细胞巨核系祖细胞骨髓系干细胞全能干细胞TotipotentialStemCellTSC血细胞的分化、发育、成熟具有一定的规律性，我们在辨认细胞时需要掌握下列几个方面：胞体胞质—量、颜色、内含物胞核—大小、形状、结构、颜色、核膜、核仁核质比胞体：血细胞随着分化发育其体积逐渐变小（除外巨核细胞系；早幼粒大于原粒）早期红细胞成熟红细胞胞质(浆):血细胞随着分化发育其胞质量——由少到多（淋巴除外）色——由深蓝到浅蓝或灰（红）颗粒—由无到有（除外红细胞系,浆细胞一般无颗粒，小淋巴细胞可没有颗粒。）原始细胞幼稚细胞成熟细胞胞核:血细胞随着分化发育其胞核体积——由大到小（巨核胞核由小到大）形态——由圆到不规则（红系核型规则而最终消失；淋巴细胞的核型改变不明显）染色质—由疏松细致到紧密粗糙颜色——由染淡紫色到深紫色成熟细胞幼稚细胞原始细胞核仁:血细胞随着分化发育其胞核内的核仁从有到无。（除外淋巴系、单核系，一直有）原始细胞早期幼稚细胞中晚期幼稚细胞核仁核仁核质比：由大到小，即核大质少到核小质多（除外巨核系）一、骨髓细胞形态学检查临床应用1.用于造血系统疾病的诊断、辅助诊断及病情监控、疗效观察如：白血病、再障、巨幼细胞贫血、血小板减少性紫癜的诊断；缺铁性贫血的辅助诊断2.用于某些非造血系统疾病的诊断及辅助诊断如：原虫感染、代谢性疾病、转移性癌肿。三、适应症、禁忌症，标本采集及送检（一）适应征：①原因不明的发热、骨痛、恶病质；②原因不明的肝、脾、淋巴结肿大；③原因不明的外周血细胞数量、形态异常禁忌征：血友病患者、妊娠中晚期患者（二）标本采集部位及方法：骨髓穿刺术常用取材部位：成人：髂前、后上棘（较易掌握分寸）；胸骨（阳性率高，有一定危险性）体位：胸骨及髂前上棘穿刺时取仰卧位；髂后上棘穿刺时取侧卧位。采集标本量:0.2ml以下,如需同时作细菌培养等其它检查，应先抽骨髓液涂片。三、骨髓检查申请单的填写（详细）各医院都有其自己设计印刷的骨髓检查申请单，格式大同小异，基本包括以下内容：1.病人基本情况姓名、性别、年龄、职业、门诊号、住院号、通讯地址或工作单位、就诊或住院的科室、病室。2.标本采集情况（1）骨髓来源：注明髂前（左、右）、髂后（左、右）、胸骨、脊突；（2）取材是否顺利；（3）其它取材部位，第几次送检，上次标本编号等。3.临床诊断及送检目的。4.主要症状及病史；主要体征：包括皮肤、淋巴结、肝、脾，其它。5.主要实验室检查记录，包括血液学方面及其他与疾病有关的各类检查结果的详细数据。6.取材时间、送检时间、送检医师签名。四、骨髓细胞形态学检查程序染色；低倍镜检查；油镜检查；（细胞化学染色）；计算、结合临床资料总结分析得出诊断意见及建议。低倍镜检查1.观察骨髓涂片的取材、涂片及染色情况取材满意的标准：骨髓小粒、脂肪滴、骨髓特有细胞2.判断骨髓增生程度共分五级；按照有核细胞与成熟红细胞的比骨髓增生程度分级及临床意义分级有核细胞数成熟红细胞常见情况极度活跃1:1白血病和某些骨髓增生性疾病明显活跃1:10骨髓增生性疾病、增生性贫血、ITP、脾亢、感染。某些儿童或青少年增生活跃1:20正常人，增生性贫血或白血病化疗后增生减低1:50再障、骨髓纤维化，急性造血停滞。偶见于老年人极度减低1:200再生障碍性贫血、骨髓坏死等骨髓增生程度分级(高倍镜）极度减低1~5/HP增生减低5~20/HP增生活跃20~50/HP明显活跃50~100/HP极度活跃100/HP重要概念：粒／红比值：粒细胞的百分率总和与有核红细胞百分率总和之比。（M:E或G:E）正常值：2-4:1油镜检查：1、有核细胞分类计数并观察有无形态异常2、粒/红比值计算正常骨髓象0.取材满意、骨髓小粒丰富，图片及染色良好。增生活跃1.粒系增生活跃，占有核细胞的40％～60％，各阶段细胞比例适当，其中原始粒细胞2%，早幼粒细胞5%，中、晚幼粒细胞约15%，杆状核粒细胞多于分叶核粒细胞。嗜酸性粒细胞5%，嗜碱性粒细胞1%。各阶段细胞形态无明显异常。骨髓取材满意的指标*1.抽吸骨髓时病人有特殊的酸痛感。图2.骨髓液可见骨髓小粒和脂肪滴。图3.镜下可见骨髓特有细胞如:巨核细胞、浆细胞、成骨细胞等。4.中性杆状核/分叶核高于外周血中此比值。（二）骨髓穿刺方法干抽(drytap)*指非技术原因，多部位、多次均抽不出骨髓液而言。常见于：①骨髓纤维化；②骨髓异常增生致骨髓填塞的白血病、真红等。2.红系增生活跃，占有核细胞的20％左右，各阶段细胞比例适当，其中原红胞：2%，早幼红细胞5％，中、晚幼红细胞各约为10％，细胞形态无明异常。成熟红细胸大小、形态及染色大致正常。粒/红约2-4:1。3.淋巴细胞占有核细胞20％(小儿可达40％)，单核细胞及浆细胞各4％，大多为成熟阶段细胞，且细胞形态无异常。正常骨髓象（低倍镜）常用的化学染色概念细胞化学染色是以细胞形态学为基础，结合运用化学反应的原理对血细胞内的各种化学物质（糖类、蛋白质、脂类、酶类、铁、核酸等）作定性、定位、半定量分析的方法。铁染色细胞外铁：骨髓小粒中贮存在单核——吞噬细胞系统内的铁（幼稚红细胞之外的铁）细胞内铁:幼稚红细胞以内的铁，细胞核周围正常值：细胞外铁：1+---2+铁粒幼红细胞：12%---44%铁染色（ironstaining）用于小细胞低色素性贫血的鉴别诊断缺铁性贫血：内、外铁均减少铁粒幼细胞贫血：内、外铁均增多MA、HA、AA：正常或轻度增多缺铁性贫血（外铁消失）铁粒幼细胞贫血用途：鉴别急性淋巴系与非淋巴系白血病结果：粒系(+)；单核系(±)；淋巴系(–)原粒单核淋巴早幼晚幼中幼过氧化物酶染色(peroxidase，POX)中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP)鉴别：慢粒NAP↓，类白血病反应NAP↑化脓感染NAP↑，病毒感染NAP↓CML类白非特异酯酶染色(α-NAE)：用途：鉴别急粒与急单结果：粒系（-）或弱（+）不被NaF抑制单核、巨噬(+++)，可被NaF抑制糖原染色（过碘酸雪夫反应，PAS)：粒系中原粒cell(-)，早幼粒cell强阳性，单核（±），淋巴（-），少数（±），红细胞（-）；巨核呈阳性反应。PAS临床意义AML-M6幼红细胞呈阳性反应MA幼红细胞呈阴性反应POXNAP铁染色PAS谢谢大家HAVEAGOODDAY!