红细胞计数和血红蛋白测定

2红细胞检查3红细胞概述472小时48小时血红蛋白(血色素，Hb或HGB)是一种微红色的胶体物质，分子量为64458。是一种呼吸载体，每克血红蛋白可携带氧1.34毫升．成人红细胞总量约有600g血红蛋白，可携氧800毫升。血红蛋白概述1.血红蛋白组成6FEPFe++血红素HPHb2.血红蛋白分子结构及成分组成Hb的多肽链两大类：①α类链：αζ和θ链；②非α链：βδγε链。α链由141个氨基酸组成，β链由146个氨基酸组成。7每个Hb分子由2条α类肽链和2条β类肽链组成，每条珠蛋白肽链含有1个亚铁血红素。8在人体不同生长时期，Hb种类与比例不同：10检测方法1.手工显微镜法：2.血液分析仪法：任务一红细胞计数定义：测定每升血液中所含红细胞数目，用？.？X1012/L表示。1112改良牛鲍计数板计数板1314【操作】1.准备计数板2.加稀释液：2ml3.加血：10μl混匀4.充池5.计数6.计算：红细胞数=N/5*25*10*200*106/L151．手工法误差来源：标本、操作、器材、固有误差2．仪器法严格按照操作规程、定期进行室内和室间质控16质量控制1.手工显微镜法①血液分析仪的校正②白细胞减少时的对照核实。③血小板计数受小红细胞干扰时的校正2．血液分析仪法方法精确，且操作简便、快速，已广泛应用。17方法学评价成年：男性（4～5.5）×1012/L女性（3.5～5.0）×1012/L新生儿：（6.0～7.0）×1012/L18参考值191．生理性变化(1)年龄与性别的差异(2)精神因素(3)剧烈体力运动和劳动(4)气压降低(5)妊娠中、后期临床意义202．病理性变化(2)红细胞增多1)原发性红细胞增多2)继发性红细胞增多3)相对性红细胞增多(1)红细胞和血红蛋白量减少1）红细胞生成障碍2）造血原料缺乏3）利用障碍红细胞4）破坏过多和失血临床意义21医学决定水平①高于6.8×l012/L，应采取相应的治疗措施。②低于3.5×1012/L为诊断贫血的界限，应继续寻找原因。③低于1.5×l012／L应考虑输血指该项目结果如高于或低于某一个值时就应该采取一定的措施，为患者处理起提供依据的作用。临床意义定义：血红蛋白测定是指测定血液中各种血红蛋白的总浓度，用g/l表示22任务二血红蛋白测定1．氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法2．其他测定法十二烷基硫酸钠血红蛋白（SDS-Hb）法叠氮高铁血红蛋白(HiN3)法碱羟血红蛋白法沙利(Sahli)酸化血红蛋白法溴代十六烷基三甲胺血红蛋白测定法（CTAB）等23检测原理HiCN转化液：即文齐氏液540nm处有一吸收波峰，用分光光度计测定换算成每升血液中的血红蛋白浓度，或制备标准曲线供查阅。24CN-血红蛋白高铁血红蛋白氰化高铁血红蛋白高铁氰化钾540nm血红蛋白浓度吸光度25血红蛋白浓度计算公式：Hb(g/L)=Aג540HiCN×64458/44000×251=A×367.72627方法学评价方法优点缺点HiCN操作简便、快速(5min)，结果稳定可靠，试剂容易保存，便于质控，为参考方法①KCN有剧毒②高白细胞和高球蛋白可致浑浊。③HbCO转化慢SDS-Hb不用剧毒试剂、无公害，操作简便，呈色稳定，准确度和精度高①SDS-Hb消光系数未确定②SDS质量差异性大。③SDS溶血活力大，不适于同时进行自动化分析AHD575同HiCN法，不用剧毒试剂不便于自动检测、氯化血红素纯度达不到标准HiN3准确度和精密度高，试剂毒性低HbCO转化慢CTAB溶血活力强，但不破坏白细胞，适合自动化分析精密度和准确性低2829质量控制①成年：男性：120～160g／L；女性：llO～150g／L。②新生儿：170～200g／L。③老年(70岁以上)：男性：94～122g／L；女性87～112g／L。30参考值①轻度贫血，成年男性Hb＜120g/L，成年女性＜100g/L；②中度贫血＜90g/L；③重度贫血＜60g/L；④极度贫血＜30g/L。31临床意义