移液枪的校准与维护李福祥(实验室管理员)法国GILSON芬兰Labsystems日本NICHIRYO美国TOMOS德国Brandepperdorf芬兰BIOTEC美国JENCONS加样器加样器注意事项为防止液体进入移液器套筒内,注意以下几点:压放按钮时保持平稳;移液器不得倒转;吸嘴中有液体时不可将移液器平放等。建议挥发性较强且有腐蚀性的液体不用移液枪加样,还有可能与聚丙烯反应的液体也不能用。使用了酸或有腐蚀蒸气的溶液后,最好拆下套筒,用蒸馏水清洗活塞及密封圈。在调整取液量的旋钮时,不要用力过猛,并应注意计数器显示的数值不要超过其可调范围。注意事项切勿用油脂等润滑活塞或密封圈(不同厂家、使用者、实验室的现状)。在取液之前,所取液体应在室温(15-25C)平衡;液体温度与室温有异时,将吸嘴预洗多次再用;移液温度不得超过70℃。固定枪头用旋钮方式,避免通过上下用劲的方式固定枪头,因为这样容易引起加样枪的机械元件的松动或损坏。旋转的方向为右手边方向,否则容易因为松动而影响密封性。用完枪后务必把它调回最大量程处,避免由于弹簧长时间处于压缩状态而受到影响。加样器应根据使用频率进行维护,一般每3-12个月进行一次,具体方法如下:一般维护可用中性洗涤剂(如洗餐具用的洗涤灵)清洁,或者用60%的异丙醇,然后用蒸馏水反复洗涤,去除洗涤剂或异丙醇,晾干。外部清洁用纱布等柔软的布料蘸医用酒精擦拭。如果有液体进入加样器内的严重污染,可以将加样器拆开后进行清洁,具体拆开步骤参照加样器说明书(不同的加样器的拆开方式有所不同)。高压消毒,有的加样器的吸管部分可高压消毒,如Eppendor的Research单道可调加样器。但消毒时不可超温超时,也不能挤压放置,以免造成变型。维护量程到200μl的移液枪A:活塞B:活塞弹簧C:套筒D:锥形吸管以Brand枪为例,从结构入手量程在200μl以上的加样枪一个轴衬(F)带有密封圈的弹簧(B,E)提示:不要将B,E拆开,不要让E变形,如果需要清洗用纱布或棉签蘸中性洗涤剂或60%异丙醇清洗,然后去离子水冲洗。干燥温度不能高于120℃,降温以后再装配。加样器的校准校准环境和用具要求:室温:20~25℃,测定中波动范围不大于±0.5℃。电子天平:放置于无尘和震动影响的台面上,房间尽可能有空调。称量时,为保证天平内的湿度(相对湿度60-90%),天平内应放置一装有10ml蒸馏水的小烧杯。小烧杯:5~10ml体积。测定液体:温度为20~25℃的去气双蒸水。选定校准体积:拟校准体积;加样器标定体积的中间体积;最小可调体积(不小于拟校准体积的10%)。如为固定体积加样器,则只有一种校准体积。校准步骤:将加样器调至拟校准体积,选择合适的吸头;调节好天平(关键在于水平与校正量程);来回吸吹蒸馏水3次,以使吸头湿润,用纱布拭干吸头垂直握住加样器,将吸头浸入液面2~3mm处,缓慢(1~3秒)一致地吸取蒸馏水;将吸头离开液面,靠在管壁,去掉吸头外部的液体;将加样器以30℃角放入称量烧杯中,缓慢一致地将加样器压至第一档,等待1~3秒,再压至第二档,使吸头里的液体完全排出;记录称量值;擦干吸头外面;按上述步骤称量10次;取10次测定值的均值作为最后加样器吸取的蒸馏水重量,按附表所列蒸馏水Z因子计算体积。按校准结果调节加样器。体积准确度(平均误差)准确度(重现性)ul误差(ul)误差(%)S.D.(ul)R.S.D.(ul)P202±0.1±5.0≤0.03≤1.550±0.1±2.0≤0.04≤0.8010±0.1±1.0≤0.05≤0.5020±0.2±1.0≤0.06≤0.30P10020±0.35±1.8≤0.10≤0.550±0.40±0.8≤0.12≤0.24100±0.80±0.8≤0.15≤0.15P20050±0.5±1.0≤0.20≤0.40100±0.8±0.8≤0.25≤0.25200±1.6±0.8≤0.30≤0.15P1000200±3±1.5≤0.60≤1.30500±4±0.8≤1.0≤0.201000±8±0.8≤1.5≤0.15可操作元件1.吸/排液按钮2.枪头弹出帽3.体积设定旋钮4.套筒5.锥形吸液管其他型号的枪,按照说明书来校准。谢谢!2007-10-29