食用菌制种技术

食用菌菌种的生产1食用菌的栽培一般包含几个步骤：首先是制作菌种，即通过孢子或菇体组织分离出菌丝体，并加以扩大繁殖形成生产菌种；其次是将制好的菌种接于培养基质，生产出食用菌子实体。孢子菇体组织菌丝体菌种培养基质子实体萌发分离2一、菌种的制作食用菌菌种有特定的制作程序，只有掌握了制种技术，才能生产出优良菌种，使食用菌栽培获得成功。1、菌种类型及制种程序（1）菌种类型使用目的的不同保藏用菌种实验用菌种生产用菌种3一、菌种的制作1、菌种类型及制种程序（1）菌种类型物理性状固化菌种固体菌种液体菌种外观形态颗粒状菌种片状菌种砖状菌种培养容器袋装菌种瓶装菌种4一、菌种的制作1、菌种类型及制种程序（1）菌种类型培养基的主料粪草菌种谷粒菌种木块菌种木屑菌种5一、菌种的制作1、菌种类型及制种程序（1）菌种类型菌种按生产程序一级种(母种）二级种（原种）三级种(栽培种）6一、菌种的制作1、菌种类型及制种程序（1）菌种类型①一级种一级种又称母种、试管种。将经孢子分离法或组织分离法得到的纯培养物，移接到试管斜面培养基上培养而得到的纯种。采用分离法获得的母种数量有限，一般可将菌丝再次转接到新的斜面培养基上进行转管繁殖，能得到更多的母种，称为再生母种，即可用于生产，也适用于纯种的保藏。一支长满菌丝体的试管母种可分移成10多支新试管。试管种若不马上使用，可置于4℃的冰箱中保存。7一、菌种的制作1、菌种类型及制种程序（1）菌种类型②二级种二级种又称原种，这是由母种转接到装有麦粒等固体培养基质的专有菌种瓶中经过培养后形成。原种可采用750mL菌种瓶或500mL罐头瓶作为培养容器。一般一支母种可扩大繁殖6-8瓶原种。若原种直接用于生产，则成本太高，因此，原种还必须进一步扩大繁殖成三级种，使菌种数量增多，才能用于栽培。由于原种的培养基质接近栽培所用的基质，因此原种也可用于小规模的栽培。8一、菌种的制作1、菌种类型及制种程序（1）菌种类型③三级种三级种又称栽培种，它是由二级种进一步扩大繁殖而得。栽培种的培养基质与二级种相似，更接近于栽培基质。三级种数量多、成本低。栽培种一般采用固体培养基，用聚乙烯塑料袋或玻璃瓶作培养容器。通常一瓶原种可繁殖30-50袋栽培种。9一、菌种的制作1、菌种类型及制种程序（2）制种程序菌种生产是指通过无菌操作，大量培养繁殖菌种的过程。10一、菌种的制作2、菌种生产的主要设备（l）配料设备切片机是将木材切成规格木片的专用机械，是食用菌培养基质粉碎处理的预前工序设备。切片机11一、菌种的制作2、菌种生产的主要设备（l）配料设备粉碎机是将木片、秸秆等原料粉碎成一定粗细度碎屑的专用机械。粉碎机12一、菌种的制作2、菌种生产的主要设备（l）配料设备搅拌机是将培养料通过搅拌使其分布充分均匀的专业机械。其配套动力为3KW，每次拌料量为100KG湿重。搅拌机13一、菌种的制作2、菌种生产的主要设备（l）配料设备装袋机是将搅拌混合均匀后的培养料装入塑料薄膜筒内的机械。装袋机14一、菌种的制作2、菌种生产的主要设备（l）配料设备将培养料装入料瓶的机械。生产上采用的均匀螺旋挤入式装瓶机。装瓶机15一、菌种的制作2、菌种生产的主要设备（2）灭菌设备高压灭菌锅是密闭耐压的金属灭菌容器。其工作原理是在驱尽锅内空气的前提下，通过加热把密闭锅内的水蒸气压力升高，从而使蒸汽温度相应提高到100℃以上。压力在98KPa时，蒸汽温度可达121℃。常见的高压灭菌锅有手提式、立式与卧式，也有自制的高压灭菌锅。手提式主要用于一级种制作，立式和卧式主要用于二级种、三级种和栽培瓶、袋的制作。16一、菌种的制作2、菌种生产的主要设备（2）灭菌设备手提式高压灭菌锅的容积小，适用于试管培养基、三角瓶或平皿、无菌水、少量菌种瓶及一些器皿的灭菌。手提式高压灭菌锅17一、菌种的制作2、菌种生产的主要设备（2）灭菌设备立式高压灭菌锅容量大，可用于菌种瓶、罐头瓶及塑料袋装培养基的灭菌。立式高压灭菌锅18一、菌种的制作2、菌种生产的主要设备（2）灭菌设备卧式高压灭菌锅容量大、盛物多，灭菌彻底，效果好。卧式高压灭菌锅19一、菌种的制作2、菌种生产的主要设备（2）灭菌设备常压灭菌灶是在自然压力下产生100℃蒸汽进行灭菌的炉灶，如土蒸锅。常压灶制作简单，造价低，很受菇农欢迎。常压灭菌灶20一、菌种的制作2、菌种生产的主要设备（3）接种设备无菌室是食用菌生产中无菌操作的环境。无菌室要求严密、清洁。无菌室一般有内外两间，外间较小，作为缓冲间。缓冲间可放置工作服、拖鞋、口罩、消毒用药品等。无菌室门应采用推拉门，内外两间的门应呈对角线安装，以提高隔离缓冲效果。必要时可安装一个双层小型玻璃推拉窗，以便于内外物品传递，减少进出无菌室的次数。21一、菌种的制作2、菌种生产的主要设备（3）接种设备为了在使用之后能排湿、通风，应在室内顶部设置小型排风扇，在室内的侧面底部设置玻璃纤维过滤进气口。无菌室(包括缓冲间)除照明用光源外，还应安装紫外线杀菌灯，吊装在接种操作台的正上方。22一、菌种的制作2、菌种生产的主要设备（3）接种设备超净工作台：是一种局部层流(平行或垂直流)装置，它能在局部造成高洁净度的工作空间；使小房间内的空气经预过滤器和高效过滤器除尘、洁净后，以垂直或水平层流状态通过操作区，因此，可使操作区保持既无尘又无菌的环境。超净工作台23一、菌种的制作2、菌种生产的主要设备（3）接种设备接种箱：是用木材与玻璃制成密闭箱。有单人式或双人对接式。接种箱前后斜面为玻璃窗，便于操作时观察，可开启，以便取放物品。玻璃窗下的木板有一对椭圆形开孔，操作孔装有白布袖套，一端固定在圆孔上，另一端套口用松紧带箍住操作者的手腕·，以防杂菌进入。箱内可安装20W日光灯和30W紫外线灯管。24一、菌种的制作2、菌种生产的主要设备（3）接种设备A、接种针B、接种钩C、接种环D、接种铲E、接种锄F、接种耙G、接种刀H、接种勺I、接种镊25一、菌种的制作2、菌种生产的主要设备（4）培养设备在制作一级种和少量二级种时，可采用电热恒温箱或隔水式电热恒温箱，目的是控制温度，适温培养恒温箱26一、菌种的制作2、菌种生产的主要设备（4）培养设备培养室：是专门用于培养菌种的场所。各级菌种在接种完毕之后，即移人培养室。冬季培养室应有专用加温设备。无论采用何种方法加温，都要注意培养室内空气的相对湿度，一般维持在65％—70％，否则菌瓶失水过多。菌种培养架可用木制，也可用钢材或铝合金材料制成，宽度1—1.5m，有4-6层，层间距0.4-1m.培养室内还需温、湿度计，用于培养室温度、湿度的测量。27一、菌种的制作2、菌种生产的主要设备（5）菌种保藏设备多数菌种要在低温、干燥、隔绝空气等环境中保藏。常用的主要设备是电冰箱、干燥器、真空抽气机等。高温型菌类的菌种需继代保藏，由于要越过寒冷的冬季，常用电热恒温箱.电冰箱28一、菌种的制作3、制种用品及材料(1)药品①基物药品制作母种时常用的药品有琼脂、葡萄糖、蔗糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、蛋白胨、麦芽汁、酵母膏和维生素B1等。原种和栽培种常用药品有石膏粉、碳酸钙、过磷酸钙、蔗糖、红糖、尿素、硫酸铵等。29一、菌种的制作3、制种用品及材料(1)药品②消毒及杀菌药品5％甲醛5％石碳酸0.l％高锰酸钾75％酒精2％～5％漂白粉0.1％升汞1％～2％煤酚皂溶液(又称来苏尔)0.25％新洁而灭30一、菌种的制作3、制种用品及材料(2)配料用具常见的配料用具有搅拌机天平杆秤水泥地水桶铁铲、铝锅、铁锅、搪瓷杯、大烧杯、筐、木箱、塑料箱脸盆废油桶31一、菌种的制作3、制种用品及材料(3)分装及检测用具分装用具有铁架台漏斗试管筐菌种袋(17cmX33cm、14cmX28cm等的聚乙烯或聚丙烯插角、平底袋)试管(18mmXl80mm、20mmX200mm)量杯(100、250、500mL)菌种瓶(750mL、500mL盐水瓶或罐头瓶)培养皿(d＝9cm)三角瓶250mL32一、菌种的制作3、制种用品及材料(3)分装及检测用具检测用具有生物显微镜温度计干湿球温度计pH试纸卡尺33一、菌种的制作3、制种用品及材料(4)分离及其用具常用分离用具钟罩棉花纱布记录本、标签纸、笔尖头镊子酒精灯广口瓶手术剪95％酒精其他用具及材料有：纱布、工作衣、托鞋、口罩、无菌水、颈圈、绳线、回形针、钉书机等。34一、菌种的制作4、菌种培养基的制备（1）培养基(料)的配制原则①选择适宜的营养物质食用菌所需的营养物质，碳源、氮源和矿质元素等，对每一种营养物质的种类和数量要求又有所不同。从母种，原种到栽培种各个阶段的目的和要求不同，所选用的培养基营养成分也应有不同。母种的初生菌丝比较嫩弱，分解养分能力差，因此要求营养丰富、完全，氮源和维生素的比例要高，需选用容易被菌丝吸收利用的物质，如葡萄糖、蔗糖、马铃薯、玉米粉、麦芽汁、酵母膏、蛋白胨、无机盐类和生长素等为原料。原种、栽培种所需培养基数量较多，而且菌丝分解物质能力强，可利用大量农作物秸秆、粪草，锯木屑、棉籽壳、麸皮和米糠等原料作为培养基。35一、菌种的制作4、菌种培养基的制备（1）培养基(料)的配制原则②注意各种营养成分的比例培养基(料)中各种营养物质的比例是影响菌丝生长的重要因素。营养物质比例适当，菌丝生长发育就好，否则就差。应根据不同培养对象的需要，配以适当比例。菌丝生长要求培养基(料)有一定的碳氮比，一般碳氮比(C：N)以20:1为好。如培养基(料)中碳源供应不足时，容易引起菌丝的过早衰老和自溶，如氮源过多或过少时，会引起菌丝的过于旺盛生长或生长缓慢，对菌丝生长造成不良影响。36一、菌种的制作4、菌种培养基的制备（1）培养基(料)的配制原则③调节适宜的酸碱度(pH)培养基(料)需要保持菌丝生长发育所需要的酸碱度，因此配制培养基(料)时，要用氢氧化钠、石灰或过磷酸钙等调节pH值。各种食用菌所需要的pH值不同，培养基(料)的酸碱度也应不同。如猴头菌丝喜欢酸性环境，需调节pH值为4—5;又如草菇菌丝喜碱性环境，需将pH值调为7．5～8。37一、菌种的制作4、菌种培养基的制备（1）培养基(料)的配制原则④选择经济实用的原料制做培养基(料)的原料，有些价格比较贵、成本高，可用一些价格低廉的代用原料。可用一些农副产品代替化学药品，常用的有马铃薯、麦芽，玉米面、麦麸等。在食用菌制种中，原种和栽培种因原料用量较大，选择合适的代用原料，其经济意义就更大。过去多用麦粒和玉米，现在可用锯木屑和棉籽壳等来代替。但是选用代用料时，必须就地取材，来源丰富、价格便宜的原则，而且原料没有毒性。38一、菌种的制作4、菌种培养基的制备（2）培养基的类型培养基的类型①营养来源②物理状态③表面形式④用途天然培养基合成培养基半合成培养基固体培养基液体培养基半固体培养基斜面培养基平面培养基高层培养基母种培养基原种培养基栽培种培养基39一、菌种的制作4、菌种培养基的制备（2）培养基的类型①营养来源天然培养基天然的有机物质配制而成。如农副产品麦麸，米糠，豆饼及许多农作物秸秆等，也有动植物浸出液，如牛肉膏、麦芽汁、豆芽汁及马铃薯汁等。培养基的优点是营养丰富、经济方便，但它的化学成分不能定量，每批成分也不稳定，不宜用作精确的实验。常用的天然培养基有马铃薯培养基、麦芽汁培养基等。40一、菌种的制作4、菌种培养基的制备（2）培养基的类型①营养来源合成培养基用已知成分的化学药品配制而成。培养基的优点：是各种成分简单而清楚，容易控制，适于进行某些定性、定量测定。常用的合成培养基有（高氏一号培养基）、察氏培养基等。41一、菌种的制作4、菌种培养基的制备（2）培养基的类型①营养来源半合成培养基在天然培养基中适当添加一些无机盐类，或者在合成培养基中添加少数天然有机物质配制而成。培养基的优点：是营养全面丰富、宜于控制。常用的有综合马铃薯培养基等。42一、菌种的制作4、菌种培养基的制备（2）培养基的类型②物理状态液体培养基培养基呈液体状态。它含有食用菌菌丝生长发育所需要的各种营养物质。食用菌孢子或菌丝在这种培养基中能够更好地接触和吸收养料，因而菌丝体生长迅速而粗壮，同时这种液体菌种便