克隆动物哺乳动物的核移植始于1969年,但由于哺乳动物卵母细胞很小,胚胎在体内发育,操作和观察不变,因而进展困难。1981年,Illmenser和Hoe把小鼠胚胎内细胞团的细胞核移植到去核的受精卵中,成功的克隆出3只小鼠。1986年,Willadsen等用未分化的胚胎细胞克隆出一只核移植绵羊,1994年,First用发育到晚期阶段的牛胚胎细胞进行克隆成功。以上的研究,同期亦有类似的成功报道,但局限于用胚胎细胞进行克隆研究。1997年,Wilmut等利用成年绵羊的乳腺上皮细胞作为核供体,克隆出1只活绵羊,命名为“多莉”(Dolly),引起了全世界的轰动,因为它是人类科学技术上的一大突破,从成年体细胞克隆哺乳动物在生殖医学、生物技术和治疗某些疾病方面开辟了重要的进取之路。克隆羊——多利世界10年克隆研究之路从“多利”到“斯纳皮”1996年第一只成年体细胞克隆羊“多利”诞生1997年一头用胎盘克隆而成的荷兰牛亮相。1998年两头由母牛细胞克隆而成的小牛在东京出生。一个国际研究小组宣布克隆出了三代实验鼠2000年曾参与克隆“多利”羊的英国公司培育了第一批克隆猪2001年一头稀有品种的克隆亚洲牛诞生,两天后死亡。2002年法国研究人员克隆出兔子2003年美国科学家推出了一匹克隆骡爱荷华州的研究人员称他们克隆出了一头濒临灭绝的爪哇野牛2004年美国加利福尼亚的一家公司培育出了第一只克隆猫。这只猫后来成为第一只被卖出的克隆宠物。2005年韩国科学家宣布他们培育出了首条克隆狗叫“斯纳皮”克隆鼠克隆高产奶牛PPL公司克隆猪克隆猴一、克隆的概念克隆:是指生物体通过体细胞进行的无性生殖以及由无性生殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的群体。二、克隆技术的原理与方法基本原理:是将含有遗传物质的供体细胞核移植到除去细胞核的卵细胞中,利用微电流刺激等方法使二者融为一体,然后促使该新细胞分裂繁殖,发育成胚胎。当胚胎发育到一定程度后再移植到假孕雌性动物的子宫中使之怀孕,孕育成熟并产下与供体细胞基因相同的动物。三、克隆技术的方法(一)、胚胎分割采用硬质玻璃细管,在拉针仪上拉成玻璃细丝,成为胚胎分割刀和在磨针机上加工成适合某种动物的胚胎固定吸管,装在显微操作器的机械手上,即可施行分割或分散胚胎。将分好的半胚或胚胎分裂球装进透明带,再经双层琼脂包埋,在CO2培养箱内(37℃)培养。在培养中,能发育者移植到受体体内,着床妊娠及产仔。(二)、细胞核移植1、胚胎细胞核移植用显微手术的方法分离尚未着床的早期胚胎细胞(分裂球),将其单个细胞导人去除细胞核的未受精的成熟的卵母细胞,经过电融合,让该卵母细胞胞质和导入的胚胎细胞核融合、分裂、发育成胚胎。将该胚胎移植给受体,让其妊娠产仔。2、胚胎干细胞核移植将胚胎或胎儿原始生殖细胞经过抑制分化培养,让其细胞数成倍增多,但细胞不分化,每个细胞仍具有发育成一个个体的能力。3、胎儿成纤维细胞核移植由妊娠早期的胎儿体内分离出胎儿成纤维细胞,进行核移植,克隆出胚胎,经移植给受体,妊娠产仔。4、体细胞核移植将动物体细胞经过抑制培养,使细胞处于休眠状态,进行核移植,克隆出动物个体。人胚胎干细胞分化示意图成体干细胞——替代治疗的新希望胚胎早期发育过程体细胞克隆技术嵌合体小鼠:美美BALB/C-C57胚胎嵌合体小鼠干细胞分化的多潜能性及应用四、动物克隆技术的应用(一)、生物医药方面目前国际上已有公司利用转基因动物生产一些用途广泛且昂贵的药物,如α-1抗胰蛋白酶、血清白蛋白、抗凝血酶等,如果能用无性繁殖技术使这些转基因动物进行繁衍,其经济意义将是不可估量的。此外,还可用体细胞克隆技术培育出乳汁中含有多种有价值的蛋白质或药物的哺乳动物。(二)、医学方面人类细胞系的克隆,可产生单克隆抗体,用来诊断和研究疾病。利用无性繁殖技术,还可培育出为人类器官移植提供来源的特殊动物品种,甚至直接克隆出人体心、肝、肾、耳等组织器官,供临床使用,这样可避免异体器官移植可能出现的排斥反应。(三)、畜牧业方面可以选育遗传性状稳定的良种家畜,不仅省时省力,而且还加快了繁殖速度。(四)、保存物种方面有利于保存和发展具有优良性状的动物品种,挽救濒危珍稀野生动物,维持生态平衡。治疗性克隆谢谢大家!