实时定量PCR仪简明用户手册

ThermoScientific实时定量PCR仪PikoReal®简明用户手册目录1目录目录................................................................................................................................................................1仪器总体介绍.................................................................................................................................................2硬件操作和注意事项......................................................................................................................................4仪器安装连接.............................................................................................................................................4仪器打包运输.............................................................................................................................................4仪器使用注意.............................................................................................................................................5仪器维护.....................................................................................................................................................5单机操作指南.................................................................................................................................................6运行已有程序.............................................................................................................................................6软件安装和操作指南......................................................................................................................................9软件安装.....................................................................................................................................................9连接仪器...................................................................................................................................................10软件简介和设置.......................................................................................................................................11新建和运行程序.......................................................................................................................................13常见程序示例...........................................................................................................................................19板布局.......................................................................................................................................................23结果分析和数据导出................................................................................................................................27绝对定量（标准曲线）的板布局和分析.................................................................................................28相对定量的板布局和分析........................................................................................................................33双探针法等位基因分型的板布局和分析.................................................................................................37高分辨率熔解曲线的板布局和分析.........................................................................................................41仪器总体介绍2仪器总体介绍PikoReal实时定量PCR仪仪器正面：上方为用户界面，下方有U盘插口和抽屉仪器背面：中间有类别标贴（REF代表仪器型号，SN代表序列号），正下方有电源线插口和网线插口用户界面：正下方有仪器名称“PikoReal24”或“PikoReal96”，左上角有上下并列的2个状态指示灯（上灯长时间保持蓝色——空闲待运行，上灯蓝色闪烁——程序运行中，下灯长时间保持红色——仪器出错）仪器总体介绍3PikoReal和计算机通过网线相连。如果您的计算机需要通过网线上网，可以通过USB网线转换器将计算机连接到网络；或者，您可以通过无线路由器和USB无线网卡（台式计算机需要配备，笔记本一般有内置式无线网卡，无需配备）和连接到网络USB网线转换器无线路由器PikoReal安装运行时推荐环境温度+15℃到+25℃，相对湿度不超过50%，高温和潮湿都会影响仪器的性能和实验结果。此外，请保持入风口和出风口的气流通畅。请勿将仪器放在热的表面或实验室桌面的纸上。请勿将纸或其他东西弄到仪器底部，因为这会妨碍气流，甚至会被吸到仪器里面去。出风口和其他物品或墙壁之间保持至少10厘米的距离。请勿让其它仪器的出风口直接对着仪器请定期清理散热片此外，请勿将仪器置于灰尘多、震荡（如台式离心机周围）、强磁场、阳光直晒、穿堂风、过度潮湿或者温度波动大的地方。PikoReal通过专业的软件PikoRealSoftware（最新版2.1）来进行控制，软件安装（详见第9页）后会在桌面生成以下2个图标：左为染料校正软件（主要用于定义新的染料），右为仪器控制软件硬件操作和注意事项4硬件操作和注意事项仪器安装连接1.请先将电源线插入仪器背面的电源插口，再将电源线连接电源，仪器会自动开启并进行自检。2.网线两端分别连接计算机和仪器，网址设置正确。3.点击计算机桌面上的图标，启动软件，软件会自动识别并连接到仪器。一般先开仪器，再开软件。仪器打包运输如长期不使用定量PCR仪，或者需要长途运输，请一定要先执行仪器锁定程序，防止仪器损坏！1.在主菜单中按键选择“TOOLS”，按键进入TOOLS菜单（图1）；在TOOLS菜单中按5次键选择“PARKINSTRUMENT”，按键确认，开始打包仪器（图2），请根据屏幕上的指示进行操作。图1图22.首先等待热盖上升，抽屉打开（图3）；放入一块空板，按键确认（图4）；图3图43.等待抽屉收回，热盖压下，按键确认（图5）；仪器打包完成，按键确认（图6）；图5图64.长按电源开关等仪器关闭，即屏幕变暗后，请从电源插座上拔下电源线，打包完成。硬件操作和注意事项55.请用原包装打包仪器进行运输。仪器使用注意1.请将仪器放置在整洁、干燥的环境中，务必远离水槽和风口。2.请勿堵塞仪器的入风口和出风口。3.仪器配备了一个200w的电源适配器，适配器上的灯绿表示正常运行。仪器正常运行时电源适配器会发热。如果发生电源跳闸，电源适配器的绿灯会灭掉。这时请将电源线从插座上拔下，静置5分钟后再插上。4.PCR板封膜后无需剪膜，如减去板边缘多余的膜可能造成膜上的粘面外翻，粘在热盖上。5.放板后，请确认板左测第一列孔对准放入金属槽左侧第一列孔中，否则可能会因为板顶部不平衡而损坏热盖压力传感器。板孔务必对准金属槽上的孔6.若发生粘板，请勿强行拔出。推上抽屉后运行某个程序（程序开始时热盖温度会上升），热盖温度上升后5-10秒即可停止该程序，按开/关抽屉键退出抽屉，手动把板取出。仪器维护1.使用完毕，请关闭电源，从电源插座中拔下电源线。2.仪器表面：用湿的软布或者纸巾擦拭外表面。3.金属槽：用棉球蘸水，95%乙醇或者100倍稀释的漂白剂擦拭样品槽孔。4.散热片：变脏或者积灰时，用棉签，刷子或压缩空气除尘。单机操作指南6单机操作指南运行已有程序1.在主菜单选择RUN，按键确认。2.请选择您要运行的程序所在的文件夹，按键确认。RECENT文件夹储存仪器上最近运行的六个程序；SHARED文件夹是共享文件夹，任何用户都可以从中储存和调用程序。用户也可以自定义文件夹。如果仪器上插入U盘，会自动显示USB文件夹。请注意，仪器只能识别U盘中文件名不超过8个英文字符，且后缀名为.ptp的程序文件。3.文件夹里的所有程序都会被显示，请选择您要运行的程序，按键确认。程序默认以图形模式GRAHICAL显示，如需更改为列表显示模式，请按键选择LIST，按键确认。如需浏览程序，请通过或键选择LEFT或RIGHT，按键向左或向右浏览。4.确认程序无误后，选择START键，请按键选择开始运行程序。5.【96孔的PikoReal96请跳过此步】如果您