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1(时间：90分钟，满分：100分)一、选择题(本题共20小题，每小题2.5分，满分50分)1．自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是()A．碳源B．氮源C．无机盐D．生长因子解析：选A。自养微生物能够利用二氧化碳和水生成有机物，不利用现成的含碳有机物；而异氧型微生物只能利用现成的含碳有机物，所以它们的主要区别是碳源不同。2．酵母菌培养液常含有一定浓度的葡萄糖，但当葡萄糖浓度过高时，反而抑制微生物的生长，原因是()A．碳源供应太充足B．葡萄糖不是酵母菌的原料C．改变了酵母菌培养液的pHD．细胞会发生质壁分离解析：选D。当培养基中葡萄糖的浓度升高时，会导致培养液的渗透压升高，从而导致细胞发生质壁分离。3．下列关于细菌的叙述，错误的是()A．硝化细菌能以NH3作为氮源和能源物质B．某些细菌可以利用光能固定CO2合成有机物C．生长因子是某些细菌生长过程中需要额外补充的营养物质D．含伊红和美蓝试剂的培养基不能用来鉴别牛奶中的大肠杆菌解析：选D。某些细菌如蓝细菌(蓝藻)、光合细菌以及红螺菌都能进行光合作用。生长因子是指微生物生长不可缺少的微量有机物，主要包括维生素、氨基酸和碱基等。而微生物的营养物质包括水、无机盐、碳源、氮源和生长因子，它们都是从外界获得补充的。常用的伊红美蓝乳糖培养基，可用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌，如果有大肠杆菌，则菌落呈黑色。4．关于灭菌和消毒的下列说法不．正确的是()A．灭菌是指杀死环境中的所有微生物，包括芽孢和孢子B．灭菌和消毒实质上是相同的C．接种环用灼烧法灭菌D．常用的灭菌方法有加热法、过滤法、紫外线法、化学药品法解析：选B。灭菌与消毒是两个概念。灭菌是指杀灭一定环境中的所有微生物，包括芽孢和孢子。根据不同的材料选用不同的灭菌方法，如接种环用火焰烧灼法，培养基用高压蒸汽灭菌法等。消毒是指杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)，使用的是较为温和的物理或化学方法。5．培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次是()①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A．⑤③②①④⑥B．①②③④⑤⑥C．⑥②③④①⑤D．③④②①⑥⑤解析：选A。培养基用高压蒸汽灭菌法；培养皿能耐高温，用干热灭菌法；接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底灭菌的效果；实验操作者的双手可用化学试剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；为不破坏其营养成分，牛奶可采用巴氏消毒法。6．牛肉膏蛋白胨培养基中加入琼脂这一理想的凝固剂，下列关于琼脂的说法不．正确的是()A．不被所培养的微生物分解利用，对所培养的微生物无毒害作用B．在微生物生长温度范围内保持固体状态2C．琼脂凝固点低，利于微生物的生长D．琼脂在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强解析：选C。本题考查琼脂在培养基中的作用。在液体培养基中加入凝固剂如琼脂后，制成琼脂固体培养基，它是实验室中最常用的培养基之一，固体培养基中可形成肉眼可见的单个细胞繁殖而来的子细胞群体，即菌落，用于微生物的分离、计数和菌种鉴定等。琼脂作为一种理想的凝固剂，是其性质决定的，琼脂不会被微生物利用且对微生物无毒害作用，在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强。琼脂在98℃以上可溶解于水，在45℃以下凝固，所以在微生物生长温度范围内保持固体状态。7．下表表示在不同培养基中细菌的生长繁殖情况(E、F、G、H、I、J、K、M为培养基的成分，“＋”表示生长，“－”表示不生长)。请分析细菌不．能合成下列哪种物质()培养基成分A、BCA、B、CI、MA、B、CH、KA、B、CM、JA、B、CI、KA、B、CH、JA、B、CK、M生长状态－－＋－＋－＋A.HB．IC．KD．M解析：选C。从能进行细菌培养的三组培养基中看出，它们共同含有K，且其他不能进行细菌培养的都不含K，故所培养的细菌不能合成K。8．测定土壤中不同微生物的数量，要选用不同倍数的稀释液进行平板培养，请选出培养细菌时所用的稀释倍数()①10②102③103④104⑤105⑥106A．①②③B．②③④C．③④⑤D．④⑤⑥解析：选D。土壤中细菌的数量非常多，一般选取的稀释倍数比较高。9．通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上，大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素，可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%的酚，可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法不．能从混杂的微生物群体中分别分离出()A．大肠杆菌B．霉菌C．放线菌D．圆褐固氮菌解析：选A。固氮细菌的生长不需要从培养基中获得氮源，可在缺乏氮源的培养基上正常生长，因此可分离出圆褐固氮菌；在加入青霉素的培养基上不能生长细菌和放线菌，可分离出霉菌；在加入10%的酚的培养基中，因该培养基能抑制细菌和霉菌的生长，所以可分离出放线菌。利用上述三种培养基无法分离出大肠杆菌。10．在101、102、103倍稀释液中的平均菌落数为2760、295和46，则菌落总数(个/mL)为()A．2.76×105B．2.95×105C．4.6×105D．3.775×105解析：选D。本题考查菌落计数法测定微生物的数目的方法。注意是计算不同稀释度的平均菌落数。首先选择平均菌落数在30～300之间的，当只有一个稀释倍数的平均菌落数符合此范围时，则以该平均菌落数除以涂布平板时所用稀释液体积(0.1mL)，再乘以稀释倍数作为该样品的细菌总数；若有两个稀释倍数的平均菌落数均在30～300之间，则按两者菌落总数之比值来决定，若比值小于2应采取两者的平均数，若大于2，则取其中较小的菌落总数。本题295、46在30～300之间，46×103与295×102比值为1.6，应取二者的平均数进行计算。11．用稀释涂布平板法来统计某土壤样品中活菌的数目。在某稀释浓度下某同学做了若干个平板并统计每个平板的菌落数，最接近样品中菌体数真实值的是()A．菌落数量最多的平板B．菌落数量最少的平板3C．菌落数量适中的平板D．若干个平板菌落数量的平均值答案：C12．在一个“淀粉—琼脂”培养基的5个圆点位置，分别用不同方法处理，将此实验装置放在37℃恒温箱中，保温处理24h后，将碘液滴在培养基的5个圆点上，其实验结果记录于下表：淀粉圆点实验处理方法碘液处理后的颜色反应①新鲜唾液与盐酸混合蓝黑色②经过煮沸的新鲜唾液蓝黑色③接种面包霉棕黄色④只有新鲜的唾液？⑤只有一定浓度的蔗糖溶液？请指出④和⑤所发生的颜色反应，以及③接种的面包霉的分泌物分别是()A．棕黄色、棕黄色、淀粉酶B．蓝黑色、棕黄色、麦芽糖酶C．棕黄色、蓝黑色、淀粉酶D．棕黄色、蓝黑色、麦芽糖酶解析：选C。唾液中含唾液淀粉酶，在适宜条件下可将淀粉分解。唾液淀粉酶的最适pH为中性，最适温度为37℃，故新鲜唾液与盐酸混合或煮沸后，唾液淀粉酶将失去活性，不能分解淀粉，淀粉遇碘呈蓝黑色。实验装置中，④中含唾液淀粉酶且有活性，可将淀粉分解，加碘液，呈棕黄色，③中加碘液后呈棕黄色，故面包霉能分泌淀粉酶。⑤中加一定浓度的蔗糖溶液，不影响淀粉与碘液反应，呈蓝黑色。13．下列操作不．属于微生物的分离步骤的是()A．稀释B．划线或涂布C．接斜面D．培养解析：选C。土壤中微生物分离的步骤是：土壤取样—样本稀释—微生物培养和观察等，其中微生物分离过程主要在于接种阶段，通过平板划线法或者稀释涂布平板法，使得微生物充分稀释和分离，从而使得平板上生长的一个菌落来源于单个的细菌，这样就达到了从土壤中分离微生物的目的。接斜面是在试管中扩大细菌数量或者短时间保存菌种的方法，不属于分离细菌的过程。14．下列关于纤维素的叙述中，不．正确的是()A．纤维素是由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物B．纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，是因为这些微生物能产生纤维素酶C．植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素D．自然界中的各种生物均能把纤维素分解成葡萄糖，从而作为生物体的能量来源答案：D15．下列关于纤维素酶的说法，错误的是()A．纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种组分B．纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C．纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D．葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖解析：选D。纤维素酶是一种可以把纤维素分解为葡萄糖的酶，它是一种复合酶，至少包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三种组分，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。所以D项错。16．用刚果红染色时，加入刚果红应在()(1)制备培养基时(2)梯度稀释时(3)倒平板时(4)涂布时(5)长出菌落时A．(1)(3)B．(2)(5)C．(3)(5)D．(4)(5)4解析：选C。刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。所以加入刚果红的方法有两种，一是在菌落长出来后，二是在倒平板时，都可以达到鉴别和分离菌落的目的。17．生活在反刍动物胃内的纤维素分解菌，其新陈代谢类型为()A．自养需氧型B．异养厌氧型C．异养需氧型D．自养厌氧型解析：选B。本题考查的是微生物的代谢类型，因为牛的胃中是缺氧的环境，因此能够在此生存的微生物应该是厌氧的，而这些微生物能够利用牛胃中的有机养料纤维素作为其营养物质，所以属于异养生物。18．两种刚果红染色法的结果是()A．均会出现透明圈B．均不会出现透明圈C．方法一出现，方法二不出现D．方法一不出现，方法二出现答案：A19．配制的培养基成分是：纤维素粉、NaNO3、Na2HPO4·7H2O、KH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、酵母膏、水解酪素，该培养基能使下面哪种微生物大量繁殖()A．酵母菌B．自生固氮菌C．各种细菌D．纤维素分解菌解析：选D。该培养基的有机营养成分里面含碳的营养物质是纤维素，不能分解利用纤维素的微生物不能在该培养基上生长，所以属于选择培养基。20．在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是()A．分解尿素的细菌B．硝化细菌C．分解纤维素的细菌D．乳酸菌解析：选C。分解纤维素的细菌能将纤维素分解，刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。二、非选择题(本题共4小题，满分50分)21．(12分)下表为牛肉膏、蛋白胨培养基的成分列表，据此回答：成分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量0.5g1g0.5g100mL(1)蛋白胨在培养基中的作用是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)要用此材料配制观察细菌菌落状况的培养基，还需添加的成分是__________。(3)表中各成分含量确定的原则是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)培养基配制好后，分装前应进行的工作是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)从配制培养基到培养完成，所采用的预防杂菌感染的方法是________________________________________________________________________________________________________________________