大专《药物分析》教案

教案（大专）药物分析药学教研室肖东第一章概论组织教学1.掌握药品质量标准、中国药典、药品检验程序2.熟悉药物分析的性质及任务、药物分析统计学知识引入新课第一节中国药典一、基本概念1.药物分析：研究化学结构明确的合成药物或天然药物及其制剂的质量控制方法，也研究中药制剂和生物制品及其制剂有代表性的质量控制方法。2.药品非临床研究质量管理规定GLP；药品临床试验质量管理规范GCP药品生产3.质量管理规范GMP；药品经营质量管理规范GSP；中药材生产质量管理规范GAP人用药品注册技术要求国际协调委员会ICH4.药品标准的内涵包括：真伪鉴别、纯度检查和品质要求。决定了药品的安全性、5.有效性和质量可控性。、精确度药典规定取样量的准确度和试验精密度。6.药典：记载药品质量标准的法典；国家监督、管理药品的技术标准；法律约束力。各国药典现行版本：ChO2010,EP7,USP34,JP16二、中国药典：1953,63,77,85,90,95,00,05,10。ChP2010由一部、二部、三部及其增补本组成。（一部）药材和饮片、植物油脂和提取物、成方制剂和单味制剂（二部）化学药品、生化药品、抗生素、放射性药品、药用辅料；（三部）生物制品内容分为:凡例、正文、附录正文每一品种项含：⑴品名（包括中文名，汉语拼音名与英文名）⑵有机药物的结构式；⑶分子式与分子量；⑷来源或有机药物的化学名称；⑸含量或效价规定⑹处方；⑺制法；⑻性状；⑼鉴别；⑽检查；⑾含量或效价测定；⑿类别；⒀规格；⒁贮藏；⒂制剂三、质量标准术语：1.凡例：为正确使用中国药典进行药品质量检定的基本原则。是对中国药典正文、附录及与质量检定有关的共性问题的统一规定。2.正文:（药品标准）根据药物自身的理化与生物学特性，按照批准的来源、处方、生产工艺、贮藏运输条件等所制定的、用于检测药品质量是否达到用药要求并衡量其质量是否均一稳定的技术规定。3.附录：包括制剂通则、通用检测方法和指导原则。1药品名称：列入国家药品标准的药品名称-称为药品通用名称-不得作为药品商标使用。INN-国际非专利药名。药品中文名称：须按照《中国药品通用名称》(ChinaApprovedDrugNames，CADN)。2.制法：对药品生产制备的重要工艺和质量管理的要求。3性状：外观性状、溶解度、物理常数：熔点、旋光度、吸收系数等可反映药品纯度。4鉴别：根据药物的某些物理、化学或生物学特性进行的试验，以判定5min15min10min30min药物的真伪。区分药物类别-一般鉴别试验；证实具体药物-专属鉴别试验。5检查：是对药物的安全性、有效性、均一性和纯度四个方面的状态所进行的试验分析6含量测定：方法：化学原料药-首选容量分析法、制剂-首选色谱法7制剂规格：系指每一支、片或其他每一个制剂单位含有主药的重量（或效价）或含量（%）或装量，即制剂的标示量。8检查方法和限度：原料药的含量-按重量计，制剂的含量限度-指标示量的百分含量表示时，范围95.0%-105.0%9标准物质：标准品：用于生物检定、抗生素或生化药品中含量或效价测定的标准物质，按效价单位(或μg)计，以国际标准品进行标定.对照品：化学药品标准物质，按干燥品计算后使用。对照药材对照提取物-中药检验。参考品-生物制品10精确度（1）称重和量取：由有效位数确定：0.1g—可称取0.06~0.14g；2g—1.5~2.5；2.0—1.95~2.05；2.00—1.995~2.005。精密称定-准确至所取重量的千分之一；称定-百分之一；精密量取-移液管的精度要求；量取-量筒；约-不得超过规定量的10%；恒重-连续2次重量差小于0.3mg。空白试验-不加供试品或等量溶剂替代供试液四、药品标准制定的原则：科学性、先进性、规范性、权威性原料药的结构确证：1样品要求：纯度99.0%，杂质0.5%。2结构确证方案：一般项目：有机光谱分析法：原子发射光谱法（AES）、原子吸收分光光度法—含金属药物中无机元素测定；质谱-多肽；单糖-纸、薄层、HPLC、色质连用；得意他办公-凝胶色谱；手性-单晶X射线四圆衍射仪；晶型-粉末X-衍射、IR、熔点、热分析稳定性试验：影响因素试验、加速试验、长期试验药品检验工作的基本程序：药品检验工作的基本程序一般分为取样、鉴别、检查、含量测定、写出检验报告药品取样的基本原则：均匀、合理第二章药物的鉴别试验一、鉴别试验的内涵：1、根据药物分子结构、理化性质，采用化学、物理化学或生物化学方法来判断药物真伪.2、中国药典和世界各国药典所收载的药品项下的鉴别实验方法均为用来证实贮藏在标有标签容器中的药物是否为所标示的药物而不是对未知物进行定性分析.3、方法应为专属，每个品种一般2~3次二、一般鉴别试验1、有机氟化物：氧瓶燃烧法—碱性溶液吸收无机F—pH4.3茜素氟蓝、硫酸铈—蓝紫色络合物2、有机酸盐：①水杨酸杨：FeCl3，紫色②酒石酸盐：氨制硝酸银—水浴—内壁银镜3、芳香胺类：NaNO—β萘酚(重氮化-偶合)5min20min4、托烷生物碱类：发烟硝酸—水浴—蒸干—残渣醇溶—KOH一粒—深紫色（Vitali）5、焰色反应：钠-鲜黄；钙—砖红；钡—黄绿，绿色玻璃中蓝色6、铵盐：NaOH加热—氨臭7、硝酸盐：硫酸+铜丝—加热—红棕色气体三、药物鉴别方法：①化学法：要求反应迅速，现象明显.包括显色、沉淀、荧光、气体生成、试剂褪色、熔点测定.⑦光谱法：紫外光谱(测定λmax或同时测定λmin；规定一定浓度供试液在λmax处的A；规定λ和E；规定λ1/λ2；经化学处理后测定产物的吸收光谱特征)；红外光谱(专属性强，应用广)③色谱：1.薄层色谱TLC：定性参数为RP值；不同类药物不能互相干扰；应确证TLC的专属性.2.HPLC：要求供试品和对照品色谱峰保留时间一致.④射线粉末衍射法⑤生物学法：微生物或动物实验鉴别的方法.○6指纹图谱与特征图谱鉴别法⑦显微鉴别法鉴别试验一般需要对方法的专属性和耐用性进行验证小结：作业：补充的练习题5min第三章药物的杂质检查组织教学1.掌握药物的纯度要求2.掌握杂质的检查方法3.掌握氯化物、硫酸盐、铁盐、金属检查、砷盐检查、酸碱度检查复习旧课引入新课第一节概述一、杂质：Chp将任何影响药品纯度的物质均称为杂质。二、来源：1生产过程引入；2贮藏过程中受外界条件影响，引起药物理化特性变化而产生。三、分类：按来源分类1一般杂质(生产和贮藏过程中容易引入的杂质)2特殊杂质：特定药物的生产和贮藏过程中引入的杂质，也常称为有关物质，这类杂质随药物的不同而不同。四、杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量。杂质限量=杂质最大允许量/供试品量×100%杂质控制方法：1限量检查法：通常不需要测定准确含量，只检查杂质是否超过限量。（1）对照法：杂志限量(%)=标液浓度*标液体积/供试品量*100%。（2）灵敏度法：在供试品溶液加入一定量试剂，在一定条件下不得有正反应出现（3）比较法：取一定量供试品依法检查，测定特定待检杂志参数与规定限量比较三、杂质的检查方法：1化学方法：（1）显色反应检查法（2）沉淀反应检查法（3）生成气体检查法（4）滴定法2色谱方法：TLC、HPLC、GC，杂质对照品法、供试品自身稀释对照法。TLC,要求主斑点颜色不得更深。3光谱法：紫外-可见、红外、原子吸收分光光度法（用于金属杂质检查）4其他方法：（1）热分析法：热分析：是在程序控制温度下，精确记录物质的物理化学性质随温度变化的关系，研究物质在受热过程中所发生的晶形转化、熔融、蒸发、脱评价药品水等物理变化，或热分解、氧化、还原等化学变化，以及伴随发生的温度、能量、或重量改变的方法a.差热分析(DTA)：在程序控制温度下测量试样与参比物之间温度差ΛT与温度关系的一种技术b.差示扫描量热法(DSC)：在程序控制温度下测量传输给待测物质和参比物的能量差与温度(或时间)关系的一种技术.c.热重分析法(TGA)：应用热天平在程序控制温度的条件下测量物质的质量随温度变化，纪录变化曲线(热重曲线)从而准确测量变化和变化速度.（2）酸碱度检查法（3）物理性状检查法：第二节一般杂质检查一般杂质检查：检查内容：氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、干燥失重、水分、易炭化物、残留溶剂、溶液颜色、溶液澄清度。检查无5min25min机杂质对评价药品生产工艺状况有重要意义。一、氯化物检查法：1.原理：药物中微量氯化物在硝酸酸性条件下与AgNO3反应，生成AgCl胶体微粒而显白色浑浊，与一定量标准NaCl溶液在相同条件下反应产生的AgCl浑浊程度比较不得更深。2方法：样品溶解/标准氯化钠溶液(10μgCl/ml)，50mL纳氏比色管，+稀HNO310mL+水至40mL+AgNO3试液1.0mL+水至50mL,暗处放置5min，比较.(氯化物浓度以50mL中含50～80μg的Cl为宜)加稀酸排除硝酸银盐干扰。3.注意事项：(1)比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察(2)平行操作原则(3)供试品溶液如带颜色，可采用内消色法(倍量法)；外消色法：如KMnO4中氧化物的检查，可先和乙醇适量还原后再依法检查二、硫酸盐检查方法：在稀盐酸酸性条件下与氯化钡反应，与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件下产生的硫酸钡浑浊程度比较。铁盐检查法：铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸盐作用生成红色可溶性的硫氰酸铁配离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后进行比色。三、重金属(铅)检查法：重金属概念：重金属是指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质。以铅限量表示重金属的限度。第一法：硫代乙酰胺法。适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物。原理：硫代乙酰胺在弱酸性条件下水解，产生硫化氢，与重金属离子生成黄色到棕黑色的硫化物混悬液，与一定量标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较，判定供试品中重金属是否符合限量规定。第二法:炽灼后的硫代乙酰胺法含芳环、杂环以及难溶于水、稀酸及乙醇的有机药物第三法：硫化钠法适用于溶于碱性水溶液而难溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀的药物四、砷盐检查法：古蔡氏法：原理：金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中微量砷盐反应生成具有挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液所生成的砷斑比较，颜色不得更深。试验中醋酸铅棉花作用：用来吸收锌粒或供试品可能产生的硫化氢气体。注意事项：1.供试品为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等在酸性溶液中生成HS2或SO2，与溴化汞生成黑色硫化汞或金属汞，干扰砷斑检测。应先加硝酸使氧化成硫酸盐；2供试品为铁盐，消耗还原剂，先加酸性氯化亚锡试液使高铁离子还原为低铁离子；3环状结构的有机药物要先进行有机破坏(碱和酸)；4.含锑药物，锑化氢干扰砷盐的检出(SbH3+HgBr2→SbH2(HgBr)+HBr)，改用白田道夫(Betterdorff)法五、二乙基二硫代氨基甲酸银法：原理：金属锌与酸作用产生新生态氢，与微量砷盐反应生成具有挥发性的砷，还原二乙基二硫代氨基甲酸银，产生红色胶态银，同时在相同条件下使一定量标准砷溶液呈色，用目视比色法或在510nm波长处测定吸光度进行比较。40min六、干燥失重测定法：主要检查药物中的水分及其他挥发性成分。干燥失重的量应恒重。干燥至恒重的第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1小时后进行.1常压恒温干燥法：适用于对热稳定的药物，如：乌苯美司，卡巴胆碱，尼莫地平.需在105℃下干燥至恒重.2(恒温)减压干燥法：适用于熔点低或受热易分解的供试品，常用干燥剂为：无水氯化钙、硅胶、五氧化二磷.3.干燥剂干燥法：适用于受热分解或生化的药物，常用硅胶、硫酸和五氧化二磷等七、炽灼残渣：指有机药物经炭化或挥发性无机药物加热分解后，高温炽灼所产生的非挥发性无机杂质的硫酸盐。残留溶剂测定法分类：1有机溶媒毒性大，且具有致癌作用并对环境有害尽量避免使用；2有机溶媒对人有一定毒性应限量使用；3有机溶媒对人健康危险性小推荐使用；4对人或环境无足够数据证明有危害，应根据生产工艺特点制定相应限度，使其满足各种相应质量要求.；第四章体内药物分析一、血样中蛋白质的去除：①加入与水