钙盐染色试剂盒(Von-Kossa硝酸银法)使用说明

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钙盐染色试剂盒(VonKossa硝酸银法)使用说明货号:G3282有效期:6个月产品内容:名称规格保存试剂(A):VonKossa硝酸银溶液50ml4℃避光试剂(B):海波溶液50mlRT试剂(C):VonKossa对照液10ml4℃产品说明:钙在人体内大量存在,构成骨骼作为支持人体的支架,在分泌、运送、肌肉收缩、神经传导等也起重要作用。许多染料可以于钙形成螯合物,包括茜素红S、红紫素、核固红等。茜素红S属一种蒽醌类衍生物,是茜素磺酸钠盐,它能与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物。钙盐染色常用方法有硝酸银法和茜素红S法,钙盐染色试剂盒(VonKossa硝酸银法)原理在于该法是一种金属置换法,硝酸银溶液作用于含有不溶性钙盐的切片时,钙被银所置换,银盐在光的作用下被还原为黑色金属银,适用于大量样本的钙盐组织染色。操作步骤(仅供参考):1、组织固定于10%中性福尔马林,常规脱水包埋。2、切片厚度5μm,常规脱蜡至水。3、蒸馏水洗1min。4、切片入VonKossa硝酸银溶液强光照射15-60min。5、蒸馏水洗1min。、入海波溶液处理2min。7、HE染色液或VanGieson复染细胞核。8、常规脱水透明,中性树胶封固。阴性对照(可选):取另外一张连续切片脱蜡至水,置于VonKossa对照液处理20min,流水冲洗5min.与实验片一同入VonKossa硝酸银溶液,其余步骤同上。染色结果:钙盐黑褐色至深黑色细胞核根据复染液不同而不同背景红色注意事项:1.钙盐组织固定以中性福尔马林为佳。2.作用时间取决于阳光照射时光的强度和时间。3.若暴露于紫外灯下,则应缩短照射时间,一般5-10min即可。4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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