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1第一篇微生物学基础第一章非细胞结构的超微生物——病毒1病毒是一类什么样的微生物？它有什么特点？答：病毒没有合成蛋白质的机构——核糖体，也没有合成细胞物质和繁殖所必备的酶系统，不具独立的代谢能力，必须专性寄宿在活的敏感宿主细胞内，依靠宿主细胞合成病毒的化学组成和繁殖新个体。其特点是：病毒在活的敏感宿主细胞内是具有生命的超微生物，然而，在宿主体外却呈现不具生命特征的大分子物质，但仍保留感染宿主的潜在能力，一旦重新进入活的宿主细胞内又具有生命特征，重新感染新宿主。2病毒的分类依据是什么？分为哪几类病毒？答：依据是：病毒是根据病毒的宿主、所致疾病、核酸的类型、病毒粒子的大小、病毒的结构、有或无被膜等进行分类的。根据转性宿主分类：有动物病毒、植物病毒、细菌病毒（噬菌体）、放线菌病毒（噬放线菌体）、藻类病毒（噬藻体）、真菌病毒（噬真菌体）。按核酸分类：有DNA病毒和RNA病毒。3病毒具有什么样的化学组成和结构？答：病毒的化学组成有蛋白质和核酸。还含有脂质和多糖。整个病毒体分两部分：蛋白质衣壳和核酸内芯，两者构成核衣壳。蛋白质衣壳是由一定数量的衣壳粒按一定的排列组合构成的病毒外壳。核酸内芯有两种：核糖核酸（RNA）和脱氧核糖核酸（DNA）。4叙述大肠杆菌T系噬菌体的繁殖过程。答：大肠杆菌T系噬菌体的繁殖过程有：吸附、侵入、复制、聚集与释放。首先，大肠杆菌T系噬菌体以它的尾部末端吸附到敏感细胞表面上某一特定的化学成分，或是细胞壁，或是鞭毛，或是纤毛。噬菌体侵入宿主细胞后，立即引起宿主的代谢改变，宿主细胞内的核酸不能按自身的遗传特性复制和合成蛋白质，而由噬菌体核酸所携带的遗传信息所控制，借用宿主细胞的合成机构复制核酸，进而合成噬菌体蛋白质，核酸和蛋白质聚集合成新的噬菌体，这个过程叫装配。大肠杆菌T系噬菌体的装配过程如下：先合成含DNA的头部，然后合成尾部的尾鞘、尾髓和尾丝，并逐个加上去就装配成一个完整的新的大肠杆菌T系噬菌体。噬菌体粒子成熟后，噬菌体的水解酶水解宿主细胞壁而使宿主细胞破裂，使菌体被释放出来重新感染新的宿主细胞一个宿主细胞可释放10到1000个噬菌体粒子。5什么叫毒性噬菌体？什么叫温和噬菌体？答：侵入宿主细胞后，随即引起宿主细胞裂解的噬菌体称作毒性噬菌体。侵入宿主细胞后，不引起宿主细胞裂解的噬菌体称作温和噬菌体。6什么叫溶原细胞（菌）？什么叫原噬菌体？答：含有温和噬菌体核酸的宿主细胞被称作溶原细胞。在溶原细胞内的温和噬菌体核酸，称为原噬菌体。7解释EscherichiacoliK12（λ）中的各词的含义。答：该词为大肠杆菌溶原性噬菌体的全称。Escherichia为大肠杆菌的属名，coli为大肠杆菌的名种，K12是大肠杆菌的株名，括弧内的λ为溶原性噬菌体。28病毒（噬菌体）在固体培养基上有什么样的培养特征?答：将噬菌体的敏感细菌接种在琼脂固体培养基上生长形成多个菌落，当接种适度的噬菌体悬液后引起点性感染，再感染点上进行反复的感染过程，宿主细胞菌落就一个个被裂解成一个个空斑，这些空斑就叫噬菌斑。10什么叫噬菌斑？什么是PFU？答：将噬菌体的敏感细菌接种在琼脂固体培养基上生长形成多个菌落，当接种适度的噬菌体悬液后引起点性感染，再感染点上进行反复的感染过程，宿主细胞菌落就一个个被裂解成一个个空斑，这些空斑就叫噬菌斑。PFU就是病毒空斑单位，空斑就是原代或传代单层细胞被病毒感染后，一个个细胞被病毒蚀空形成的空斑。一个空斑表示一个病毒。所以，通过病毒空斑单位的计数可知单位体积中含病毒数。第二章原核微生物1细菌有哪几种形态?各举一种细菌为代表。答：1球菌：金黄色葡萄球菌2杆菌：芽孢杆菌3螺旋菌：弧菌4丝状菌：铁丝菌2细菌有哪些一般结构和特殊结构？它们各有哪些生理功能？答：细菌是单细胞生物。所有细菌均有：细胞壁、细胞质膜、细胞质及其内含物、细胞核物质。部分细菌有特殊结构：芽孢、鞭毛、荚膜、粘液层、菌胶团、衣鞘及光合作用片层等。细胞壁是包围在细菌体表面最外层的、具有坚韧而带有弹性的薄膜。可以起到：①保护原生质体免受渗透压引起破裂的作用。②维持细菌的细胞形态。③细胞壁是多孔结构的分子筛，阻挡某些分子进入和保留蛋白质在间质（格兰氏阴性菌细胞壁和细胞质之间的区域）④细胞壁为鞭毛提供指点，使鞭毛运动。细胞质膜的生理功能有：①维持渗透压的梯度和溶液的转移。②细胞质膜上有合成细胞壁和形成横膈膜组分的酶，故在膜的外表面合成细胞壁③膜内陷形成的中间体含有细胞色素，参与呼吸作用。④细胞质膜上有琥珀酸脱氢酶、NADH脱氢酶、细胞色素氧化酶、电子传递系统、氧化磷酸化酶及腺苷三磷酸酶。在细胞上进行物质代谢和能量代谢。⑤细胞质膜上有鞭毛基粒，鞭毛由此长出，即为鞭毛提供附着点。荚膜的主要功能有：①具有荚膜的S-型肺炎链球菌毒性强，有助于肺炎链球菌侵入人体。②荚膜可保护致病菌免受宿主吞噬细胞的吞噬，保护细菌免受干燥的影响。③当缺乏营养时，假膜可被用作碳源和能源，有的荚膜还能做氮源。④废水生物处理中细菌的荚膜有生物吸附作用，再爆气池中因爆气搅动和水的冲击力容易把细菌粘液冲刷入水中，以增加水中有机物，它可被其他微生物利用。3革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞壁结构有什么异同？各有哪些化学组成？答：革兰氏阳性菌细胞壁厚约20-80nm，结构较简单，含肽聚糖，革兰氏阴性菌细胞壁厚约10nm，结构复杂，分外壁层和内壁层，外壁层又分三层：最外层是脂多糖，中间是磷脂层，内层是脂蛋白。内壁含肽聚糖，不含磷壁酸。化学组成：革兰氏阳性菌含大量肽聚糖，含独磷壁酸，不含脂多糖。革兰氏阴性菌含极少肽聚糖，含独脂多糖，不含磷酸壁。7在pH为6、pH为7、pH为7.5的溶液中细菌各带有什么电荷？在pH为1.5溶液中细菌代有什么电荷？为什么?答：在pH为6、pH为7、pH为7.5的溶液中细菌带负电荷。在pH为1.5溶液中细菌带正电荷。3因为细菌的等电点为pH为2-5。若培养液的pH比细菌等电点高，细菌的游离氨基电离受抑制，游离羧基电离，细菌带负电。若培养液的pH比细菌等电点低，细菌的游离羧基电离受抑制，游离氨基电离，细菌带正电。8叙述革兰氏染色的机制和步骤。答：机制：①革兰氏染色与细菌等电点有关②革兰氏染色与细胞壁有关步骤：1在无菌操作条件下，用接种环挑取少量细菌于干净载玻片上涂布均匀，固定。2用草酸结晶紫染液1分钟，水洗。3用碘-碘化钾媒染1分钟，水洗。4用中性脱色剂（如乙醇）脱色，革兰氏阳性菌不褪色仍呈紫色，格兰仕阴性菌褪色，呈无色。5用蕃红染液复染1分钟，革兰氏阳性菌仍呈紫色，格兰仕阴性菌呈红色。革兰氏阳性菌与格兰仕阴性菌及被区别开来9何谓细菌菌落？细菌有哪些培养特征？这些培养特征有哪些实践意义？答：细菌菌落就是由一个细菌繁殖起来由无数细菌组成具有一定形态特征的细菌集团。细菌培养特征：1在固体培养基上的培养特征:菌落特征。2在明胶培养基中的培养特征：能产生明胶水解酶水解明胶，不同的细菌将明胶水解成不同的溶菌区。3在半固体培养基中的培养特征：细菌可呈现各种生长状态，根据细菌的生长状态判断细菌的呼吸类型和鞭毛有无。4在液体培养基中的培养特征：在液体培养基中，细菌整个个体与培养基接触，可以自由扩散生长。10可用什么培养技术判断细菌的呼吸类型和能否运动？如何判断？答：细菌在半固体培养基中培养：细菌可呈现各种生长状态，根据细菌的生长状态判断细菌的呼吸类型、鞭毛有无以及能否运动。如果细菌在培养基的表面以穿刺线的上部生长者为好氧细菌。沿着穿刺线自上而下生长者为兼性厌氧菌或兼性好氧菌。如果只沿着穿刺线生长没有鞭毛，不运动的细菌；如果不沿着穿刺线生长而且穿透培养基扩散生长者为有鞭毛。运动的细菌。11何谓放线菌？革兰氏染色是何种反应？答:在固体培养基上呈辐射状生长的菌种，成为放线菌。除枝动菌属革兰氏阴性菌，革兰氏染色呈红色外，其余全部放线菌均为革兰氏阳性菌，革兰氏染色呈紫色。第四章微生物的生理8.微生物需要那些营养物质？供给营养时应注意些什么？为什么？答：(1)水;(2)碳源和能源;(3)氮源;(4)无机盐;(5)生长因子供给营养时要注意碳氮磷的比例，因为不同微生物细胞的元素组成比例不同，对各营养元素要求的比例也不同，因此要合适的碳氮磷的比例。9.根据微生物对碳源和能源的需要不同可把微生物分成哪几种类型？答：根据微生物对碳源和能源的需要不同可把微生物分成：无机营养微生物；有机营养微生物；混合营养微生物；10.当处理某一工业废水时，怎样着手和考虑配给营养？答：污水生物处理中好氧微生物群体要求碳氮磷比为BOD5:N:P=100:5:1411.什么叫培养基？按物质的不同，培养基可分为哪几类？按试验目的和用途的不同，可分为哪几类？答：根据各种微生物的营养要求，将水、碳源、氮源、无机盐及生长因子等物质按一定比例配制而成的，用以培养微生物的基质，即培养基。按物质的不同，培养基可分为:合成培养基；天然培养基；复合培养基；按试验目的和用途的不同，可分为：基础培养基；选择培养基；鉴别培养基；富集培养基。12.什么叫选择培养基？那些培养基属于选择培养基？答：用以抑制非目的微生物的生长并使所要分离的微生物生长繁殖的培养基。麦康盖培养基为含胆汁酸盐的培养基，用于大肠杆菌的培养的选择培养基；乳糖发酵培养基也是适用于大肠杆菌生长的选择培养基。13.什么叫鉴别培养基？那些培养基属于鉴别培养基？答：几种细菌由于对培养基中某一成分的分解能力不同，其菌落通过指示剂显示出不同的颜色而被区分开，这种其鉴别和区别不同细菌作用的培养基，叫做鉴别培养基。远藤氏培养基能区别大肠埃希氏菌，枸橼酸盐杆菌，产气杆菌，副大肠杆菌。此外，还有醋酸铅培养基，伊红-美蓝培养基。14.如何从粪便污染的水样中将大肠杆菌群中的四种菌逐一鉴别出来？答：使用鉴别培养基，大肠埃希氏菌，枸橼酸盐杆菌，产气杆菌，副大肠杆菌均能在远藤氏培养基上生长，但它们对乳糖的分解能力不同：前三者能分解乳糖，但分解能力有强有弱，大肠埃希氏菌分解能力最强，菌落呈紫红色带金属光泽；枸橼酸盐杆菌次之，菌落呈紫红或深红色；产气杆菌第三，菌落呈淡红色，副大肠杆菌不能分解乳糖，菌落无色透明。这样，这四种菌被鉴别出来了。15.如何判断某水样是否被粪便污染？答：如果水样中检测出有大肠杆菌群，则认为该水样被粪便污染。18.营养物质逆浓度梯度进入细胞的方式有哪些？是如何进入？答：有主动运输和基团转运。主动运输是当微生物内所积累的营养物质的浓度高于细胞外的浓度时，营养物质就不能按浓度梯度扩散但细胞内，而是逆浓度梯度被“抽”进细胞内。这种逆浓度梯度积累营养物质的过程，叫主动运输。基团转位是由一种需要代谢能量的运输方式。通过基团转位进入细胞的物质有糖、嘌呤、嘧啶、乙酸等。第五章微生物的生长繁殖与生存因子2．什么叫灭菌？灭菌方法有哪几种？试述其优缺点。答：灭菌是通过超高温或其他的物理、化学因素将所有的微生物的营养细胞和所有的芽孢或孢子全部杀死。灭菌的方法有干热灭菌法和湿热灭菌法。湿热灭菌法比干热灭菌法优越，因为湿热的穿透力和热传导都比干热的强，湿热时微生物吸收高温水分，菌体蛋白易凝固变性，所以灭菌效果好。3．什么叫消毒？加热消毒的方法有哪几种？答：消毒是用物理、化学因素杀死致病菌，或是杀死所有微生物的营养细胞或一部分芽孢。方法有巴斯德消毒法和煮沸消毒法两种。57．试述pH过高或过低对微生物的不良影响。用活性污泥法处理污（废）水时为什么要保持在pH6以上？答：(1)pH过低，会引起微生物体表面由带负电变为带正电，进而影响微生物对营养物的吸收。(2)过高或者过低的pH还可影响培养基中的有机化合物的离子作用，从而间接影响微生物。因为细菌表面带负电，非离子状态化合物比离子状态化合物更容易渗入细胞。(3)酶只在最适宜的pH时才能发挥其最大活性，极端的pH使酶的活性降低，进而影响微生物细胞内的生物化学过程，甚至直接破坏微生物细胞。(4)过高或者过低的pH均降低微生物对高温的抵抗能力。8.在培养微生物过程中，什么原因使培养基pH下降？什么原因使pH上升？在生产中如何调节控制pH？答：微生物在培养基中分解葡萄糖，乳产生有机酸会引起培养基的