微生物标本的正确采集与运送黄弋鸿微生物检查样本采集原则无菌采集无菌容器及时足量及时送检送检标本种类与临床意义临床意义低的标本:痰、咽拭子(流感嗜血杆菌、肺炎链球菌除外)粪便、肛拭子(艰难梭菌除外)临床意义中等的标本:尿脓、伤口分泌物临床有意义的标本:血、胸腹水、无菌体液血液标本的采集运送血培养采集的临床指证:1、发热(≧38℃)或低温(≦36℃)2、寒战3、WBC↑(10×109特别有“核左移”时)4、粒细胞减少(成熟粒细胞1×109)5、PLT↓、皮肤黏膜出血6、昏迷、多器官衰竭、血压降低、CRP增高及呼吸加快、肝脾肿大7、新生儿怀疑菌血症时应同时做脑脊液和尿液培养8、老年菌血症可能不发热,如伴有身体不适、肌痛等,有可能是感染性心内膜炎重要指证血培养采集规范操作培养瓶消毒:1、观察血培养瓶是否有破损、是否在保质期内2、75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞,作用60s皮肤消毒(严格按三步法执行)1、75%酒精擦拭静脉穿刺部位,作用30s2、碘伏棉签消毒皮肤60s,从穿刺点由内向往消毒3、75%酒精脱碘标本接种程序:(1)棉签清除橡皮塞残余酒精(2)真空采血先有氧、再厌氧(3)轻轻混匀,防止凝固采血量:成人8-10ml儿童3-5ml婴幼儿1-2ml及时送检:如不能及时送检常温保存、切忌冷藏血液标本采集注意事项:1、抗菌药使用之前采集2、多部位采集提高阳性率3、已使用抗菌药治疗患者应在下次使用抗生素治疗前采血4、发热患者寒战或体温高峰到来之前采集5、注意彻底消毒6、常规血培养不宜从静脉或静脉留置装置中采集血培养采血时机→采血时机←03060(min)细菌浓度体温有相关统计表示血培养采血套数与细菌检出率相关1套:73%2套:94%3套:97%无菌体液采集运送规范胆汁:1、十二指肠引流法2、胆囊穿刺法3、手术直接采取法直接注入无菌瓶,2小时内送检,若不能及时送检4℃保存穿刺液(胸水、腹水、关节液等):由临床医师无菌操作穿刺抽取,尽可能留取多的标本静脉导管:75%酒精消毒导管周围皮肤,将导管末端约5cm移入无菌瓶送检引流液:75%酒精消毒导管采集部位,用注射器从引流管无菌采集2-3ml至无菌容器送检无菌体液采集注意事项:患者用药前或停药后1-2日采集无菌体液的直接涂片可为临床提供重要信息(苛养菌?厌氧菌?白细胞吞噬细菌?)脓液、伤口分泌物采集注意事项:1、采集的标本应立即送检,如不能立即送检,放4℃保存,但不能超过2个小时。2、尽可能在用药前采集标本,脓液,伤口分泌物标本的采集运送规范培养用的标本尽可能取自深部(指的是脓液与组织的交界处),再用无菌拭子采取脓液及病灶深部分泌物。对已破溃脓肿一般以无菌棉拭子采集脓液及病灶深部的分泌物,置入无菌试管中送检。对于未破溃的脓肿可严格消毒后,以无菌注射器抽取脓汁及分泌物,也可切开排脓用无菌棉拭采取,但不能留下碘和乙醇等消毒剂,若混入标本将影响细菌生长。创伤出血敷有药物在2h以内及烧伤12h内均不应采集标本,此时获得的阳性结果机会甚少。痰标本的采集运送规范1.推荐用晨痰——混合痰液和24h痰液有多量杂菌2.刷牙,清水漱口三次——减少口咽部定植菌污染3.水化,生理盐水雾化排痰——重症病人,气管抽痰4.标本立即送检(2小时内),否则4℃存放5.咳痰不宜做厌氧培养——口咽部大量厌氧菌痰标本要求:白细胞(WBC)≥25⁄LPF上皮细胞(SEC)<10⁄LPF如不符合上述指标,应重新采样有意义的痰标本:1、合格痰标本培养优势菌中度以上生长(≥+++)2、合格痰标本有细菌少量生长,但与涂片镜检结果一致(肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌)3、多次培养到相同细菌;痰标本注意事项1.痰以深咳排除后,应装有密封瓶盖的无菌塑料容器中,以免感染自己或他人。2.标本应及时送检,室温≤2h。3.若不能及时处理,可选择运送培养基运送和保存标本,但不应≥48h尿液标本的采集运送规范1、肥皂水清洗外阴,留取中段尿2、膀胱穿刺法注意:不能直接从导管袋放出尿液,因尿液在袋中潴留时间太长,容易孳生细菌标本立即送检,若不能及时送检应4℃保存,2h内送检粪便标本采集运送规范自然排便,挑取脓血、粘液、组织碎片的粪便2-3g剩余无菌容器直肠拭子法小结无菌采集无菌容器及时采集及时送检