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二、假设用大肠杆菌生产小鼠的ß-珠蛋白，需要经过以下几个基本步骤：1.提取目的基因：从小鼠的细胞内提取DNA。同时选择具有选择标记的大肠杆菌质粒，如选择能抗四环素的质粒，并将其提取出来。2.目的基因与运载体结合：用同一种限制酶分别切割小鼠细胞核中的DNA和质粒DNA，使其产生相同的黏性末端。将切割下的目的基因与切割后的质粒混合，并加入适量的连接酶，获得含有小鼠ß-珠蛋白基因的重组质粒。3.将目的基因导入受体细胞：将含有小鼠ß-珠蛋白基因的重组质粒导入到对四环素敏感的大肠杆菌中。4.对目的基因进行检测：将上述大肠杆菌放到加有四环素的培养基上的培养，能够正常生长的大肠杆菌就含有目的基因，反之则没有。基因工程的成果与发展前景（一）基因工程与医药卫生1.生产基因工程药品，如胰岛素、干扰素2.用于基因诊断与基因治疗（1）基因诊断用放射性同位素、荧光分子等标记的DNA分子做探针，利用DNA分子杂交原理（2）基因治疗把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞我国生产的部分基因工程疫苗和药物其中一部分药品已经商品化，还有一部分处于临床试验阶段。我国的第一个生物工业园区——上海生物技术工业园区已经正式兴建。1997年，我国自己生产的白细胞介素-2、干扰素、乙肝疫苗、人生长激素等几种基因工程药物也已经投产。目前，用基因工程方法生产的药物已经有六十余种，除胰岛素、干扰素外，还有白细胞介素、溶血栓剂、凝血因子、人造血液代用品，以及预防乙肝、狂犬病、百日咳、霍乱、伤寒，虐疾等疾病的各类疫苗。我国研究人员正在制备用于基因治疗的基因工程细胞1971年，美国的一位科学家在体外做了这样一个试验，他用带有半乳糖苷转移酶基因的噬菌体侵染患者的离体组织细胞，结果发现这些组织细胞能够利用半乳糖了。这表明，用基因替换的方法治疗这种遗传病是可能的。当然，这仅仅是在人体外完成基因的表达，而要将基因转移到人体内的细胞，还有许多技术上的难题需要解决。但是我们相信，不久的将来，人类一定能够用基因工程的方法治疗白化病、苯丙酮尿症等许多遗传病，随着基因工程的不断发展，许多疑难病症，如恶性肿瘤、艾滋病，心血管疾病，以及糖尿病等，也都可以被人类征服。基因治疗是把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的。例如，有一种人类遗传病叫做半乳糖血症，患这种病的人，由于细胞内半乳糖苷转移酶基因缺陷而缺少半乳糖苷转移酶，因此当乳糖分解成半乳糖后，不能继续转化为葡萄糖，过多的半乳糖在体内积聚，会引起肝、脑等功能受损。运用基因分析对疾病做出诊断的方法，是遗传病最准确的诊断手段，也是一种威力强大的高新技术。传统诊断方法是通过表现型来推测基因型，而基因诊断是从基因着手来推断表现型，即绕过基因产物，通过直接探查基因进行诊断，不受细胞类型和发病年龄的限制，可用于一切遗传病的诊断。例如，癌细胞的病变过程主要是由基因调节控制失灵，通过基因诊断，将发生紊乱的基因加以修复，有希望根治癌症。半乳糖血症是一种先天性糖代谢缺陷症，通过基因诊断，发现病人缺少一个合成半乳糖转移酶的基因。若把半乳糖转移酶的基因转入缺乏这种基因的人体中，治疗这种先天性疾病将成为可能。DNA探针及其作用DNA双链的核苷酸顺序是彼此互补的，当DNA分子杂交时，首先将DNA双链加热或提高pH，使双链解开（这一过程称变性，相反的过程称复性），根据所需要的核苷酸顺序制作成一段与之互补的核苷酸短链，并用同位素标记，这就是探针。DNA探针的作用是从基因文库中准确提取目的基因。用这一探针探查基因文库中已经变性的DNA片段，如果有一个片段能和探针片段互补结合而成双链（分子杂交），这一片段即含有所需要的基因。二、基因工程与农牧业、食品工业1.农业上的应用（1）获得高产、稳定和具有优良品质的农作物如“向日葵豆”（2）培育出具有各种抗逆性的作物新品种如抗虫棉2.畜牧业上的应用（1）培育各种具有优良品质的农作物和优良品种如超级绵羊（2）利用动物乳腺细胞获得人类所需的各种物质如激素、抗体及酶类等3.食品工业上的应用为人类开辟新的食物来源，如用大肠杆菌或酵母菌来生产蛋白我国培育的抗青枯病马铃薯正在大棚中繁殖如抗虫的烟草、番茄、马铃薯、玉米、大豆、油菜、棉等作物，抗黄瓜花叶病毒、苜蓿花叶病毒的作物，以及抗除草剂的植物等。，1993年，中国农业科学院的科学家成功地将苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因转入棉植株，培育成了抗棉铃虫的转基因抗虫棉。1982年科学家把细菌中的抗卡那霉素基因转移到烟草、向日葵和胡萝卜等作物中，一举获得成功。此后短短的几年中，科学家又培育出了数十种具有抗病毒、抗虫、抗除草剂的作物新品种。用显微注射技术将外源DNA注入细胞基因工程在畜牧养殖业上的应用也具有广阔的前景，科学家将某些特定基因与病毒DNA构成重组DNA，然后通过感染或显微注射技术将重组DNA转移到动物受精卵中。由这种受精卵发育成的动物可以获得人们所需要的各种优良品质，如具有抗病能力、高产仔率、高产奶率和高质量的皮毛等。超级小鼠1982年，美国科学家将人的生长素基因和牛的生长素基因分别注射到小白鼠的受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠”。人们还用同样的方法，陆续获得自然界中从来就不曾有过的“超级绵羊”和“超级鱼”等动物。（图中左侧为超级小鼠，右侧为一般小鼠）（三）基因工程与环境保护1.用于环境监测2.用于被污染环境的净化