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1.1DNA重组技术的基本工具广西南宁市第三中学易志锋（第一课时）1.我国棉花产量世界第一。2.虫害较为严重，单位面积产量有待提高。天诛牌苏云金杆菌（含Bt毒蛋白基因）Bt毒蛋白小菜蛾斜纹夜蛾甘蓝夜蛾×××××玉米螟×二化螟菜青虫×棉铃虫天诛牌苏云金杆菌天诛牌苏云金杆菌订购热线：400-800-800普通棉花苏云金杆菌抗虫性状抗虫基因抗虫性状切割拼接重组DNA棉花新品种的培育思路：科学探索探索一：如何“切割”含抗虫基因的DNA片段？抗虫基因…ATGAATTCA…………CTGAATTCG……TACTTAAGT…………GACTTAAGC…科学探索抗虫基因探索一：如何“切割”含抗虫基因的DNA片段？1.取出大信封里的粉红色纸带和剪刀，粉红色纸带代表含抗虫基因的部分DNA序列；粉红色剪刀代表EcoRⅠ，蓝色剪刀代表SmaⅠ。2.以小组为单位，合作学习教材内容，制定目的基因的切割方案，切割目的基因。…ATGAATTCA…………CTGAATTCG……TACTTAAGT…………GACTTAAGC…科学探索EcoRⅠEcoRⅠCTTAAGGAATTC抗虫基因探索一：如何“切割”含抗虫基因的DNA片段？思考：1.EcoRⅠ和SmaⅠ是否都能切割出抗虫基因？说明理由？2.如果可以切割，应在哪里切割？会切割出怎样的末端？CTTAAGGAATTC限制酶的专一性EcoRⅠ限制酶：SmaⅠ限制酶：GGGCCCGCTTAAGGGCCCGAATTC平末端黏性末端CGAATTATAGTC磷酸二酯键磷酸二酯键EcoRⅠEcoRⅠ小结：每种限制酶只能识别双链DNA分子的某种________________；并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的____________断开，产生的末端类型有__________和_______。特定核苷酸序列磷酸二酯键黏性末端平末端探索二：如何拼接两个DNA分子？科学探索1.取出小信封里的白色纸带和胶布。白色纸带代表要与目的基因拼接的DNA部分序列。胶布代表DNA连接酶。2.以小组为单位，运用正确的工具“切割”白色纸带上的DNA分子，并与抗虫基因“拼接”。探索二：如何“拼接”两个DNA分子？科学探索AATTCAACTC…GTTGAG…G…CCACTCG…GGTGTGCTTAAGAATTCA………CTGGT………GACTTAA抗虫基因思考：1.什么样的DNA末端可以被“拼接”？这样的末端一般是怎么得到的？2.DNA连接酶连接两个DNA末端的哪个部位？DNA连接酶DNA连接酶DNA连接酶ATAGTCCGAATT判断以下各组DNA是否可以组成重组DNA分子…CTGCTTACCCGGGTTATT……GACGAATGGGCCCAATAA……ACTCCCGGGTG……TACCCGGGCCT……TGAGGGCCCAC……ATGGGCCCGGA…第一组CCCGGGCCCGGGCCCGGGGGGCCCGGGCCCGGGCCC目的基因…TATGAATTCAG……TACCCGGGTC……ATACTTAAGTC……ATGGGCCCAG…GAATTCCTTAAG…CTCCCACTCGAATTCAACTCCCAC……GAGGGTGTGCTTAAGTTGAGGGTG…GAATTCCTTAAG第二组目的基因CCCGGGGGGCCC1.下列关于限制酶和DNA连接酶的说法中，错误的是（）A.二者的化学本质都是蛋白质B.二者作用部位都是磷酸二酯键和氢键C.T4DNA连接酶可以连接平末端和黏性末端D.限制酶作用的结果是产生平末端或黏性末端B2.根据基因工程的有关知识，回答下列问题（1）限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有__________和___________。（2）按来源来分，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即________DNA连接酶和_________DNA连接酶。黏性末端平末端E·coliT4（3）某DNA分子用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：为使该DNA能够与目的基因相连，含有目的基因的DNA除了可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是AATTC……GG……CTTAA切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同连线高考(2012.课标.改编)抗虫棉的培育思路：普通棉花苏云金杆菌抗虫棉花抗虫基因抗虫性状限制酶DNA连接酶重组DNA