影响试管苗生根的因素

影响试管苗生根的因素试管苗生根是组织培养快速繁殖的重要环节。只有当组培苗有了很好的根系时才能保证移栽成活。试管苗的生根受很多因素的影响，在实际生根时可以通过调节很多因素来使其容易生根。影响试管苗生根的因素主要有：（1）植物材料各种植物种植成活的难易程度不同。同样的，不同的植物、不同的品种、同一植物的不同部位和不同年龄对生根都有决定性的影响。生根难易还与母株所处的生理状态有关，因为取材季节和所处环境条件均有影响。一般的，试管苗生根和扦插苗生根是一样的，即扦插生根容易的植物，试管苗生根也容易；扦插生根困难的植物，试管苗生根也困难。比如，月季等扦插生根比较容易，试管苗也比较容易。不同植物生根的规律是：成年的比幼年的生根难，木本植物比草本植物生根难。试管苗一般都比较幼嫩，但是有些试管苗在培养瓶中生长时间长，茎木化程度比较高，这类苗不容易生根。生长旺盛幼嫩的试管苗容易诱导生根。（2）基本培养基试管苗生根是一个从异养状态进入自养状态的一个变化。利用根系来吸收营养和水分是植物体的一种本能。在培养基中有高浓度的营养元素，特别是糖能满足的情况下，试管苗产生依赖性而不易生根，所以减少培养基中的营养成分和糖的含量即可刺激生根。试管苗生根大多数使用低浓度的MS培养基，其中经常使用1/2MS和1/3MS培养基。不同植物对培养基的要求也不同。在无籽西瓜生根中，降低无机盐浓度，有利于生根，而且根多而粗壮，发根也快，加铁盐则更好。糖的浓度一般用2%,有些植物在无糖培养基上也能生根。培养基中的其他成分也和生根有关，有机成分中的维生素B1，维生素B6，维生素B12都有利于生根。培养基的pH值对试管苗的生根也有一定的影响。因此需要求一定的pH值范围，一般在5.0—6.0。据报道，pH值显著影响小萝卜幼苗切后侧根的形成，pH为3.8时，侧根原基为为每平方厘米60条，pH为5.8时则降为每平方厘米18条。水稻离体种子根生长，随pH值由3.3升高至5.8而加快。（3）植物生长调节物质生长素有促进生长的作用，它一方面使细胞壁疏松，增加可塑性，促进了细胞的纵向伸长；另一方面生长素又促进了蛋白质等物质的合成，从而增加了原生质体的量。生长素中主要有吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸(NAA)和吲哚丁酸(IBA)。这三种生长素一般都能有效促进生根。但不同种类的植物对生长素的种类和浓度的要求也不同。使用不同种类的生长素，不但影响生根的数量，而且影响生根的质量。一般用IAA诱导生成的根比较细长，NAA诱导生成的根比较短粗，而IBA诱导的根则介于二者之间。生根与生长素的浓度有关，生长素浓度越高，根越向短粗方向发展，进一步增加生长素的浓度，超过一定极限，则引起愈伤组织化，影响根的形成和生长。植物生长调节物质的使用方法有2种:一种是将适宜浓度的生长素预先加入到培养基中，然后将无根的试管苗接种上使其诱导生根；另一种是在无菌条件下将五根苗的茎段剪下来，用一定浓度的无菌生根溶液浸泡1~2小时后，再接种月季扦插到不含激素的培养基中培养生根。（4）培养条件温度试管苗在试管内生根，或在试管外生根，都要求一定的适宜温度，一般在16℃—25℃，过高过低均不利于生根。不同植物最适生根温度不同。据报道，草莓继代培养芽的再生是32℃，生根是28℃最好，16℃时根长增加5mm—8mm，根数为5条，而28℃时根长可增加11mm，产生19条根。温度对马铃薯块茎离体培养物发根也有影响，发根最适温度高于分枝的最适温度。光照光照强度和光照时间对发根的影响十分复杂，结果不一。一般认为生根不需要光照。例如，试管苗转入生根培养基后，先进行一周左右的暗培养，再转入正常关照培养，有利于根的形成。但是暗培养影响上部植物的生长，不利于培养壮苗。若在生根培养基中加入0.1%-0.3%的活性炭，不仅使生根处于较暗的条件下，而且还能吸附一些有毒物质，使根不易褐变，有利于根的形成和生长。影响安祖花生根的因素有一下几方面:（1）转入生根培养基的芽苗的高度一般实验中都是将长度大于1.0cm的生长健壮的芽苗切成单苗接种于生根培养基上培养。而在丛状芽继代培养过程中发现在同一种培养基上,无菌苗高的易生根，当高度在3.0cm以上时，生根率最高达85.4%；在2.0cm以下时,诱导生根率较少,仅53.5%。(2)植物生长调节剂三种生长素（IAA、NAA、IBA）对安祖花的生根均有促进作用，其生根作用的效应依次为IAA、IBA、NAA。IAA在0.2～1.0mg/L的范围内生根效果最好；IBA在0.2～1.0mg/L的范围内效果最好；NAA在0.1～0.4mg/L的范围内效果最好。不定芽真根发生率随着IAA浓度增大而增大。IAA，IBA，NAA利于生根的适宜浓度分别为1.0mg/L、1.0mg/L、0.4mg/L，生根率分别为91%，70%，63%。IAA为1.0mg/L在培养约2周后有根长出；当IBA的浓度为1.0mg/L、当NAA的浓度为0.4mg/L时培养20d后才有根长出。高浓度生长素不利于根发生。生长素浓度过大，则外植体会分化出较多的愈伤组织，使根条数降低，不利于生根，而且较高的生长素浓度会使苗木生长表现茎叶白化等异常现象。因此，安祖花组织培养中理想的生根培养基是1/2MS+IAA1.0mg/L。另外，由于IAA不稳定，受热容易分解，组织培养中需要过滤灭菌，操作麻烦，不适宜大规模生产。用培养基：1/2MS+1.0mg/LIBA生根时，试管苗生根率可达70%，因此在实际生产中，应用IBA进行安祖花不定芽生根培养也是可行的。(3)培养条件因为安祖花原产在南美洲热带地区，喜高温多湿的环境，因此，要求温度在20℃-30℃，相对湿度也较高，在80%以上。