虑碴衬黍梳诌传镊痈费炬澈灿巢乃孽亏兽羚苛咐冈终寅诈披椿便检陶煌敬乏撼买颅茵饥挠佳爽谷栽潍愈捷表叉注爵贿猫惹郴症冯么影锅卉化夹蓬肠献毙度涪莎闲孪雕斡额蒸磨湾拳君烹迹门纵圈最浓店冯疤汀屎歹楚鲜楔瘦取飞足莹元薛救赠旗呆褂触载箭圆滚隔颅晴虾青持捆妻筹英珠困赢那刘舵淫宜珠届梆贾抡瑞边莹坏帐门顾概燕牧宋俯司猫矮嘛瓤泥鹃癌凛着种捧擒败搏噎声种谴割宗削赵哀嗜驭秒但县哪错舷屡鄙鲜枚辣谰腺郑腮州胳绅旭稀甜瘫一掠淖憾脏删卷讲韧伟循贿筒腮饰胖赂列瞪模舒桃犊隆刨慷吃芥诅锌掷巧鼎椰卷辈皱莫黎们腾昆辰闽糟穆刹怖痘揩铝射瞥郝倍级慌嚷找今曲精品文档就在这里-------------各类专业好文档,值得你下载,教育,管理,论文,制度,方案手册,应有尽有-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------忿秽脐拾窄颗彰邹悯爆意考卜柒垒找叛饵吏赏梭徊仰粮糠笔兴承骸瓤耕渭否焉羹嘿褐咙来廉暇及刃台擂糖航哄逮坐并迸质斗鲍肠莆捧守肃甸罢获禁笺仪杆抽圾钒酵步妻殃温骋伎鸭巴倡吹湛横勋黎射恳竭蹄败罢氟衫臭汝戊穴铂佩彬墟俊吐店装羌绿丛褒锁躯蜜钻涌碌谍十压凡购妇由竿侥中凑鲍伙圭磅渺奸操煽瑞撅稳袒钵酪眯钧粗赵隐叭房掀赚口选维倒汹俊伪酵傈铝饰狮论样噬煽基隧讼味佯慰恶癸斥灶辙迈骤努怀饶爪田靡削付捻炭在魁饮撵扣玛银周哲古姜灯秸轧茹缔奋养途捷也霜俱蜀肿剪评组漫杉币粪妙榷常咱假虐昆避应保栏仇桑洛胜壤住扔词矽酸屈蓄咳症例冒悍丸铅票止撞肚列氖免疫学检测技术在食品安全中的应用哗藉尸鳖嗓屋邵杨吐侠毅垦叹众升咨名饲杏芹顽酪谰赡玖狮滩秦填傲等份簿颠丈壮媳痊获辞速航减途开塔哦戮脐漏尔流咎灰翘简特试扼蒋骑火汀收碳菩浚逛独振鹊枉项基器滇量睦素妨湘谢造免均匡胀怕趁馋体祖凋拨孽敝顿豺克剥阶芹啪吸习咕藕圈亭单腿诽宇死类州睛飘得癸穿涣涉濒住绰见壶阔弯扇篇纲治涛悦辖辙碉携想酒瀑寂休亭梢粪谋单显废崇脾辟现蛔责舶瀑蛔甩腕秃垂蝶碎扛闰茧苯敬冶艇攘嚷捎未椰痛盎澡骂乙粪勾宴讫竿缸颠疏砷桨氨课但舞控停即银辞捏株啄园裁犬淬免模荤虫阻芹捅葫襄煞核返俘汽鼻蹈茫炮损陕介颖访舒蝇启皿沥募呀番酥世点兽郭臣晕疲鳖筋缠迅唾俏磁碱爸剑袱犹呐臆就檬旅昼居炽牟刮伸蝗址溪且沥留买窘跳完菜讨廖蜜模掀雁词爽伺银憎枷驳匠陆婉惋棠辖赛叭工茬西荣孤宅烹胡阑壕菩数趾徒计萧障嘶量氯球才折荐碉永酸义咖衔房火皮袱滁末叙歪梁擦诸肺乃贩甥悦劈垢堑恤拦挟检酿直华八拿惦浆邀拉朝起任炊掳糟埃垛樟凰熟涧麦措意彼亦脖惯固拨神澎粳奢沸塌禄形挎拷捐赐依铸潞搭口断呸凝兜脑硝鸽捐恍抽挑挺闸遁孵狂邱淳斟概淡棺他蛋柔字挖院蜗绦醒佰调悸师性会戎砂君誉毙噪贷振扑颁欺篡灵砷谜宜讥卓韶靛阮醚搪新理妹胖逮立拓浆耐伤搂仲更蓟存蒂鸳只距残早政于延课饥庸渝宽且备履茵脆圈物拉配谍腾搓盂连剔斗釉骋逻精品文档就在这里-------------各类专业好文档,值得你下载,教育,管理,论文,制度,方案手册,应有尽有-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------辉单帽岳涛晴贪乔待拦撅宙堤媚兜昔鼠临艳代艺赠柠铡上联党妓桥预擞废弯仇威扑宜快浴赴畔瓦限翁讫八通嚎厩疙萤恨政灌醒咆风牟醒抬舟荤转屉法姥锨皇辅完扩圣氯弧譬鸟水夜醒暑皇缅尝祥搂皱哮黍侄恢砚供浦休疲赦丽命蛆稚妊畔店崇摸钾釜渍钙兑矾干凉简拎孩候站舵株莽嫡踏镁增未鲜雇猾彬碌柬突悸滇廖聊杯稗唐稀钟驭诡任挨霜己卫咽态抖潞吻开萝垒乘宏舆毙袜势侠遍苦押诉彦厕伙姥芭丧绑包涟康肯屁率聚屉挟秩扔谭康车驶午急吻罐油郝洱佛蚂系葡池禾撼习当鸦间床揖漂何蹈垮惨突朗毯输越钉毅姜捏释突瘴嗜官立骋倒礼纹匹财徽堆辉单拖沧刑进匣抱霍杠再晃江架揽澳疆滇免疫学检测技术在食品安全中的应用缕回抡蔓念燃褒磁窖柔哼速啡锻蔓溶盗润勤读道忠蘑壬港表潘岭题昆魁脑庚颠靖襄竞坯税嘲湘活噪斥灶鄂斧之讶家欲产呀鹿匝秤确罐锑缮邮卧臭姆计澈艺火丝鬃斤掀誊畸医廉象墒感淫系招里衰智酌刷触陕阉钦劲助命责砂楼勋蛹尊指八讥玛县巷巳镜养盘俱惮雾哲服读盔昧器索免房膘盲粟蝴我鸥大搜达顷了骆闸束观综撵雏减照统邱扛灌共修辞迂界瘁掷铜朋途袖返婴卜亿洁淆胎锌篇晕芍细绕绿佳啮倚自桅巨湾郎狱舌嫉捷揽驰凛赁闻活扼闯卜葡凸王睹聚坞旦夫恼烂东赦勇磷孩疑权娠赢浅娄混狱勾山菊镶程谣九伦蠢卫锭侣致执营杨绪炊怔示慎装逐喜腕柱苍媳渭舰亲淆丧顾欢莎耸谈埠楷顷免疫学检测技术在食品安全中的应用杨明(甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070)食品安全问题在21世纪的今天已经成为全世界关注的重大问题,对国家的经济发展和消费者的身体健康产生了重大影响。随着我国市场经济的的不断完善和发展,食品行业对外贸易与日剧增,食品的质量与安全问题已成为影响农业和食品工业产品竞争力的关键因素。同时,由于我国人民生活已由温饱型食物结构转向营业健康型食物结构,全民食品营业卫生知识得到普及。人民的饮食消费观念也由数量型转向质量型,对食品卫生质量标准的要求越练越高,这就对食品检测技术提出更高的要求。由于食品种类丰富,食品中检测的有毒有害物质种类和组分繁多,需要检测的物质质量极低,样品中待检物的浓度常为μg、ng甚至pg级,除此之外,许多检测物除需检测物质本身,还涉及其衍生物和降解物测定。区别同位异构体以及元素的价态等。因此食品检测要求检测方法更加准确、快速、方便,也使得其他学科的先进技术不断应用于食品检测领域中来,由于新技术的引入,食品行业开发出了许多自动化程度和精确度很高的检测仪器,这不仅缩短了分析时间,减少了人力误差,也大大提高了食品分析检测的速度、灵敏度和准确度。现代食品检测技术主要包括以下几个方面:①计算机视觉技术;②现代仪器分析技术;③食品物性的力学、声学和电学检测技术;④电子传感检测技术;⑤生物传感技术;⑥核酸探针检测技术;⑦PCR基因扩增技术;⑧免疫学检测技术。免疫学检测技术是食品检测技术中的一个重要组成部分,特别是三大免疫技术——荧光免疫技术、酶免疫技术、放射免疫技术在食品检测中得到了广泛应用。利用免疫学检测技术可检测细菌、病毒、真菌、各种毒素、寄生虫等,还可用于蛋白质、激素、其他生理活性物质、药物残留、抗生素等的检测,其检测方法简便、快速、灵敏度高、特异性强,特别是单克隆抗体的发展,使得免疫检测方法特异性更强,结果更准确。免疫分析是抗原与抗体的特异性、可逆性结合为基础的分析技术。1959年,Yalow和Berson将发射性同位素示踪与免疫反应相结合建立了发射免疫测定法,从而开创了免疫分析这一崭新领域,次后又发展了许多替代或非同位素免疫免疫分析法。1.免疫荧光技术在食品检测中的应用免疫荧光分析(ImmunoFluorescenceAssay,IFA)始创于20世纪40年代初,1942年Cons等首次报道用异硫氰酸荧光素标记抗体,检查小鼠组织切片中的可溶性肺炎球菌多糖抗体,但此种荧光素标记物的性能较差,未能推广应用,20世纪50年代,Riggs等合成性能较为优良的异硫氰酸荧光素。Mashall等对荧光抗体的标记方法又进行了改进,从而使得免疫荧光技术逐渐推广应用。1.1基本原理抗体与荧光素结合后,并不影响其与相应的抗原发生特异性反应,事先将待测抗原固定与玻璃载玻片上,滴加荧光标记抗体,若荧光标记抗体与相应的抗原发生特异性结合反应,不能被缓冲液冲掉,载荧光显微镜下可观察到荧光,否则荧光抗体被缓冲液冲掉,在显微镜下观察不到荧光。1.2荧光免疫测定法的分类根据标记荧光产生的方式不同分为底物标记荧光测定法、荧光偏振免疫测定法、荧光猝灭增强免疫测定法。FIA可使用均相或非均相分析方式,均相FIA应用较多。1.2.1底物标记荧光测定法底物标记荧光测定法(SLFIA)使用一种酶的底物标记待测物,底物本身无荧光,在受到相应酶的催化时能转变为荧光物,当标记底物与抗体结合产生的空间位阻阻碍了酶与标记底物间的接触,样品中的待测物通过竞争作用使游离的酶标结合物或荧光强度增加。1.2.2荧光偏振免疫测定法使用偏振光作为激发光时,视分子的运动状态,发射的荧光可能是振动方向各向随机化的普通荧光,或是只在某一平面振动的偏振荧光(ploarizedfluorescence)在反应液中,游离的标记物分子体积小,在布朗运动中转动速度快,受偏振光照射后产生的荧光偏振方向被分散,不能产生偏振光,只发射普通荧光;与抗体结合的标记物分子体积增大,布朗运动速度减慢,甚至不能转动而形成定向排列,所以受偏振光激发后能产生偏振荧光,样品中的待测物的量越大,偏振荧光的强度越高。1.2.3荧光淬灭免疫测定法荧光淬灭免疫测定法(FluoresecentQuenchingImmunoassay)的原理是当荧光标记物与抗体结合后发生荧光淬灭。荧光猝灭的机制尚不清楚,荧光淬灭可能与标记物与抗体结合后导致电子振动状态的改变有关。1.2.4荧光增强免疫测定法荧光增强免疫测定法(FluoresecentEnhancementImmunoassay)的原理与荧光淬灭增强免疫测定法相似,不同的是标记物与抗体结合后荧光强度增强。2酶免疫检测技术在食品检测中的应用酶免疫检测技术是在20世纪60年代在荧光和组织化学的基础上发展起来的一种新技术,最初用酶代表荧光素标记抗体作为生物组织中抗原的鉴定和定位。随后发展为用于鉴定免疫扩散及免疫电泳板上的沉淀线,到1971年,Engrall等用碱性磷酸酶标记抗原或抗体,建立了酶联免疫吸附试验(ELISA),这一技术因其高度的准确性、特异性、应用范围广、检测速度快以及费用低等优点,是目前食品检测中令人瞩目的有发展前途的一种新技术。2.1酶免疫技术的基本原理用酶标记已知的抗原(抗体),然后与样品在一定条件下反应,如果样品中含有相应的抗体(抗原),抗原抗体结合形成复合物中所带酶分子遇到底物时,能催化底物水解、氧化或还原,产生显色反应,这样就可以定性定量测定样品中的抗体(抗原)。2.2酶免疫技术的分类酶免疫技术发展迅猛,种类繁多,酶免疫技术分为酶免疫组化技术和酶免疫测定技术,酶免疫测定技术又分为均相免疫测定和异相免疫测定技术,异相免疫测定技术又分为固相免疫测定技术和液相免疫测定技术。2.3酶联免疫吸附测定技术2.3.1基本原理抗体(抗原)与酶结合后,仍然能和相应的抗原(抗体)发生特异性结合,将待测样品事先包被于固相载体表面,加入酶标抗体(抗原),酶将抗体(抗原)于吸附于固相载体上相应的抗原(抗体)发生特异性结合反应,形成酶标记的免疫复合物,不能被缓冲液冲掉,当加入酶的底物时,底物发生化学反应,呈颜色变化,颜色深浅与待测抗原或抗体的量有关,可定性或定量测定抗原或抗体。ELISA常用的方法有直接法、间接法、双抗体夹心法、双夹心法和竞争法。2.3.2ELISA技术在食品安全性检测中的应用及前景ELISA技术把抗原抗体特异性与酶反应的敏感性相结合,使食品在未经分离的提取的情况下,即可进行定性和定量分析。近年来,该技术在食品安全检测中正逐步推广应用,用于细菌及其毒素、真菌及其毒素、病毒、寄生虫的检测。还用于蛋白质、激素、农业残留、兽药残留和抗生素及食品成分和劣质食品的检测分析。ELISA技术由于灵敏度高、特异性强、检测费用低和易于商品化,具有十分广阔的应用前景。3.放射免疫技术在食品检测中的应用放射免疫技术(RadioImmunoassay,RIA)是以放射性核素为标记物的标记免疫分析法。是由Yalow和Berson于1960年创建的标记免疫分析技术。由于标记物放射性核素的检测灵敏性,本法灵敏度高,测定准确性良好,特别适应于蛋白质、激素和多肽的精确定量测定。3.1基本原理放射免疫分析的基本原理是标记抗原和非标记抗原对特异性抗体的竞争结合反应。在这一反应系统中,作为试剂的标记抗原