细胞工程复习题一、名词解释[1]细胞工程:是指主要以细胞为对象,应用生命科学理论,借助工程学原理与技术,有目的地利用或改造生物遗传性状,以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。[2]细胞融合:是指使用人工方法使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的技术。[3]细胞重组:从活细胞中将细胞器及其组分分离出来,再在体外一定条件下将不同来源的细胞器及其组分重新组合,使之重新装配成为具有生物活性的细胞或细胞器的一种实验技术[4]细胞培养:泛指所有体外培养,其含义是指从动物活体体内取出组织,于模拟体内生理环境等特定的体内条件下,进行孵育培养,使之生存并生长[5]细胞全能性:指分化细胞保留全部的核基因组,具有生物个体生长、发育所需要的全部遗传信息,具有发育成完整个体的潜能。[6]细胞分化:是指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程,包括时间上和空间上的分化。[7]细胞核移植:是一种利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的技术。主要包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植。[8]细胞悬浮培养:是将细胞接种于液体培养基中并保持良好的分散状态的培养方式[9]细胞系:由原代培养经传代培养纯化,获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不均一的细胞群体。第一次传代培养后的细胞即称之为细胞系[10]细胞株:是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群,称细胞株[11]细胞凋亡:也叫程序性细胞死亡是机体维持环境稳定、有基因控制的细胞自主的有序性死亡[12]细胞团培养:细胞培养时,本身代谢就慢或者脆弱,细胞密度太低或者太高都会导致细胞的凋亡,死亡的细胞裂解物包裹未凋亡的细胞形成絮状物,这些絮状物在显微镜下看就是细胞聚集。[13]体细胞核移植:体细胞核移植又称体细胞克隆,原理即细胞核的全能性,是动物细胞工程技术的常用技术手段[14]冠瘿组织:是由根癌农杆菌感染引起的植物肿瘤组织,它能在无外加植物激素的培养基上生长。[15]细胞平板培养:将琼脂或明胶等凝胶状固体培养基制成平面状,然后在此平面上培养微生物或多细胞生物的细胞、组织或器官[16]抗体酶:又称催化抗体,是一类具有催化能力的免疫球蛋白,即通过一系列化学与生物技术方法制备出的具有催化活性的抗体,它既具有相应的免疫活性,又能像酶那样催化某种化学反应[17]植物细胞质工程:植物体的细胞中,含有该植物所有的遗传信息。在合适的条件下,一个细胞可以独立发育成完整的植物体。利用细胞的这种全能性,通过组培来繁殖名贵花卉、消灭果树上的病毒,以及通过对细胞核物质的重新组合,进行植物遗传改造等。这就是人们常说的植物细胞工程[18]愈伤组织:指脱分化后的植物细胞经过细胞分裂,产生无组织结构、无明显极性的松散的细胞团。[19]试管婴儿:是指将卵子与精子取出在体外受精,培养发育成早期胚胎,再植回母体子宫内发育出生的婴儿,也就是采用体外受精联合胚胎移植技术培育的婴儿。[20]发根农杆菌:是一种革兰氏阴性菌,能侵染大多数的双子叶植物、少数单子叶植物及个别的裸子植物,诱发被感染植物的受伤部位长出毛状根。[21]胚胎工程:是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术[22]两相培养:在培养体系中加入水溶性或脂溶性的有机物或者具有吸附作用的多聚化合物,使培养体系形成上、下两相;细胞在水相中生长,合成的次生代谢物质分泌出来后转移至有机相中[23]HAT选择系统:细胞融合前必须做骨髓瘤细胞对HAT选择培养基敏感性试验,不敏感的细胞不能用于细胞融合。HAT选择培养基成分:次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T),取三者第一个字母称为HAT培养基。[24]转基因技术:通过人工方式将外源基因整合到生物体基因组内,并使该转基因生物能稳定地将此基因遗传给后代的技术。[25]吸附固定法:通过物理吸附、离子吸附(依靠静电引力固着在带有异电荷的载体上)使细胞固定在载体上[26]微囊化:是利用天然的或者合成的高分子材料作为囊壁材料将细胞包裹成微米级的微小球囊,形成的微囊膜是亲水半透膜,培养基的营养成分以及代谢产物可以通过微囊膜进行交换[27]初级代谢产物是通过初级代谢产生的维持细胞生命活动必需的物质,如氨基酸、核苷酸、多糖、脂类等。在不同种类的细胞中,初级代谢产物的种类基本相同。初级代谢产物的合成无时无刻都在进行着,任何一种产物的合成发生障碍都会影响细胞正常的生命活动,甚至导致死亡。[28]次级代谢产物是通过次级代谢合成的产物,大多是分子结构比较复杂的小分子化合物,例如抗生素、激素、生物碱、毒素等。由于次级代谢产物大多具有生物活性,因此是植物代谢产物研究的重点。[29]狭义诱导子:是指那些能够与细胞发生相互作用,通过细胞内一系列的信号转导过程,作用于与细胞次生代谢相关的基因表达,进而改变细胞次生代谢关酶的活力,最终使细胞次生代谢水平发生改变的物质。[30]广义诱导子:是指所有能够提高细胞次生代谢相关酶活力,进而提高细胞次生代谢水平的外界因素。温度、光照、紫外线、红外线等都是广义诱导子。[31]毛状根:是发根农杆菌感染双子叶植物后,形成的类似头发一样的根组织。[32]冠瘿组织:是由根癌农杆菌感染引起的植物肿瘤组织,它能在无外加植物激素的培养基上生长。[33]体外受精(动物):指将供体的精子和卵子在体外受精,体外培养胚胎发育到一定阶段通过胚胎移植移入受体完成发育出生的动物。[34]试管受精(植物):指在体外无菌条件下培养未受精的子房、胚珠和花粉,使花粉萌发进入胚珠完成受精的技术。[35]试管动物:是指将供体的精子和卵子在体外受精,体外培养胚胎发育到一定阶段通过胚胎移植移入受体完成发育出生的动物。[36]试管婴儿:是指将卵子与精子取出在体外受精,培养发育成早期胚胎,再植回母体子宫内发育出生的婴儿,也就是采用体外受精联合胚胎移植技术培育的婴儿。[37]克隆动物:是用特定发育阶段的核供体及相应的核受体(去核的卵子)体外构建重组胚,通过胚胎移植达到受体,发育出生的动物。[38]不亲和性:在有性生殖过程中,由于生物个体的细胞或组织水平上的不协调而使受精或接合不能正常进行,或是受精后不能产生后代的现象。例如:生殖细胞不能融合,或受精卵不能发育,或子代无繁殖能力等。不亲和性是稳定物种的重要机理之一。[39]杂交优势:两个遗传基础不同的植物或动物进行杂交,其杂交后代所表现出的各种性状均优于杂交双亲,比如抗逆性强、早熟高产、品质优良等。[40]远缘杂交:不同种属之间,或是地理上远缘的种内亚种之间个体的交配称为远缘杂交。[41]雄核发育:卵细胞不受精,卵核消失,或卵细胞受精前失活,由精核在卵细胞内单独发育成单倍体,因此只含有一套雄配子染色体。这类单倍体的发生频率很低。[42]雌核发育:精子经过处理使其核不参与受精卵卵球的发育,胚胎的发育仅在母体遗传的控制下进行的一种发育方式[43]花粉培养:指离体培养花药和花粉,形成花粉植株,从中鉴定出单倍体植株并使之二倍化的细胞工程技术[44]看护培养用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞,使其持续分裂和增殖。这块愈伤组织被称为看护组织。[45]饲养层培养:把处理过的(如X射线处理)无分裂能力或分裂很慢的细胞来饲养所需培养的细胞,使其分裂和生长。[46]基因工程:又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。[47]染色体工程:按照一定的设计,有计划地消减、添加或代换同种或异种染色体,从而达到定向改变遗传性和选育新品种的目的的技术[48]干细胞工程:利用干细胞在一定条件下进行分化,形成任何类型的组织和器官,实现组织器官等的无排斥移植,干细胞及其相关产品的研发和产品中试工艺流程的设计;干细胞及其相关产品应用基础和临床前动物实验;干细胞及其相关产品的临床试验和新的临床移植技术研究等工作的工程。[49]细胞脱分化:指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程,即分化的细胞在适当条件下转变为胚性状态而重新获得分裂能力的过程。[50]再分化:指在离体条件下,无序生长的脱分化的细胞在适当条件下重新进入有序生长和分化状态的过程。[51]外植体:主要指用于离体培养的植物或组织切段[52]植物激素:是植物自然状态下产生的、对生长发育有显著作用的微量有机物。能影响生长和分化。[53]人工种子:又称合成种子或细胞种子,是指将植物离体培养中产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成的类似种子的颗粒。[54]分批式培养:是指在一个密闭系统内投入有限数量的营养物质后,接入少量微生物菌种进行培养,使微生物生长繁殖,在特定条件下完成一个生长周期的微生物培养方法[55]体细胞杂交:克服有性不亲和性,实现远源遗传重组,在育种方面意义重大[56]原代培养:接种组织块直接长出单层细胞或将组织分散成单个细胞再进行培养,在首次传代前的培养称为原代培养[57]连续式培养:又叫开放培养,是采用有效的措施让微生物在某特定的环境中保持旺盛生长状态的培养方法。其中的微生物可长期保持在对数期的平衡生长状态和稳定的生长速率[58]胞质杂种:胞质杂种来自同一种培养的两个原生质体融合产生的细胞,其中一个细胞的细胞核消失后,两个亲代原生质的细胞质杂交得到的个体成为胞质杂种[59]传代培养:是指将原代培养的细胞继续转接培养的过程。细胞的体外大量增殖以及细胞系的建立是通过传代培养实现的。填空1.动物细胞培养实验室条件布局必需包括准备间、缓冲间、培养室。2.植物细胞分化的第一步是极性的建立。3.1904年,德国植物胚胎学家(Hanning)用萝卜和辣根的胚进行离体培养,提早长成了小植株,首次获得胚培养成功。4.用于细胞悬浮和原生质培养的培养基是(B5)5.在影响体细胞胚发生的激素因素中,应用最为广泛的是(2,4-D)6.幼胚培养的取材关键时期是(球形胚至鱼雷形和成熟胚)7.1978年(Melchers)进行了马铃薯和番茄的融合实验,获得了第一个属间杂种植株。8.人工胚乳由于糖等物质的存在易导致微生物污染,所以还要加入(防腐剂,抗菌素,农药)等成分。9.控制组培中形态建成的激素模型是(生长素与细胞分裂素的比例)。10.(永久细胞系)的建立是动物细胞规模化培养的前体。11.细胞平板培养的效果一般用(植板率)来衡量。12.动物细胞培养渗透压的维持一般采用(平衡盐溶液)。13.只能使动物细胞融合的常用诱导方法是(灭活的病毒)。14.高压灭菌引起培养基pH变化,一般灭菌后培养基pH将(下降0.5左右)。15.尽管各种合成培养基给动物细胞培养带来极大方便,但许多实验表明,单纯使用合成培养基细胞的贴壁增殖效果常常不理想。因此,在使用时通常仍然需要加入一定量的(动物血清)。16.细胞株的特点是(遗传物质发生改变,且有癌变特点,可以无限传代)。17.体细胞变异中的分子遗传学基础有(碱基突变、DNA序列的选择性扩增与丢失、转座子活化)。18.细胞同步化方法(饥饿法、抑制剂法、有丝分裂阻抑)19.1978年7月25日,世界首例试管婴儿路易斯·布朗在英国诞生20.细胞工程根据培养技术的不同,可分为大规模细胞培养技术和干细胞工程。21.培养室和接种室、培养基、金属器皿一般使用的灭菌方法。答:培养室:高压蒸汽灭菌、干热灭菌、间歇灭菌、紫外线灭菌接种室:紫外线消毒法、臭氧发生器、NICOLER动态空气消毒机、甲醛和高锰酸钾熏蒸法培养基:高压蒸汽灭菌金属器皿:干热灭菌、压力蒸汽灭菌22.控制组培中形态建成的激素模型是(生长素与细胞分裂素的比例)。答:生长素/细胞分裂素{高有利于根的形成和愈伤组织的形成;适中有利于根芽的分化;低有利于芽的形成}23.毛状根诱导方法有哪三种?(1)外植体接种法(2)茎杆接种法(3)原生质体—农杆菌共培养法24.贴壁培养的细胞