TME.Z.N.A.PlasmidMiniKitI简易说明书Omega中国区订货/技术支持:020-32058915实验前准备1.使用前,将RNaseA全部加入SolutionI中并于4度保存。2.按下表用无水乙醇稀释DNAWashBuffer,并于室温保存。D6942-00,3:加入ml无水乙醇D6942-01,D6943-01:加入80ml无水乙醇D6842-02,D6943-02:每瓶中加入80ml无水乙醇D694-0081.将带有质粒的E.coli接种于5mlLB/抗生素培养液中,37°C搖床培养12~16h;2.取1.0~5.0ml的菌液,室温下10,000xg离心1min收集细菌。3.倒弃培养基。加入250ulSolutionI/RNaseA混和液,漩涡振荡使细胞完全悬浮。4.往重悬混和液中加入250ulSolutionII,轻轻颠倒混匀4-6次。此操作避免剧烈混匀裂解液且裂解反应不要超过5min。5.加入350ulSolutionIII,温和颠倒数次至形成白色絮狀沉淀。6.室温下,≥10,000xg离心10min。7.转移上清液至套有2ml收集管的HiBindDNA结合柱中,室温下10,000xg离心1min,倒去收集管中的滤液。8.把柱子重新装回收集管,加入500ulHBBuffer,按上述条件离心,弃去滤液。9.把柱子重新装回收集管,加入700ulDNAWashBuffer,按上述条件离心,弃去滤液。注意:浓缩的DNAWashBuffer在使用之前必须按标签的提示用无水乙醇稀释。10.(可选)弃去滤液,重复第9步骤一次。11.弃去滤液,把柱子重新装回收集管,10,000xg离心空柱2min以甩干柱子基质。注意:不要忽略此步――这对去除柱子中残留的乙醇至关重要。12.把柱子装在干净的1.5ml离心管上,加入30-50ulElutionBuffer(10mMTris-HCl,PH8.5)或无菌水到柱子基质中,静置1-2min,10,000xg离心1min洗脱出DNA。,离心操作方案Cat.No:D6942,D6943TME.Z.N.A.PlasmidMiniKitI简易说明书Omega中国区订货/技术支持:020-32058915快速流程图重悬:250ulSolutionI裂解:250ulSolutionII中和:350ulSolutionIII上柱吸附(10,000xg)除蛋白质:500ulBufferHB脱盐:700ulDNAWashBuffer两次洗脱:30-50ulElutionBuffer或无菌水Cat.No:D6942,D6943D6942/3-00(5)D6942/3-01(50)D6942/3-02(200)50-250mL1.0mg订货信息品名菌液用量最大结合力货号和次数PlasmidMiniKitIPlasmidMiniKitIIPlasmidMidiKitPlasmidMaxiKit1-5mL5-15mL15-50mL30µg70µg250µg价格¥50¥199¥680离心(,)去除沉淀10,000xg10minD6945-00(5)D6945-01(50)D6945-02(200)D6904-01(10)D6904-03(25)D6904-04(100)D6922-01(5)D6922-02(20)¥85¥495¥1800¥500¥1170¥4050¥360¥1350