车间环境卫生检测规范1.目的:根据GB12693-2010《乳制品企业良好生产规范》及本公司《生产洁净区环境、卫生管理规定》中的相关规定及要求,特制定本规范。2.范围本规范规定了本公司实验室实施车间环境卫生检测的依据、方法及检测结果判定标准。本规范适用于本公司实验室实施车间环境卫生的各项检测。3检测项目:菌落总数、霉菌、酵母、阪崎肠杆菌、大肠菌群、沙门氏菌4.检测频率及检测时间:每日生产前进行生产设备、工器具、包装材料、员工个人卫生等部位的涂抹试验。每日生产过程中对生产车间空气进行沉降试验。5.职责由检验人员负责车间环境卫生检测的具体操作。6.检测方法6.1空气沉降法6.1.1菌落总数:1)车间空气采样:选取4个采样点,(见附录1车间空气采样位点图)。采样高度为1.2m~1.5m。采样点应远离墙壁1m以上,并避开空调、门窗等空气流通处。2)生产车间空气检测采样部位:混粉间、杀菌机、预封机、真封机、100g灌装间、软包装灌装间、压片间、储粉间等,每部位为一采样点。3)将营养琼脂平板置于采样点处,打开平皿盖,暴露30min,盖上平皿盖。反转平板,置36±1℃培养48h。4)若为车间空气菌落总数测定,则应计算4个采样点菌落的平均数;若为生产车间空气检测采样部位菌落总数测定,则应计数每个平板上的菌落数,均以每皿菌落数(CFU/皿)报告结果。6.1.2霉菌、酵母:1)、2)同6.1.1菌落总数。3)将虎红琼脂平板置于采样点处,打开平皿盖,暴露30min,盖上平皿盖。反转平板,置25±1℃培养3d~5d。4)若为车间空气霉菌、酵母总数测定,则应计算4个采样点菌落的平均数;若为生产车间空气检测采样部位霉菌、酵母总数测定,则应计数每个平板上的菌落数,均以每皿菌落数(CFU/皿)报告结果。6.1.3阪崎肠杆菌1)车间空气采样:选取4个采样点,(见附录1车间空气采样位点图)。采样高度为1.2m~1.5m。采样点应远离墙壁1m以上,并避开空调、门窗等空气流通处。2)将阪崎肠杆菌显色平板置于采样点处,打开平皿盖,暴露30min,盖上平皿盖。反转平板,置36±1℃培养48h。3)计数每个阪崎肠杆菌显色平板上蓝绿色菌落,并计算4个采样点蓝绿色菌落的平均数,以每皿阪崎肠杆菌菌落数(CFU/皿)报告结果。6.2表面涂抹法6.2.1物体表面涂抹:6.2.1.1菌落总数、霉菌和酵母6.2.1.1.1将经灭菌的内径为5cm×5cm的规格板放在被检物体表面,用一浸有灭菌生理盐水的棉签在其内涂抹,然后剪去手接触的部分棉棒,将棉签放入装有10mL灭菌生理盐水/乳糖胆盐发酵管的采样管内及时送检。6.2.1.1.2将每支灭菌生理盐水采样管充分混匀后,取1mL样液,分别放入灭菌平皿内,加入冷至45℃左右的营养琼脂/虎红琼脂约15mL,每个样品平行接种2个平皿,将营养琼脂平板置36℃±1℃培养48h.;虎红琼脂平板置25℃~28℃培养3~5d.6.2.1.1.3.计数平板上的细菌/霉菌、酵母菌落数,以每毫升检样中的菌落总数(CFU)的平均数报告结果。6.2.1.2阪崎肠杆菌6.2.1.2.1将经灭菌的内径为5cm×5cm的规格板放在被检物体表面,用一浸有灭菌营养肉汤的棉签在其内涂抹,然后剪去手接触的部分棉棒,将棉签放入装有10mL灭菌营养肉汤的采样管内及时送检。6.2.1.2.2将每支灭菌营养肉汤的采样管充分混匀后,取1mL样液,以0.3mL、0.3mL、0.4mL接种量分别加入三个阪崎肠杆菌显色平板,然后用无菌L棒涂布整个平板,注意不要触及平板边缘。使用前,如阪崎肠杆菌显色平板表面有水珠,可放在25℃~50℃的培养箱里干燥,直到平板表面的水珠消失方可使用。6.2.1.2.3反转平板,置36±1℃培养48h。6.2.1.2.4挑取蓝绿色可疑菌落,采用API20E进行生化鉴定及进行氧化酶、产黄素试验。6.2.1.2.4根据鉴定及试验结果报告检出或未检出阪崎肠杆菌。6.2.1.3沙门氏菌6.2.1.3.1将经灭菌的内径为5cm×5cm的规格板放在被检物体表面,用一灭菌的棉签在其内涂抹,然后剪去手接触的部分棉棒,将棉签放入装有10mL灭菌营养肉汤的采样管内及时送检。6.2.1.3.2将灭菌营养肉汤的采样管于于36±1℃培养8~18h。6.2.1.3.3轻轻摇匀采样管内的混合物,取1mL样液转种于10mL亚硒酸盐胱氨酸(SC)内,于36±1℃培养18~24h。6.2.1.3.4用接种环取增菌液1环,划线接种于一个科马嘉显色培养基平板,于36±1℃培养18~24h。6.2.1.3.5挑取紫红色可疑菌落,采用API20E进行生化鉴定试验。6.2.1.3.6根据鉴定及试验结果报告检出或未检出沙门氏菌。6.2.1.4大肠菌群6.2.1.3.1将每支乳糖胆盐发酵管置36±1℃培养24h±2h。6.2.1.3.2若产气,即初步判定为大肠菌群阳性。以大肠菌群阳性/阴性报告结果。6.2.2员工手部涂抹:6.2.2.1被检人五指并拢,用一浸有灭菌生理盐水的棉签在右手指曲面,从指尖到指端来回涂抹10次,然后剪去手接触的部分棉棒,将棉签放入装有10mL灭菌乳糖胆盐发酵管内及时送检。6.2.2.2将每支乳糖胆盐发酵管置36±1℃培养24h±2h。若产气,即初步判定为大肠菌群阳性。6.2.2.3以员工手表面大肠菌群阳性或阴性/手报告结果。6.2.3涂抹部位:6.2.3.1生产设备、工器具的涂抹:预混机、混粉缸、混粉缸上/下料口、筛粉机下料口、下粉漏斗、填充器、筛网、受粉槽、钢管、软管、盆、勺等。6.2.3.2包装材料的涂抹:底盖、内袋等。6.2.3.3员工卫生状况涂抹:连体服、手套、手。涂抹及检测方法同6.2.1。7判定依据菌落总数:空气暴露30min≤10CFU/皿,表面涂抹≤50CFU/mL;霉菌、酵母:空气暴露30min≤10CFU/皿,表面涂抹≤10CFU/mL;阪崎肠杆菌:空气暴露30min0CFU/皿,表面涂抹不得检出大肠菌群:阴性。8.检测报告检验员应真实、准确填写《生产车间环境微生物检测报告》,经实验室主管审核后,报送品控部和生产部。9.说明9.1混粉间、杀菌机、预封机、真封机为每天必须检测的部位,100g灌装间、软包装灌装间、压片间、储粉间仅在使用时进行检测。9.2钢管、软管应每次拆卸清洗后进行检测。9.3一般情况下,仅进行车间空气中的阪崎肠杆菌检测,必要时可采用涂抹法对某些部位进行阪崎肠杆菌检测。9.4员工手部涂抹样仅检测大肠菌群。附录车间空气采样位点图代表空气采样点;代表车间人员入口风淋室;代表混粉间门口;一个处处像别人表明自己优秀的,恰恰证明了他(她)并不优秀,或者说缺什么,便炫耀什么。真正的优秀,并不是指一个人完美无缺,偶像般的光芒四射。而是要真实地活着,真实地爱着。对生活饱有热情,满足与一些小确幸,也要经得起诱惑,耐得住寂寞,内心始终如孩童般的纯真。要知道,你走的每一步,都是为了遇见更好的自己,都是为了不辜负所有的好年华。一个真实的人,一定也是个有担当的。不论身处何地,居于何种逆境,他(她)们都不会畏惧坎坷和暴风雨的袭击。因为知道活着的意义,就是真实的直面风浪。生而为人,我们可以失败,却不能败的没有风骨,甚至连挑战的资格都不敢有。人当如玉,无骨不去其身。生于尘,立于世,便该有一颗宽厚仁德之心,便有一份容天下之事的气度。一个真实的人,但是又不会过于执着。因为懂得,水至清则无鱼,人至察则无徒的道理。完美主义者最大的悲哀,就是活得不真实,不知道审时度势,适可而止。一扇窗,推开是艳阳天,关闭,也要安暖向阳。不烦不忧,该来的就用心珍惜,坦然以对;要走的就随它去,无怨无悔。人活着,就是在修行,最大的乐趣,就是从痛苦中寻找快乐。以积极的状态,过好每一天,生活不完美,我们也要向美而生。一个真实的人,一定是懂爱的。时光的旅途中,大多数都是匆匆擦肩的过客。只有那么微乎其微的人,才可以相遇,结伴同行。而这样的结伴一定又是基于志趣相投,心性相近的品性。最好的爱,不是在于共富贵,而是可以共患难,就像一对翅膀,只有相互拥抱着才能飞翔。爱似琉璃,正是因为纯粹干净,不沾染俗世的美。懂爱的人,一定是真实的人。正是因为懂得真爱的不易,所以更是以真面目面对彼此,十指紧扣,甘愿与爱的人把世间各种风景都看透,无论风雨,安暖相伴。一个真实的人,定然是有着大智慧的。人生在世,什么都追求好,追求完美,虽然这是一种积极的思想,却会很累,不仅自己累,身边人也会因为你而累。到最后就会在疲于奔命中,丧失自我。“兰居幽谷,虽孤独亦芬芳;梅开偏隅,虽寂静亦流香,”这便是一份淡泊和沉稳。一些事尽力了就好,无愧别人,无愧己心,认真地活着,便是不辜负。因为懂得,人生的风景,最终是回归到心灵的本源。和谐共生,平等友爱,才是对生命的尊重和对自己的珍视。