搜索
自身免疫性溶血性贫血输血前试验若干疑难问题一.输血科:对AIHA的输血试验深感棘手•二,第一难题•ABO正,反定型不合,怎么办?•三,第二难题•抗体筛查受干扰,怎么办?•四,第三难题•总是配不上血,怎么办?•五,AIHA的学术研讨与自我保护一.输血科对AIHA的输血试验深感棘手•自免贫(自身免疫性溶血性贫血,AIHA)发病率:2.6/10万人.年病程:AIHA46-64%＞2年•AIHA住院期间一般都需要反复多次输血二,AIHA输血试验第一个难题ABO正,反定型不合•(一)AIHA的特点1.体内有自身抗体2.自身抗体不但凝集自身红细胞•而且凝集所有人的红细胞•3.自身抗体分三种:•(1)温抗体(IgG,37C最活跃)•(2)冷抗体(IgM,20C以下最活跃)•(3)冷-热抗体(D-L抗体)•4.自身抗体存在形式有二种•(1)粘在红细胞上:直抗+•(2)游离在血清中:间抗+•••(二)AIHA为什么会发生ABO正,反定型不合?•1.自身抗体会干扰ABO正定型•(1)病人的红细胞包被了自身抗体•在非盐水介质中可能发生非特异性凝集,•(2)如果病人血清中有冷自身抗体•温度降低,•凝集病人自身红细胞••→导致ABO正定型错误••2.自身抗体会干扰ABO反定型•如果病人间抗(+)•冷自身抗体,在盐水介质中•可以非特异性凝集ABO反定型红细胞••→导致ABO反定型错误••(三)ABO正,反定型不合,怎么办?•1.常规输血:•采用特殊技术,排除自身抗体干扰法•(1)ABO正定型•三种办法,先去除病人红细胞上自身抗体,•再定型•①保温法②洗涤法••③放散法•5%二磷酸氯奎法，•甘氨酸法,•45C热放散法，•……………..•→放散至病人红细胞直抗(--)•,再作正定型••⑵ABO反定型•①间抗(--)者•反定型不受干扰•②间抗(+)者•用随机OC吸收病人血清中自身抗体,•至间抗(-);再作反定型••三,AIHA输血试验第二难题•抗体筛查受干扰•(一)AIHA,如果间抗(-)•病人血清中无游离的自身抗体,•按常规方法作抗筛•(二)AIHA,如果间抗(+)•病人血清中有游离的自身抗体,•不管血清中有没有不规则抗体:•抗筛细胞都会凝集;••间抗(+)病人的血清:•必须经过处理,•先去除自身抗体以后,•才能作抗筛••(三)间抗(+)病人血清,抗筛前除去自身抗体的四个办法•1.病人自身红细胞吸收法••放散血清不规则抗体•直抗+直抗--自身抗体••放散直抗+直抗--反复……直抗--•2.同种红细胞吸收法•(1)采用献血员红细胞吸收,•方法同自身红细胞吸收•(2)优点:吸收材料丰富•••3.稀释法•(1)把病人血清稀释,直到自身抗体消失(效价0),•→血清中留下不规则抗体,作抗筛(2)优点:操作容易•(3)局限性:•只适用于不规则抗体比自身抗体效价高的样本,••4.保温法•(1)实验全部过程在37C进行•(2)优点:•理论上操作简单•(3)局限性:•冷抗体有一定效果,•温抗体无效•四,AIHA输血试验第三个难题总是配不上血(一)首先明确两个概念1.AIHA用常规方法永远配不上血(1)次侧配血:用常规方法是永远配不上血的!(2)主侧配血:AIHA病人中,间抗(+)者大约占50%用常规方法,大约占50%病人永远配不上血的!•2.主侧配血和抗筛,在理论上是一回事;自身抗体对主侧配血干扰,与对抗筛干扰原理一样因此,从理论上说,解决主侧配血的办法和抗筛一样(二)AIHA,直抗(+),间抗(-)者,怎么配血?•1.病人血清中没有游离的自身抗体•(1)不干扰主侧配血•(2)但因病人直抗(+),次侧配血总是不合!•2.次侧配血总是不合,输血怎么办?•选择《规范》规定不作次侧配血的血成份••(三)AIHA,直抗(+),间抗(+)者(占50%),•怎么配血?•1.次侧配血:•只有选择《规范》规定不作次侧配血的血成份•2.主侧配血:•主侧配血总会凝集3.间抗(+)AIHA:必须先去除病人血中的自身抗体,再作主侧配血有六种方法去除病人血中的自身抗体•(1)自身红细胞吸收法(AABB技术手册)•(2)献血员红细胞吸收法(AABB技术手册)•(3)病人血清稀释法(AABB技术手册)••(4)与自身对照比较法•病人血清+自身RBC2+•病人血清+张三RBC3+•病人血清+李四RBC3+•病人血清+王五RBC2+•→选王五血输•••AABB.TechnicalManual.16ed,2019•CHAPTER17PositiveDATandImmune-MediatedHemolysis-507•Ifthepatientwhohaswarm-reactiveautoantibodiesintheserumneedstransfusion,itisimportanttodetermineifalloantibodiesarealsopresent.Somealloantibodiesmaymaketheirpresenceknownbyreactingmorestronglyoratdifferentphasesthantheautoantibody,but,quiteoften,studiesmaynotsuggesttheexistenceofmaskedalloantibodies•(5)单采血浆法•(6)保温法••4.到目前,直抗(+),间抗(+)AIHA:•(1)次侧配血:•没法!•(2)主侧配血:•只有上面6种方法••(四)AIHA输血前试,DNA技术有用吗?•1.DNA只对血型鉴定:•有一定“辅助作用”,或“参考价值”•2.DNA技术,只查基因,”推导”抗原,•不检查抗体抗筛和配血是抗体问题•(五)AIHA配血中应该注意的其它问题•1.AIHA,＞1/3病人有不规则抗体,不要漏检!•AABBTechnicalManual，16ed.2019,510•Therearemultiplereportsintheliteraturedemonstratingthatpatientswhohavewarmautoantibodiesintheirserahaveahigherrateofalloimmunization•(eg,12%to40%,withameanof32%)•••2.自身抗体血型特异性不要漏检•部分AIHA血清中的自身抗体,具有血型特异性，•如果输具有“某种Rh抗原的红细胞”•容易发生无效输血•••(六)AIHA,直抗(+),间抗(+),配血有意义吗?•AABB.TechnicalManual.16ed.2019,510•Otherlaboratoriesdonotperformacrossmatch•withtheadsorbedserumbecauseallunitswillbeincompatibleinvivoduetotheautoantibody•••间抗(+)的AIHA:常规配血肯定不合••①要么发出配血无凝集的假报告，②要么发出配血有凝集的真报告，•••采用吸收方法,去除病人血中的自身抗体干扰以后,•主侧配血,不是就可以相合了吗?•把试管血样中的自身抗体吸收后配血相合•并没有吸收掉病人体内的自身抗体供者的红细胞输进病人体内,仍然不合(七)如果间抗(+),主侧配血不合，能输血吗?1.理论上:主侧配血不相合,不能输血!2,学术上分析:(1)单纯自身抗体导致配血不相合，可以输血••(2)如果被自身抗体掩盖的同种抗体漏检，则可能发生严重输血反应，AIHA病人,抗筛比配血更重要!•一般病人:•配血第一,血型第二,抗筛第三•AIHA则是:•抗筛第一,血型第二,配血第三•五,AIHA的学术研讨与自我保护•(一)今天对AIHA输血试验若干疑难问题,•是纯粹作学术研讨•如果某个说法与某个政府文件矛盾,•临床输血实践中,•完全按政府文件操作,•不要问为什么!!!••(二)输血科遇到AIHA,•血型鉴定,抗筛,配血困难重重•1.政策不明确•2.专家无统一意见•••••(三)输血前试验中,下面这些棘手问题•1.AIHAABO正,反定型不合•采用什么规范化程序鉴定?•抢救输血,如果血型一时定不出来,•可不可以先不报告病人是什么血型,先按“配合性输血”的原则抢救?•2.输某些红细胞要作交叉配血,•①AIHA,直抗(+)者,•次测肯定配不上血;怎么办?•②AIHA间抗(+)者,•用特殊技术作主侧配血,;•如果耽误了抢救,怎么办?•③如果选择配血凝集比自身对照弱的血输,•有没有风险?•(五)AIHA输血前试验需要研究的问题•1,快速、可靠的ABO血型鉴定技术或工具。•例如,研制从病房采血至血样送到实验室完成ABO定型全过程的控温系统或设备;•降低IgG自身抗体致敏的红细胞在ABO定型血清中非特异性凝集的技术;•几种放散方法的改良以进一步减少红细胞的丢失和缩短操作时间,等等。•2,研究一种只吸收自身抗体,不吸收不规则抗体或血型抗体的生物材料或技术,或封闭献血员红细胞主要血型抗原(如Rh-D、C、c、E、e,Fya,Jka)而不封闭自身抗原的生物材料或技术。•3,AIHA输血前试验的规范化流程,•例如,AIHA患者紧急抢救输血时,ABO正、反定型不一致,怎么办?•必须作抗体筛查吗?没有条件作自身抗体吸收怎么办?•间抗(+)者,主侧配血到底采用那种方法才是规范操作?谢谢兰炯采南方医科大学,南方医院510515广州大道北020-61641342洛阳市中心血站0379-63563932gzlanjctom