南华大学UniversityofSouthChina血小板检查南华大学医学检验教研室谢海涛南华大学UniversityofSouthChina一、血小板计数二、血小板形态报告内容南华大学UniversityofSouthChina一血小板计数血小板具有维持血管内皮完整性的功能和粘附聚集、释放促凝和血块收缩功能。血小板计数是测定全血中血小板的浓度,是止血凝血检验最常用的试验之一。检测原理:与红细胞计数相似。南华大学UniversityofSouthChina南华大学UniversityofSouthChina方法学评价血液分析仪法:速度快、重复性好、准确性高,同时提供多种参数,但不能排除非血小板有形成分的干扰,明显异常需镜检。流式细胞仪法:准确性高,费用昂贵,血小板计数参考方法。相差显微镜直接计数法:易于识别,还可照相核对,是手工计数的参考方法。普通光学显微镜直接计数法:分为破坏或不破坏红细胞计数两种。南华大学UniversityofSouthChina草酸铵:为首选,破坏红细胞能力强清晰易辨。复方尿素:易辨认,但尿素易分解,不能完全破坏红细胞。高铁氰化钾:不能完全破坏红细胞。复方碘:不破坏红细胞,易长菌,已淘汰。试剂评价南华大学UniversityofSouthChina普通光学显微镜直接计数法用稀释液将血液稀释一定的倍数,充入血细胞计数池,在显微镜下计数一定体积的血小板数,经换算求出每升血液中血小板数量。南华大学UniversityofSouthChina质量保证原则:避免血小板被激活、破坏、避免污染。检测前:标本采集、试剂配制等。检测中:稀释液质量、仪器进行质控等。检测后:复核、复对等。南华大学UniversityofSouthChina结果报告:计数单位容积内血小板的含量参考值:100-300×109/L临床意义:一.血小板减少:100×109/L1.血小板生成障碍2.血小板破坏或消耗过多3.血小板分布异常二.血小板增多:>400×109/L1.原发性增多2.反应性增多。南华大学UniversityofSouthChina南华大学UniversityofSouthChina二、血小板形态镜检观察血涂片染色后的血小板形态、聚集性和分布情况,对判断、分析血小板相关疾病有重要的意义。正常血小板形态:体积小、非抗凝时成簇分布,抗凝时多散在分布。南华大学UniversityofSouthChina血小板散在分布南华大学UniversityofSouthChina血小板成簇分布南华大学UniversityofSouthChina异常血小板形态(1)大小异常:出现明显的形态不均。大血小板:主要见于ITP、粒细胞性白血病、血小板无力症等。小血小板:主要见于缺铁贫、再障(2)形态异常:可出现杆状、逗点状、蝌蚪状、蛇形和丝状突起南华大学UniversityofSouthChina异常血小板南华大学UniversityofSouthChina大血小板南华大学UniversityofSouthChina血小板形态异常南华大学UniversityofSouthChina正常人偶见形态异常:影响因素多,无特异性,比值超过10%才有意义。血小板颗粒减少见于骨髓增生或骨髓增生异常综合征。南华大学UniversityofSouthChina血小板卫星现象:血小板黏附、围绕于中性粒细胞的现象血小板和中性粒细胞形态和功能正常,是血液分析仪血小板计数假性减少的原因之一。南华大学UniversityofSouthChina血小板卫星现象南华大学UniversityofSouthChina血小板“黏附”红细胞(3)聚集性和分布异常正常的,聚集和分散的血小板之比为20︰1。南华大学UniversityofSouthChina血小板聚集分布南华大学UniversityofSouthChina血小板增多南华大学UniversityofSouthChina血小板增多:特发性血小板增多症(ET)和血小板增多的慢粒,血小板有大片聚集。血小板减少:再障和原发性血小板减少性紫癜。血小板功能异常:血小板无力症时血小板无聚集功能,散在分布。南华大学UniversityofSouthChina案例一个血小板减少的病人,入院时PLT1万,伴有少量鼻衄,其余部位无明显出血,发病前一个月有上呼吸道感染史。入院后骨髓细胞学检查提示符合ITP骨髓象,自身抗体谱阴性,肝炎标记物示HCV抗体阳性(既往有输血史),肝功能正常,血HP抗体弱阳性,结合病史,考虑为ITP,丙肝相关性可能大。治疗上,先予地塞米松10mg静滴qd,同时输血小板支持,连续治疗一周,血小板一直在5千至1万之间,患者除少量鼻衄外无其他出血倾向。南华大学UniversityofSouthChina遂又予丙球冲击治疗20gd,五天后复查血小板仍在1万左右,鉴于患者有丙肝史,考虑为丙肝相关性ITP可能,拟用干扰素、环孢素等免疫抑制剂治疗,但担心肝损害,暂缓上述方案,又用甲强龙(40mgqd)联合巨和粒(1.5mgqd),连续治疗10天,血小板一直在1万左右,患者无出血倾向。从上述治疗反应看,像难治性ITP。后来患者直接至化验室抽血化验,惊讶的是血小板尽然15万,连续多次检测均在10万以上。后来考虑到,文献报道发病率在1%以下可能存在假性血小板减少,因用EDTA抗凝剂试管可诱发假性血小板减少。南华大学UniversityofSouthChina经验教训:1、初次到本院检查,血小板50X109/L的,不管机器是否报“聚集”,必须进行目测血小板检查。用的就是临检操作规程上的目测方法。看看有没有聚集,没有聚集就可以发送了。2、主要仪器报“聚集”,需要重点关注。2.1此时需进行目测血小板,计数盘中血小板聚集成团,不能计数。2.2马上通知病人用枸橼酸抗凝管采血,进行全血细胞分析,一般情况下血小板计数恢复正常。2.3告知病人以后做血常规不能用“紫管”,要用“蓝管”。南华大学UniversityofSouthChina3、但是,在临床中发现,有些病人用枸橼酸抗凝也有出现血小板聚集情况,此时最好的办法是要求病人采手指血,马上进行全血细胞分析。4、日常工作中,发现血小板50X109/L,一般与历史结果比较,相近可以发送。南华大学UniversityofSouthChina血涂片染色检查的重要意义在于,全血涂片染色镜检本身对仪器检出的各种数据是一种有效的质控方法,不仅对WBC数、PLT数可以进行核对,而且可以核实成熟RBC大小、着色等与RBC各参数是否一致,同时还可观察异常RBC的有无及多少。血涂片染色镜检是提供鉴别诊断和提示进一步必要检查的重要工具,特别是在快速诊断某些特异性感染方面(如疟原虫、黑热病原虫及丝虫病等),血涂片染色镜检有其重要作用,另外,血涂片染色镜检的主要作用还在于对贫血与PLT减少症进行鉴别诊断,以及检出白血病和淋巴瘤等,并确定其特点。南华大学UniversityofSouthChina41条建议标准:1,新生儿首次检测时,应涂片镜检(slidereview)。2,WBC,HGB,RBC,PLT,RET超出线性范围,应该稀释样本,重新做。3,WBC,PLT低于实验室仪器检测范围,应该执行实验室SOP。4,WBC,RBC,PLT,HGB没有结果,应首先检查标本是不是有凝块,其次是重新检测标本,如果不行,就用手工计数替换。5,WBC大于30.0或者小于4.0,且为首次检测标本时,应该涂片镜检。6,WBC大于30.0或者小于4.0,且差值检验失败,同时是3天以内检测,应该涂片镜检。7,PLT小于100或者大于1000,并且是首次检查时,应该涂片镜检。8,不管PLT是什么值,并且差值检验失败时,应该涂片镜检。9,HGB在该性别,该年龄段人群参考范围上限以上2g/dl,或者在7g/dl以下,且为首次检查,应该涂片镜检,并且查看标本是否正确。10,成人MCV小于75fl或者大于105fl,并且是首次检查,同时样本留置时间小于24小时,应该涂片镜检。南华大学UniversityofSouthChina11,成人MCV大于105fl,同时标本留置时间大于24小时,首先应该涂片镜检,看是否有大红细胞相关的改变,如果没有相关应嘱抽取新鲜标本检测,如果不能抽取新鲜标本,应该在报告单上说明。12,不管MCV检测结果是什么值,只要差值检验失败,并且标本留置时间小于24小时,应核对标本。13,MCHC在参考范围上限两个单位,应该检查是否有脂血,溶血,RBC是否有聚集,是否与球形红细胞。14,MCHC小雨30,并且MCV正常或者升高,15,RDW大于22,且为首次检查时,应该涂片镜检。16,当仪器不分类或者分类不完全时,应该涂片镜检,手工分类。17,中性粒细胞绝对值大于20.0或者小于1.0,且为首次检查时,应该涂片镜检。18,成人淋巴细胞绝对值大于5.0,或者12岁以下儿童大于7.0,并且为首次检查时,应该涂片镜检。19,成人单核细胞绝对值大于1.5或者12岁以下儿童大于3.0,且为首次检查时,应该涂片镜检。20,嗜酸性粒细胞绝对值大于2.0,且为首次检查时,应该涂片镜检。南华大学UniversityofSouthChina21,嗜碱性粒细胞绝对值大于0.5,且为首次检查时,应该涂片镜检。22,不管有核红细胞为任何值,都应该涂片镜检(NRBC的识别可能是靠仪器--译者)。23,网织红细胞绝对值大于0.100,且为首次检查时,应该涂片镜检。24,图像可疑(不成熟细胞除外),且为首次检查,同时是成人时,应该涂片镜检。25,图像可疑,且为首次检查,同时是儿童时,应该涂片镜检。26,WBC图像不可靠,不管别的原因,首先应该检查核对标本,重新做,如果继续出现,应该检查仪器输出,第三,如果需要,应该手工分类。27,RBC图像异常,不管别的原因,应该涂片镜检。28,RBC出现二态性(双峰,dimorphicRBC),且为首次检查,应该涂片镜检。29,红细胞不溶,不管别的原因,应该观察白细胞的散射图或者直方图,然后以实验室SOP文件执行(考虑对计数进行校正),接着涂片镜检是否有异常RBC。30,仪器提示PLT聚集结果,不论计数,首先应该检查标本有无凝块,其次应该涂片镜检估计PLT计数,如果继续聚集,执行实验室SOP。南华大学UniversityofSouthChina31,血小板直方图异常(血小板聚集引起的除外),应该涂片镜检。32,有不成熟粒细胞(仪器图像判断),且为首次检查时,应该涂片镜检。33,有不成熟粒细胞(仪器图像判断),34,有核左移的图像(仪器图像判断或者提示),应该执行实验室SOP。35,有异型(变异)淋巴细胞图像(仪器提示有异淋),且为首次检查时,应该涂片镜检。36,有异型(变异)淋巴细胞图像(仪器提示有异淋),以前证实过结果,但是WBC阳性差值失败,应该涂片镜检(希望专家能解释一下本条规则---译者)。37,有原始细胞图像(仪器提示有原始细胞),且为首次检查时,应该涂片镜检。38,有原始细胞图像(仪器提示有原始细胞),以前证实过结果,差值通过或者对WBC有阴性差值,且在3-7天内检查,应该执行实验室SOP。南华大学UniversityofSouthChina39,有原始细胞图像(仪器提示有原始细胞),以前证实过结果,且WBC阳性差值失败,应该涂片镜检。40,有核红细胞图像(仪器提示有NRBC),应该涂片镜检,如果发现大量NRBC,应该对WBC进行校正。41,网织红细胞模式异常(指高中低三中网织红细胞比例不恰当,比如高荧光强度RET的绝对值大于低荧光强度RET)。应首先检查仪器输出,如果是吸样问题应该重新检测,如果继续出现,应该涂片观察。南华大学UniversityofSouthChina思考题1血小板计数假性减少的原因有哪些?应当怎样避免?2血液分析仪光散射法血小板测定原理A、血小板与红细胞大小不同B、血小板与红细胞表面抗原不同C、血小板与红细胞细胞折射指数不同D、血小板与红细胞对光亮度吸收率不同3正常血小板平均